劉靜，吳建平，寇耀，全信保，黃麗

1遂寧市中心醫(yī)院普通外科，四川 遂寧 629000

2成都大學(xué)附屬醫(yī)院消化內(nèi)科，成都 610000

流行病學(xué)研究表明，胃癌的發(fā)病率較高[1]，在有消化道惡性腫瘤家族史的患者中，胃癌的發(fā)病率相對(duì)更高。胃癌的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程將直接影響到胃癌患者的生存時(shí)間[2]。在胃癌的發(fā)生發(fā)展機(jī)制中，細(xì)胞因子的改變發(fā)揮一定的調(diào)控作用。超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH-Px）的改變能導(dǎo)致還原型復(fù)合物濃度下降，進(jìn)而提高胃黏膜上皮細(xì)胞的損傷風(fēng)險(xiǎn)，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的早期異常分裂。丙二醛（malondialdehyde，MDA）是氧化型復(fù)合物，能夠通過(guò)誘導(dǎo)游離自由基的形成，增加游離自由基對(duì)胃黏膜上皮細(xì)胞的浸潤(rùn)和損傷程度，進(jìn)而促進(jìn)消化道腫瘤的進(jìn)展[3]。本研究探討SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，旨在為胃癌的診療提供參考，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選取2017年9月至2018年11月在遂寧市中心醫(yī)院治療的87例胃癌患者作為胃癌組。納入標(biāo)準(zhǔn)：所有患者均符合胃癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)[4]。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并有其他惡性腫瘤、自身免疫性疾病、甲狀腺疾病等疾??；2周內(nèi)應(yīng)用過(guò)抗生素。87例胃癌患者中，男44例，女43例；年齡59～73歲，平均年齡（64.58±2.23）歲；TNM分期：Ⅰ期21例，Ⅱ期19例，Ⅲ期23例，Ⅳ期24例。同時(shí)選取86例健康體檢者作為對(duì)照組，其中男46例，女40例；年齡58～73歲，平均年齡（63.97±2.53）歲。兩組研究對(duì)象的年齡、性別比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。本研究經(jīng)過(guò)醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，且所有受試者均簽署知情同意書。

1.2 檢測(cè)方法

入組后，抽取所有研究對(duì)象的空腹肘靜脈血5 ml，室溫下靜置30 min，以3000 r/min的速度離心10 min，提取上層血清待檢。采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）檢測(cè)血清SOD、GSH-Px、MDA水平。采用十字交叉法測(cè)定抗原濃度，碳酸鹽緩沖液稀釋抗原，加入96孔的酶標(biāo)板中，蓋好酶標(biāo)板蓋后置于4℃冰箱過(guò)夜，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，輕輕叩擊酶標(biāo)板甩干。每孔中加入5%脫脂牛奶200 μl，置于4℃冰箱過(guò)夜，蒸餾水沖洗3次，每次5 min，加入稀釋好的抗體（濃度1∶800），蒸餾水沖洗3次，每次5 min，每孔加入100 μl底物，顯色后在酶標(biāo)儀上檢測(cè)吸光度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，兩組比較采用t檢驗(yàn)，多組比較采用方差分析；計(jì)數(shù)資料以例數(shù)表示。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組研究對(duì)象血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比較

胃癌組患者血清SOD、GSH-Px水平均低于對(duì)照組，MDA水平高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表1）

表1 兩組研究對(duì)象血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比較（±s）

表1 兩組研究對(duì)象血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比較（±s）

組別SOD（nmol/ml）GSH-Px（AU）MDA（nmol/ml）對(duì)照組（n=86）93.23±15.32401.62±10.064.23±0.89胃癌組（n=87）76.15±38.3194.47±40.427.10±0.31 t值3.84268.40528.387 P值<0.01<0.05<0.05

2.2 不同TNM 分期胃癌患者血清SOD、GSH-Px、MDA 水平的比較

胃癌組患者血清SOD、GSH-Px水平隨TNM分期的升高而降低，MDA水平隨TNM分期的升高而升高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。（表2）

表2 不同TNM分期胃癌患者血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比較（±s）

表2 不同TNM分期胃癌患者血清SOD、GSH-Px、MDA水平的比較（±s）

TNM分期SOD（nmol/ml）GSH-Px（AU）MDA（nmol/ml）Ⅰ（n=21）82.28±15.96100.43±12.386.59±0.62Ⅱ（n=19）78.42±12.2695.29±12.816.83±0.56Ⅲ（n=23）74.13±13.6193.71±11.737.01±0.47Ⅳ（n=24）70.93±11.8589.34±10.787.85±0.86 F值2.9943.31416.137 P值0.0350.0240.000

