林玉海

摘要：牛病毒性呼吸道疾病是由多種病原引起的以呼吸道癥狀為主的疾病。其病因的復(fù)雜化導(dǎo)致本病在臨床上難于治療，給牛場造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失，也導(dǎo)致養(yǎng)牛業(yè)的巨大風(fēng)險(xiǎn)，因此需要在養(yǎng)殖過程中重點(diǎn)防范。該文將針對牛病毒性呼吸道疾病的診斷方法和防治方法進(jìn)行總結(jié)和歸納。

關(guān)鍵詞：牛;病毒性呼吸道疾病;診斷

中圖分類號：S858.23

文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B

doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.22.035

0引言

牛病毒性呼吸道疾病給養(yǎng)牛業(yè)造成的危害十分巨大，其具有很高的發(fā)病率和死亡率。其發(fā)病不僅有多種病原，還含有多種誘因。在臨床上不注意就會發(fā)病，導(dǎo)致病牛出現(xiàn)死亡。

1疾病簡介

本病主要的發(fā)病對象為犢牛、奶牛及育肥肉牛，其高發(fā)季節(jié)為秋冬兩季[1]。主要是由于傳染性病原引起，包括病毒、細(xì)菌和支原體[2]。環(huán)境因素和應(yīng)激因素也是本病發(fā)生的主要誘因，常見的誘因有溫度忽高忽低、養(yǎng)殖場養(yǎng)殖密度過大、環(huán)境中濕度過高、環(huán)境中噪音較大、斷奶應(yīng)激以及運(yùn)輸過程的問題。而且隨著過內(nèi)養(yǎng)殖場不斷從國外的一些養(yǎng)殖場引進(jìn)品種，造成本病發(fā)生的病原體的種類也隨之出現(xiàn)增加，也導(dǎo)致本病不斷復(fù)雜化。不僅在診斷中趨于復(fù)雜，而且在防治中情況也越來越復(fù)雜，不利于對本病預(yù)防。目前本病的主要病原有以下幾種，分別是牛病毒性腹瀉病毒、牛副流感病毒、牛傳染性鼻氣管炎病毒和牛呼吸道合胞體病毒以及牛2型腺病毒。當(dāng)牛感染這些病毒后，會使牛免疫系統(tǒng)被病原所抑制，還會對牛的呼吸道中的上皮細(xì)胞形成危害，發(fā)生病理性反應(yīng)。

2診斷方法

本病的診斷通過臨床癥狀和病理變化不能做出確診，需要通過實(shí)驗(yàn)室技術(shù)進(jìn)行確診，確診的具體方法分為病毒分離鑒定、病毒核酸鑒定、血清學(xué)鑒定方法、其他檢測方法。

2.1病毒分離鑒定

病毒分離鑒定是應(yīng)用牛腎細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，在臨床剖檢時采集病料后在這些細(xì)胞上培養(yǎng)，采集病料時要注意病料的種類和位置，種類有鼻腔分泌物，可以應(yīng)用鼻腔拭子采集。氣管的病變以及肺部的病變可以直接取病料，注意采集發(fā)病部位和正常部位相交的位置，還可以采集病牛的血液供檢測，有的疾病還可以通過對脾臟的采集來分離。牛病毒性腹瀉病毒具有2種病變類型：致細(xì)胞病變型（°CP）和非致細(xì)胞病變型（nCP）[3]。其中致細(xì)胞病變型能夠?qū)е赂腥炯?xì)胞的胞漿內(nèi)產(chǎn)生空泡，胞漿變成圓形，最后細(xì)胞會逐漸死亡。而臨床上發(fā)現(xiàn)更多的是非致細(xì)胞病變型。本病毒通過對血液的培養(yǎng)能夠分離到，其常存活于血液內(nèi)的單核細(xì)胞內(nèi)。在鑒定中應(yīng)與牛傳染性鼻氣管炎病毒進(jìn)行區(qū)別。牛副流感病毒3型能使牛腎的單層細(xì)胞呈現(xiàn)出拉網(wǎng)狀，并從細(xì)胞壁上脫落。本病毒可以吸附牛和豚鼠的紅細(xì)胞，所以可以通過此實(shí)驗(yàn)確定有無病毒存在。牛呼吸道合胞體病毒能在呼吸系統(tǒng)的細(xì)胞的培養(yǎng)物中良好生長。通常在實(shí)驗(yàn)中大多應(yīng)用牛的鼻甲細(xì)胞進(jìn)行此病毒培養(yǎng)。培養(yǎng)后可見病變細(xì)胞出現(xiàn)融合，有的呈現(xiàn)出氣球樣，在細(xì)胞生長發(fā)育晚期，可見其開始出現(xiàn)腫大和聚集的現(xiàn)象，最后會變得壞死和脫落。

2.2病毒核酸鑒定

病毒核酸鑒定具有高敏感性，高特異性，通過對病毒粒子的核基因組DNA或者RNA等進(jìn)行檢測確定病毒是否存在，也可以確定本病發(fā)病的病原體。核酸鑒定常用的方法有RT一P°CR方法，有實(shí)時熒光定量P°CR法。這些方法的應(yīng)用能顯著提升病毒檢測的靈敏性。應(yīng)用本方法能縮短診斷時間，通常從病原分離到結(jié)果出來僅需要幾個小時就可以得出結(jié)果。本方法主要是通過GenBank上面公布的核酸序列設(shè)計(jì)相應(yīng)引物，應(yīng)用引物并根據(jù)相應(yīng)的反應(yīng)條件從而建立檢測方法，可以檢測出病料中是否感染有某種特定的病原體。

