曹翔　彭賢瑞　范吉標

摘要：轉(zhuǎn)錄因子是響應(yīng)環(huán)境脅迫，即干旱、鹽分和寒冷等植物信號傳導途徑的主要調(diào)節(jié)劑，MYH是植物最大轉(zhuǎn)錄因子家族之一，MYB轉(zhuǎn)錄因子亞家族特定于植物界。綜述提供了MYB基因家族在植物中的最新功能調(diào)控研究進展，以了解植物中MYH轉(zhuǎn)錄因子的調(diào)控機制，為植物分子育種研究提供新思路。

關(guān)鍵詞：轉(zhuǎn)錄因子;MYH;基因家族;研究進展

轉(zhuǎn)錄因子（TF）是控制所有生物基因表達的重要調(diào)節(jié)因子，在植物發(fā)育、細胞周期、細胞信號和逆境反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。TF通過與目的基因的遠端和局部順式元件結(jié)合來調(diào)控基因表達，其中與基因組特征、DNA結(jié)構(gòu)和TF相互作用而行使功能。目前有各種針對不同作物的轉(zhuǎn)錄因子數(shù)據(jù)庫，如，植物轉(zhuǎn)錄因子數(shù)據(jù)庫、草轉(zhuǎn)錄因子數(shù)據(jù)庫等，已發(fā)現(xiàn)的主要的TF家族有WRKY、MYB、NAC和AP2/ERF，是與不同逆境相關(guān)的各種基因的重要調(diào)節(jié)因子，是提高植物對不同逆境刺激抗性的基因工程的研究熱點。根據(jù)植物的TF數(shù)據(jù)庫，在水稻、大麥等許多植物中已報道了大量的轉(zhuǎn)錄因子。到目前為止，新的轉(zhuǎn)錄因子正在繼續(xù)被發(fā)現(xiàn)，研究的植物品種也在增多。

MYH轉(zhuǎn)錄因子家族是一類含有高度保守的DNA結(jié)合域，由5052個氮基酸為一個重復組成的高度保守的肽段，大多數(shù)MYB蛋白在N端含有一段氨基酸殘基組成的MYB結(jié)構(gòu)域，根據(jù)其蛋白重復結(jié)構(gòu)域數(shù)量，可分為4R—MYB、3R-MYB、1R-MYB（MYB-related）、R2R3-MYB等4類，植物中絕大多數(shù)MYB是R2R3-MYB轉(zhuǎn)錄因子。R2R3-MYB型轉(zhuǎn)錄因子，具有兩個與DNA結(jié)合的成骨細胞相關(guān)的（MYB）結(jié)構(gòu)域重復序列，是一組關(guān)鍵的調(diào)控因子，是響應(yīng)環(huán)境脅迫的重要調(diào)節(jié)因子，控制著植物不同的發(fā)育過程和逆境耐受性。

第一個植物MYB轉(zhuǎn)錄因子是1987年從玉米中克隆到的ZmMYBC1，研究發(fā)現(xiàn)，ZmMYBC1主要參與玉米花青素的合成。此后研究人員利用功能基因組學、轉(zhuǎn)錄組學和蛋白質(zhì)組學等現(xiàn)代分子工具在各種植物中發(fā)現(xiàn)和篩選出了大量的MYB轉(zhuǎn)錄因子，因此，MYB轉(zhuǎn)錄因子是植物中數(shù)量最多的一類轉(zhuǎn)錄因子之一，同時，不斷深入的研究也揭示了MYB轉(zhuǎn)錄因子在植物生長發(fā)育過程中各種途徑的調(diào)控機制，越來越多的證據(jù)支持MYB將是植物育種與改良的潛力轉(zhuǎn)錄因子。

一、植物MYB轉(zhuǎn)錄因子在逆境下的作用機制

（一）植物MYB轉(zhuǎn)錄因子在生物中的脅迫作用

Li等進行了向日葵MYB家族的全基因組表征，總共鑒定了245個基因作為MYB候選基因。qRT-PCR分析結(jié)果表明，在不同的脅迫處理下，向日葵中的許多MYB基因在表達上存在顯著差異，這揭示HaMYB基因可以作為提高向日葵抗逆性的靶標。在非生物脅迫下，HaMYB16.1在PEG模擬干旱脅迫下表現(xiàn)出較高的表達水平，但在鹽脅迫下根和葉中的表達水平均極度下調(diào)。HaMYB15.6、HaMYB15.13、HaMYB 15.14和HaMYB58的轉(zhuǎn)錄水平隨著根系鹽濃度的增加而顯著增強，而HaMYB15.13、HaMYB52.2和HaMYB52.4在葉片中的表達隨PEG濃度增加而顯著增強。另外，有研究發(fā)現(xiàn)MYB基因能夠積極參與生物和非生物脅迫，番茄中MYB49基因的高表達對致病疫霉有明顯的抗性，對干旱和鹽脅迫也有較強的耐受性。Cui基于與擬南芥R2R3-MYB（AtMYBs）的同源關(guān)系，在番茄基因組中鑒定了24個R2R3-MYB轉(zhuǎn)錄因子。

