王文娟 蘭培英 李方方

摘要：以河南省平頂山市魯山縣馬樓鄉(xiāng)一養(yǎng)雞場為例，介紹了其發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化及實驗室檢測過程，最終確診為禽白血病病毒（A/B亞群）。

關(guān)鍵詞：禽白血病;診斷;血清學(xué)檢測

中圖分類號：S858.31 ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B ? ? ? ?文章編號：1007-273X（2019）07-0030-01

禽白血病又稱禽白細(xì)胞增生病，是由禽白血病病毒和禽肉瘤病病毒群中的病毒引起的禽類多種腫瘤性疾病的總稱，該病毒的主要宿主是雞，以垂直傳播為主，對雞群在增重和產(chǎn)蛋方面有嚴(yán)重影響，尤其是患病雞抵抗力下降，容易感染多種疾病，給雞群的飼養(yǎng)管理帶來極大困擾。

1 ?發(fā)病情況

2019年5月6日，平頂山市魯山縣馬樓鄉(xiāng)一3 000羽雞場出現(xiàn)零星死亡。魯山縣畜牧局立即組織人員進(jìn)行抽樣，采集血清和咽喉、泄殖腔拭子各30份，迅速送往平頂山市疫控中心實驗室進(jìn)行檢測，并對該雞場周圍鄰近雞場進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查，未發(fā)現(xiàn)發(fā)病情況。

2 ?臨床癥狀及病理變化

現(xiàn)場勘查發(fā)現(xiàn)零星雞只出現(xiàn)精神不振、食欲下降、消瘦，背毛紊亂無光澤、雞冠發(fā)白、發(fā)皺、萎縮、個別出現(xiàn)黃綠色糞便。通過解剖5只病死雞發(fā)現(xiàn)其肝臟明顯腫大，且顏色呈灰白色，表面有腫瘤病灶;脾臟體積增大，有腫瘤結(jié)節(jié);法氏囊腫大，剖面有結(jié)節(jié)增生，瘤體剖面呈豆腐渣樣，肌肉貧血等病理癥狀，根據(jù)臨床癥狀及剖檢的病理變化初步診斷為腫瘤性動物疫病。

3 ?實驗室檢測

3.1 ?血清學(xué)檢測

使用IDEXX禽白血病病毒抗體檢測試劑盒（ALV Ab）檢測雞血清中禽白血病病毒（A/B亞群）抗體。該試劑盒用于測定雞血清中禽白血病病毒（A/B亞群）抗體的相對水平，內(nèi)源性的 E亞群禽白血病病毒抗體不會被檢測。將待檢血清樣品加入包被有病毒抗原的96孔酶聯(lián)免疫反應(yīng)板上，禽白血病病毒A/B亞群的抗體與病毒抗原形成抗原抗體復(fù)合物。洗掉未反應(yīng)物質(zhì)后加入酶標(biāo)二抗（HRPO），將沒有結(jié)合的HRPO洗掉，并加入底物，最后加入終止液并于650 nm測量吸光度。顯色強(qiáng)度與被檢樣品中禽白血病病毒抗體（A/B亞群）的含量呈直接相關(guān)。

使用IDEXX禽白血病病毒J亞群抗體檢測試劑盒（ALV-J）檢測雞血清中禽白血病病毒J亞群抗體。將樣品加入包被有禽白血病病毒J亞群（ALV-J gp85）抗原的96 孔酶聯(lián)免疫反應(yīng)板上，針對禽白血病病毒J亞群（ALV-J gp85）的抗體會與病毒抗原結(jié)合形成抗原抗體復(fù)合物。洗掉未結(jié)合的物質(zhì)后加入HRPO，將沒有結(jié)合的HRPO洗掉，并加入底物，最后加入終止液并于650 nm處測量吸光度，顯色強(qiáng)度與被檢樣品中禽白血病病毒J亞群抗體的含量呈直接相關(guān)。

3.2 ?病原學(xué)檢測

使用美國輝瑞試劑盒進(jìn)行病原學(xué)檢測，試驗設(shè)計用包被的抗P-27抗體結(jié)合并檢測ALV的P-27抗原含量，試驗原理是將抗P-27抗體包被微孔，再加入受ALV感染雞的血清或蛋清樣品，樣品中含有特異的ALV抗原和P-27抗原，抗P-27抗體和P-27抗原發(fā)生反應(yīng)，形成抗原抗體復(fù)合物，洗滌液洗去多余的未反應(yīng)物，加入過氧化物標(biāo)記的兔抗P-27抗體，洗滌后再加入二銨鹽ABTS底物顯色，加入終止液，用酶標(biāo)儀在405～410 nm測吸光度。

4 ?診斷結(jié)果

4.1 ?血清學(xué)檢測結(jié)果

A/B亞群抗體共檢測30份血清樣品，其中30份抗體陽性，陽性率100%，且抗體OD值與臨界值相差甚大，說明血清中禽白血病病毒抗體（A/B亞群）含量較高。J亞群抗體檢測共檢測30份血清樣品，其中0份抗體陽性，陽性率為0。

4.2 ?病原學(xué)檢測結(jié)果

試驗共檢測30份血清樣品，30份均為禽白血病P-27抗原陽性，且OD值與臨界值相差甚大，說明樣品中P-27抗原含量高。

依據(jù)實驗室檢測數(shù)據(jù)，確診該雞群感染了禽白血病病毒（A/B亞群）。

5 ?討論

目前對禽白血病尚無有效的治療方法，疫苗接種效果亦不佳。因為禽白血病的傳播主要是經(jīng)垂直傳播，水平傳播僅占次要地位，所以國內(nèi)外控制禽白血病主要采用凈化種群的方式來進(jìn)行。養(yǎng)殖場按照“檢測-淘汰/隔離-檢測-淘汰/隔離-檢測-淘汰/隔離”的程序，采取淘汰禽白血病檢測陽性雞和可疑雞、隔離同群陰性雞，同時加強(qiáng)消毒和提高飼養(yǎng)管理水平等綜合措施，以培育出無禽白血病/肉瘤病毒的健康雞群，也可通過選育對禽白血病有抵抗力的雞種，減少禽白血病的傳播。對于某些污染嚴(yán)重的原種禽場，應(yīng)及時更換品系，加強(qiáng)日常管理，做好各項消毒，以減少該病的傳播，降低養(yǎng)殖風(fēng)險及損失。