2.3血清學(xué)鑒定方法

血清學(xué)方法是在診斷中比較常用的一種方法，在這類方法中可以應(yīng)用的具體方法較多，常見的是病毒中和試驗(yàn)、免疫熒光試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和膠體金檢測試驗(yàn)等。通過應(yīng)用這些技術(shù)也能達(dá)到對病原的快速鑒定，進(jìn)而達(dá)到對疾病的快速診斷。病毒中和試驗(yàn)是檢測特異性抗體。本文研究的幾種病毒均可以通過中和試驗(yàn)進(jìn)行檢測。試驗(yàn)是將病毒和已經(jīng)稀釋后的血清進(jìn)行作用，血清需要倍比稀釋，兩者在作用1h后可以添加進(jìn)人一些指示性細(xì)胞，在379°C中進(jìn)行恒溫培養(yǎng)，在4～5d后就可以對其進(jìn)行讀數(shù)。在讀數(shù)時能阻止50%的細(xì)胞發(fā)生病變的血清的最大稀釋度為此次檢測抗體的效價(jià)。本試驗(yàn)具有較高的敏感性和特異性，但試驗(yàn)時間較長，受到的干擾因素也較多。免疫熒光試驗(yàn)是對病原進(jìn)行直接檢查的一種重要的技術(shù)手段。其應(yīng)用具有一定的限定性，如在牛病毒性腹瀉病毒的鑒定中不適合應(yīng)用。本方法的應(yīng)用需要具有相對較高的技術(shù)水平和應(yīng)用試劑，不能進(jìn)行大量樣本檢測。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是一種可以對抗原和抗體均檢測的技術(shù)。目前已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用，尤其是在進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查時應(yīng)用不僅能快速診斷，而且操作技術(shù)相對較為簡單方便，適合于在臨床上應(yīng)用。本方法常用的就是普通ELISA，還可以應(yīng)用雙抗體.夾心的ELISA和間接ELISA等。本方法與病毒中和試驗(yàn)進(jìn)行比較，可以發(fā)現(xiàn)具有快速和敏感的特征。膠體金技術(shù)也具有方便、快捷和敏感的特征。在臨床上也具有相當(dāng)多應(yīng)用。膠體金技術(shù)中常見的有膠體金免疫滲濾法和膠體金免疫層析法。目前已經(jīng)得到廣泛應(yīng)用?，F(xiàn)在已經(jīng)研制出牛病毒性腹瀉病毒的膠體金試紙，是利用抗原制備的試紙條，可以用來檢測抗體。

2.4其他檢測方法

常見的有多重RT-PCR技術(shù)、固相和液相的芯片以及多重膠體金檢測技術(shù)。目前還有人在研究反轉(zhuǎn)錄PCR-ELISA技術(shù)，這項(xiàng)技術(shù)的應(yīng)用可以同時檢測人類的9種呼吸道病原體。而且具有較高的靈敏度和特異性，所以對牛的病毒性呼吸道疾病也可以研制此方法進(jìn)行檢測。

3防治措施

本病預(yù)防還是需要通過加強(qiáng)飼養(yǎng)管理。在養(yǎng)殖中，應(yīng)采用自繁自養(yǎng)的模式，避免從其他地方引種，這樣可以避免在引種的過程中將病原體同時帶進(jìn)養(yǎng)殖場。如果確實(shí)需要引種，應(yīng)對所引進(jìn)的牛檢疫，在引進(jìn)養(yǎng)殖場后還需要對其隔離觀察，待隔離30d后，如果沒有發(fā)病，方可混群飼養(yǎng)。在日常飼養(yǎng)管理中，要保持合理的牛群密度，不能過于擁擠。對不同年齡和不同來源的牛要分群飼養(yǎng)。牛舍要勤打掃，勤出糞，還要制定相應(yīng)的消毒制度。按照制度定期消毒，在消毒時必須要做到全面，不能留有死角。消毒液要輪換使用，避免同一種消毒液讓病毒產(chǎn)生耐藥性。還要對進(jìn)人養(yǎng)殖區(qū)的人員和車輛以及各種器具消毒。防止病原體被帶人養(yǎng)殖場，導(dǎo)致牛群感染發(fā)病。牛舍要保持相對穩(wěn)定的溫濕度。尤其是在夏季和冬季要具有相應(yīng)的措施維持溫度。還需要有通風(fēng)條件，以便能將有害氣體排出。給牛飼喂良好的粗、精飼料和清潔的飲水。確保牛每天能攝取均衡營養(yǎng)物質(zhì)供自身需求。

4結(jié)束語

在養(yǎng)殖中還需要避免各種應(yīng)激因素，防止牛群發(fā)生應(yīng)激。本病是由病毒引起，沒有特效藥物，治療是通過對癥治療和提高免疫力促使其康復(fù)。

參考文獻(xiàn)

[1]梁立華，牛病毒性呼吸道疾病診斷技術(shù)探析[J].當(dāng)代畜牧，2015（29）：62-63.

[2]李鵬，張淑琴，溫永俊，等.牛病毒性呼吸道疾病診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J].動物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2013，34（4）：90-93.

[3]孔祥明.牛病毒性呼吸道疾病診斷技術(shù)[J].湖北畜牧獸醫(yī)，2014，35（11）：48-49.