（二）植物MYB轉(zhuǎn)錄因子在非生物中的脅迫作用

Zhang等分析了番茄R2R3型MYB基因S1MYB102的功能，發(fā)現(xiàn)SLMYB102在番茄中的過表達影響了鹽脅迫下的多個參數(shù)。定量分析證實，鹽脅迫下，許多鹽脅迫相關(guān)基因SISOS 1、SISOS2、SINHX3、S1NHX4、SIHAK5、SICPK1和SICPK3的表達水平均上調(diào)，也表明了SLMYB102通過一系列分子和生理過程的調(diào)控參與番茄的脅迫應(yīng)答。Ullah Abid等發(fā)現(xiàn)新型棉花MYB基因—GhMYB108—like是一個重要的基因，在應(yīng)對干旱和鹽脅迫時發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。定量表達分析表明，聚乙二醇和鹽處理可顯著誘導表達。劉佳欣等研究發(fā)現(xiàn)白樺MYB家族基因能夠響應(yīng)激素、鹽和干旱處理，在調(diào)控白樺下胚軸及胚根應(yīng)答外界信號的發(fā)育中起重要作用。除此之外，Pu等研究發(fā)現(xiàn)MYB對熱有不同的表達，可能在熱脅迫反應(yīng)中發(fā)揮重要作用。申晴等以桃抗寒性不同的3個桃樹品種為研究對象，通過熒光定量發(fā)現(xiàn)PDMYB3在桃的花芽和韌皮部均有表達，且PpMYB3相對表達量與取材時期溫度變化趨勢相一致，推測PpMYB3轉(zhuǎn)錄因子在桃抗寒方面起到負調(diào)節(jié)作用。

大豆是一種主要的豆科作物，富含種子蛋白和食用植物油，目前已在大豆中鑒定出244個R2R3型MYB。Bian等在大豆中發(fā)現(xiàn)一個新的R2R3型MYB基因—GmMYB81，并在大豆中進行了功能鑒定，發(fā)現(xiàn)它與兩個非生物脅迫調(diào)節(jié)因子—AtMYB44和AtMYB77密切相關(guān)。GmMYB81轉(zhuǎn)錄不僅在大豆組織和胚胎發(fā)育過程中有差異，而且在干旱、鹽和低溫脅迫下顯著增強。進一步研究發(fā)現(xiàn)，GmMYB81的過表達能顯著提高種子在鹽和干旱脅迫下的萌發(fā)率和綠苗率，這表明GmMYB81可能在種子萌發(fā)過程中提高植物對鹽和干旱脅迫的耐受性。蛋白質(zhì)相互作用分析表明，GmMYB81與非生物脅迫調(diào)節(jié)因子GmSGFl41相互作用，且在干旱和鹽脅迫下表現(xiàn)出相似的表達模式，表明GmMYB81和GmSGF141可能協(xié)同影響抗逆性。這些發(fā)現(xiàn)將有助于進一步研究GmMYB81對植物抗逆性，特別是非生物脅迫下種子萌發(fā)的調(diào)控機制。

二、植物MYB轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控花青素、黃酮類化合物的合成

苯丙素代謝是一條重要的代謝途徑，產(chǎn)生大量苯丙氨酸或酪氨酸的次生代謝物，如黃酮和異黃酮，這些都是植物體內(nèi)的重要分子，參與大量的生物學過程。對于豆科植物，黃酮和異黃酮被認為在適應(yīng)其生物環(huán)境中起著關(guān)鍵作用，既是防御化合物（植物防御素），也是與根瘤菌共生固氮的化學信號。MYB轉(zhuǎn)錄因子是植物中非常重要的一類轉(zhuǎn)錄因子，是花青素生物合成中MBW復合物的主要調(diào)控因子。R2R3型MYB轉(zhuǎn)錄因子在調(diào)節(jié)花青素的生物合成中起著重要作用，是參與調(diào)控植物花青素生物合成最多的MYB轉(zhuǎn)錄因子類型。Margarita等研究表明，在非生物脅迫條件下，蓮花中的異黃酮類化合物比標準的黃酮醇代謝增強。Gharari等研究也發(fā)現(xiàn)MYB影響植物中花青素、黃酮類化合物的合成。Gao等通過轉(zhuǎn)錄組測序成功地分離出菊芋紫色表皮花青素生物合成的候選基因HTMYB2，發(fā)現(xiàn)HTMYB2能調(diào)節(jié)植物花青素的合成，且與塊莖紫色表型的形成密切相關(guān)。這項研究有助于深入了解不同塊莖皮色的遺傳機理，為培育具有不同塊莖膚色的塊莖新品種提供依據(jù)。

