劉靜,吳建平,寇耀,全信保,黃麗
1遂寧市中心醫(yī)院普通外科,四川 遂寧 629000
2成都大學(xué)附屬醫(yī)院消化內(nèi)科,成都 610000
流行病學(xué)研究表明,胃癌的發(fā)病率較高[1],在有消化道惡性腫瘤家族史的患者中,胃癌的發(fā)病率相對更高。胃癌的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程將直接影響到胃癌患者的生存時間[2]。在胃癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制中,細(xì)胞因子的改變發(fā)揮一定的調(diào)控作用。超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)的改變能導(dǎo)致還原型復(fù)合物濃度下降,進(jìn)而提高胃黏膜上皮細(xì)胞的損傷風(fēng)險(xiǎn),促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的早期異常分裂。丙二醛(malondialdehyde,MDA)是氧化型復(fù)合物,能夠通過誘導(dǎo)游離自由基的形成,增加游離自由基對胃黏膜上皮細(xì)胞的浸潤和損傷程度,進(jìn)而促進(jìn)消化道腫瘤的進(jìn)展[3]。本研究探討SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,旨在為胃癌的診療提供參考,現(xiàn)報(bào)道如下。
選取2017年9月至2018年11月在遂寧市中心醫(yī)院治療的87例胃癌患者作為胃癌組。納入標(biāo)準(zhǔn):所有患者均符合胃癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。排除標(biāo)準(zhǔn):合并有其他惡性腫瘤、自身免疫性疾病、甲狀腺疾病等疾??;2周內(nèi)應(yīng)用過抗生素。87例胃癌患者中,男44例,女43例;年齡59~73歲,平均年齡(64.58±2.23)歲;TNM分期:Ⅰ期21例,Ⅱ期19例,Ⅲ期23例,Ⅳ期24例。同時選取86例健康體檢者作為對照組,其中男46例,女40例;年齡58~73歲,平均年齡(63.97±2.53)歲。兩組研究對象的年齡、性別比較,差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),具有可比性。本研究經(jīng)過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會批準(zhǔn),且所有受試者均簽署知情同意書。
入組后,抽取所有研究對象的空腹肘靜脈血5 ml,室溫下靜置30 min,以3000 r/min的速度離心10 min,提取上層血清待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附測定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)檢測血清SOD、GSH-Px、MDA水平。采用十字交叉法測定抗原濃度,碳酸鹽緩沖液稀釋抗原,加入96孔的酶標(biāo)板中,蓋好酶標(biāo)板蓋后置于4℃冰箱過夜,蒸餾水沖洗3次,每次5 min,輕輕叩擊酶標(biāo)板甩干。每孔中加入5%脫脂牛奶200 μl,置于4℃冰箱過夜,蒸餾水沖洗3次,每次5 min,加入稀釋好的抗體(濃度1∶800),蒸餾水沖洗3次,每次5 min,每孔加入100 μl底物,顯色后在酶標(biāo)儀上檢測吸光度。
采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,兩組比較采用t檢驗(yàn),多組比較采用方差分析;計(jì)數(shù)資料以例數(shù)表示。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
胃癌組患者血清SOD、GSH-Px水平均低于對照組,MDA水平高于對照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(表1)
表1 兩組研究對象血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比較(±s)
表1 兩組研究對象血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比較(±s)
組別SOD(nmol/ml)GSH-Px(AU)MDA(nmol/ml)對照組(n=86)93.23±15.32401.62±10.064.23±0.89胃癌組(n=87)76.15±38.3194.47±40.427.10±0.31 t值3.84268.40528.387 P值<0.01<0.05<0.05
胃癌組患者血清SOD、GSH-Px水平隨TNM分期的升高而降低,MDA水平隨TNM分期的升高而升高,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。(表2)
表2 不同TNM分期胃癌患者血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比較(±s)
表2 不同TNM分期胃癌患者血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比較(±s)
TNM分期SOD(nmol/ml)GSH-Px(AU)MDA(nmol/ml)Ⅰ(n=21)82.28±15.96100.43±12.386.59±0.62Ⅱ(n=19)78.42±12.2695.29±12.816.83±0.56Ⅲ(n=23)74.13±13.6193.71±11.737.01±0.47Ⅳ(n=24)70.93±11.8589.34±10.787.85±0.86 F值2.9943.31416.137 P值0.0350.0240.000
長期的不良飲食習(xí)慣、吸煙或高蛋白飲食均是形成消化道惡性腫瘤的誘因,在合并有幽門螺桿菌感染的患者中,胃癌的發(fā)病率可進(jìn)一步上升[5]。長期的臨床隨訪發(fā)現(xiàn),中晚期胃癌患者的5年病死率可超過35%,同時胃癌患者的總生存時間不足48個月[6-7]。對于胃癌的血清學(xué)評估具有一定的參考意義,其能夠在指導(dǎo)胃癌的診療及預(yù)后隨訪中發(fā)揮作用。雖然糖類抗原19-9(carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)或者癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)等腫瘤標(biāo)志物能夠在胃癌的診療過程中發(fā)揮一定的血清學(xué)評估價值,但僅依靠CA19-9或CEA評估胃癌病情的靈敏度不足45%,一致性率不足30%[8-9]。本研究對胃癌患者血清中SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)進(jìn)行了分析研究,具有下列兩個方面的價值:①能夠?yàn)榕R床胃癌的病情評估提供新的參考性指標(biāo);②能夠?yàn)檫M(jìn)一步闡明胃癌的發(fā)生機(jī)制提供新的思路。
SOD能夠通過影響超氧化酶的活性,導(dǎo)致體內(nèi)氧化型復(fù)合酶活性下降,穩(wěn)定氧化還原反應(yīng),減少氧化還原反應(yīng)平衡紊亂導(dǎo)致的腫瘤細(xì)胞異常增殖。SOD能影響腫瘤細(xì)胞內(nèi)核DNA的轉(zhuǎn)錄激活程度,降低腫瘤細(xì)胞異常轉(zhuǎn)錄激活的風(fēng)險(xiǎn)。GSH-Px是谷胱甘肽還原酶家族成員,其濃度下降能夠通過影響谷胱甘肽還原酶的活性,促進(jìn)胃黏膜上皮細(xì)胞損傷。MDA是丙二醛相關(guān)因子,其對含醛類化合物功能的調(diào)控能夠顯著影響游離自由基的釋放程度[10-11]。相關(guān)研究探討了SOD在胃癌中的表達(dá)情況,認(rèn)為在胃癌中SOD的表達(dá)明顯下調(diào)[12],而缺乏SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌患者臨床分期的關(guān)系研究。
本研究發(fā)現(xiàn),在胃癌患者血清中,SOD、GSH-Px水平均下降,而MDA水平上升,高于健康人群,提示了SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)均能夠影響胃癌的病情進(jìn)展過程,這主要考慮由于SOD、GSH-Px的表達(dá)下降,MDA的表達(dá)上升,能夠通過影響胃黏膜上皮細(xì)胞的損傷修復(fù)能力,導(dǎo)致胃黏膜上皮細(xì)胞腫瘤基因突變,最終促進(jìn)早期胃癌的發(fā)生和中晚期胃癌進(jìn)展。李玨等[13]研究者也發(fā)現(xiàn),在胃癌患者中GSH-Px的表達(dá)可下降40%以上,同時在合并遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或腹腔內(nèi)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中,GSH-Px的表達(dá)下降更為明顯。在探討SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌患者臨床分期的關(guān)系中,發(fā)現(xiàn)在臨床分期較高的患者中,其SOD、GSH-Px表達(dá)水平可進(jìn)一步下降,而MDA表達(dá)水平進(jìn)一步上升,提示了SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌患者臨床分期的關(guān)系。結(jié)合其他文獻(xiàn)報(bào)道[14-15],分析其原因可能與以下兩個方面有關(guān):①SOD、GSH-Px的表達(dá)水平下降能夠影響胃黏膜上皮細(xì)胞的浸潤能力,導(dǎo)致腫瘤浸潤深度的增加,促進(jìn)了胃黏膜肌層組織的浸潤和臨床分期的進(jìn)展;②MDA的表達(dá)水平上升,能夠影響游離氮?dú)庾杂苫蜓鯕庾杂苫幕钚裕龠M(jìn)其對于腫瘤細(xì)胞上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)換的病理進(jìn)程的進(jìn)展,進(jìn)而提高胃癌患者的臨床分期。
綜上所述,在胃癌患者血清中,SOD、GSH-Px的表達(dá)水平均下降,而MDA的表達(dá)水平上升,SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系,且與臨床分期有關(guān)。對于SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌患者預(yù)后的關(guān)系有待進(jìn)一步的研究。