三、植物MYB轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控新陳代謝

Chezem等人在番茄和青蒿中均已發(fā)現(xiàn)了與腺毛發(fā)生有關(guān)的幾種轉(zhuǎn)錄因子。它們中的大多數(shù)屬于兩個轉(zhuǎn)錄因子亞家族：R2R3-MYB亞家族和HD-ZIP Ⅳ亞家族。R2R3-MYB亞家族的不同成員已被證明調(diào)節(jié)特殊的新陳代謝或表皮細胞命運，如，MIXTA基因。日本石油精制下松制油所制油課生物技術(shù)小組主任野田健一和英國John Innes Institute的Cathie Martin等小組從金魚草中克隆出控制花色濃度和花瓣光澤的基因MIXTA，MIXTA不僅控制花形和花色，還能控制花瓣表皮細胞形狀。在黃花苜蓿和番茄中，三個R2R3-MYB亞家族的成員——黃花苜蓿中的AaMYB1、Aa-MIXTA1和番茄中的SLMX1被鑒定為腺毛起始的正調(diào)控因子。研究表明，過量表達AaMYB1的黃花蒿植株能顯著增加腺毛密度。

四、植物MYB轉(zhuǎn)錄因子在其他方面的調(diào)控作用

居利香等通過生物信息學對三種辣椒中的MYB分析研究，篩選出172個MYB轉(zhuǎn)錄因子，R2R3型的MYB最多。對來自圣尼斯種子公司的“黃魔王”黃燈籠辣椒轉(zhuǎn)錄組測序，篩選出各個階段差異表達的MYB基因。研究分析發(fā)現(xiàn)，CA-MYB98、CAMYBl68等12個轉(zhuǎn)錄因子與辣椒素代謝路徑的調(diào)控有關(guān)，可作為辣味調(diào)控的重要候選基因。

Fu等從番木瓜果肉中克隆到兩個MYB基因，分別命名為CpMYB1（MYB44-like）和CpMYB2，屬于R2R3-MYB家族的S22亞群。通過研究發(fā)現(xiàn)，在果實成熟過程中，它們的表達水平下降。進一步研究發(fā)現(xiàn)，CpMYB1和Cp-MYB2均為轉(zhuǎn)錄抑制因子，可抑制CpPME1、CpPME2、Cp-PG5、CpPDS2、CpPDS4和CpCHY-b啟動子的活性。研究表明，CpMYB1和CpMYB2可能通過調(diào)控細胞壁降解和類胡蘿卜素生物合成相關(guān)基因在番木瓜果實軟化和類胡蘿卜素積累過程中發(fā)揮作用，這也為MYB轉(zhuǎn)錄因子在果實成熟過程中的作用提供了新視野。

徐俊雄等對虎杖中1個新的R2R3-MYB轉(zhuǎn)錄因子基因PcMYB1進行轉(zhuǎn)錄活性鑒定和表達特性分析，并在轉(zhuǎn)基因擬南芥中進行功能研究，發(fā)現(xiàn)PeMYB1具有轉(zhuǎn)錄抑制活性，對植物木質(zhì)素合成具有負調(diào)控作用。Huseyin等研究和鑒定了世界上纖維產(chǎn)量較高的植物之一的亞麻基因組中的MYB轉(zhuǎn)錄因子。結(jié)果表明，亞麻基因組含有167個R2R3型、7個3R型和1個4R型MYB轉(zhuǎn)錄因子。其中，17個R2R3型MYB轉(zhuǎn)錄因子與木質(zhì)素生物合成有關(guān)，MYB062、MYB072、MYB096、MYB141和MYBl46基因在具有較高木質(zhì)素生產(chǎn)能力的組織中上調(diào)，MYB012和MYB113基因表達下調(diào)，也表明了這些基因參與了木質(zhì)素的生物合成，這一研究為了解MYB在亞麻纖維或木質(zhì)素生產(chǎn)中的作用或者提高纖維產(chǎn)量的分子機制研究提供依據(jù)。

五、展望

眾多文獻研究表明，MYB轉(zhuǎn)錄因子在植物體內(nèi)廣泛參與生物學功能，尤其是積極參與逆境脅迫的應(yīng)答，越來越多的證據(jù)支持MYB是提高生物抗逆性和非生物抗逆性的重要轉(zhuǎn)錄因子。后續(xù)研究應(yīng)結(jié)合實際情況，研究植物MYB等重要轉(zhuǎn)錄因子在多種逆境脅迫下的調(diào)控機制，為應(yīng)用于生產(chǎn)實踐提供理論基礎(chǔ)。

在過去的十幾年里，許多學者利用功能基因組學、轉(zhuǎn)錄組學和蛋白質(zhì)組學等現(xiàn)代分子工具，研究了許多植物包括不同作物對非生物和生物脅迫反應(yīng)的大量轉(zhuǎn)錄因子。研究成果不僅為植物的脅迫應(yīng)答機制提供了重要信息，而且為作物的未來改良提供了候選基因。隨著植物各科轉(zhuǎn)錄組測序的完成和轉(zhuǎn)錄因子數(shù)據(jù)庫的完善，對植物發(fā)展更加有利的MYB轉(zhuǎn)錄因子將被發(fā)現(xiàn)與研究，科技的進步也將進一步了解MYB轉(zhuǎn)錄因子在植物體內(nèi)的調(diào)控途徑，這將為植物品種的育種與改良提供支持。

（責任編輯 曹雯梅）