3 討論

長(zhǎng)期的不良飲食習(xí)慣、吸煙或高蛋白飲食均是形成消化道惡性腫瘤的誘因，在合并有幽門螺桿菌感染的患者中，胃癌的發(fā)病率可進(jìn)一步上升[5]。長(zhǎng)期的臨床隨訪發(fā)現(xiàn)，中晚期胃癌患者的5年病死率可超過(guò)35%，同時(shí)胃癌患者的總生存時(shí)間不足48個(gè)月[6-7]。對(duì)于胃癌的血清學(xué)評(píng)估具有一定的參考意義，其能夠在指導(dǎo)胃癌的診療及預(yù)后隨訪中發(fā)揮作用。雖然糖類抗原19-9（carbohydrate antigen 19-9，CA19-9）或者癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）等腫瘤標(biāo)志物能夠在胃癌的診療過(guò)程中發(fā)揮一定的血清學(xué)評(píng)估價(jià)值，但僅依靠CA19-9或CEA評(píng)估胃癌病情的靈敏度不足45%，一致性率不足30%[8-9]。本研究對(duì)胃癌患者血清中SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)進(jìn)行了分析研究，具有下列兩個(gè)方面的價(jià)值：①能夠?yàn)榕R床胃癌的病情評(píng)估提供新的參考性指標(biāo)；②能夠?yàn)檫M(jìn)一步闡明胃癌的發(fā)生機(jī)制提供新的思路。

SOD能夠通過(guò)影響超氧化酶的活性，導(dǎo)致體內(nèi)氧化型復(fù)合酶活性下降，穩(wěn)定氧化還原反應(yīng)，減少氧化還原反應(yīng)平衡紊亂導(dǎo)致的腫瘤細(xì)胞異常增殖。SOD能影響腫瘤細(xì)胞內(nèi)核DNA的轉(zhuǎn)錄激活程度，降低腫瘤細(xì)胞異常轉(zhuǎn)錄激活的風(fēng)險(xiǎn)。GSH-Px是谷胱甘肽還原酶家族成員，其濃度下降能夠通過(guò)影響谷胱甘肽還原酶的活性，促進(jìn)胃黏膜上皮細(xì)胞損傷。MDA是丙二醛相關(guān)因子，其對(duì)含醛類化合物功能的調(diào)控能夠顯著影響游離自由基的釋放程度[10-11]。相關(guān)研究探討了SOD在胃癌中的表達(dá)情況，認(rèn)為在胃癌中SOD的表達(dá)明顯下調(diào)[12]，而缺乏SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌患者臨床分期的關(guān)系研究。

本研究發(fā)現(xiàn)，在胃癌患者血清中，SOD、GSH-Px水平均下降，而MDA水平上升，高于健康人群，提示了SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)均能夠影響胃癌的病情進(jìn)展過(guò)程，這主要考慮由于SOD、GSH-Px的表達(dá)下降，MDA的表達(dá)上升，能夠通過(guò)影響胃黏膜上皮細(xì)胞的損傷修復(fù)能力，導(dǎo)致胃黏膜上皮細(xì)胞腫瘤基因突變，最終促進(jìn)早期胃癌的發(fā)生和中晚期胃癌進(jìn)展。李玨等[13]研究者也發(fā)現(xiàn)，在胃癌患者中GSH-Px的表達(dá)可下降40%以上，同時(shí)在合并遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或腹腔內(nèi)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的患者中，GSH-Px的表達(dá)下降更為明顯。在探討SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌患者臨床分期的關(guān)系中，發(fā)現(xiàn)在臨床分期較高的患者中，其SOD、GSH-Px表達(dá)水平可進(jìn)一步下降，而MDA表達(dá)水平進(jìn)一步上升，提示了SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌患者臨床分期的關(guān)系。結(jié)合其他文獻(xiàn)報(bào)道[14-15]，分析其原因可能與以下兩個(gè)方面有關(guān)：①SOD、GSH-Px的表達(dá)水平下降能夠影響胃黏膜上皮細(xì)胞的浸潤(rùn)能力，導(dǎo)致腫瘤浸潤(rùn)深度的增加，促進(jìn)了胃黏膜肌層組織的浸潤(rùn)和臨床分期的進(jìn)展；②MDA的表達(dá)水平上升，能夠影響游離氮?dú)庾杂苫蜓鯕庾杂苫幕钚?，促進(jìn)其對(duì)于腫瘤細(xì)胞上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)換的病理進(jìn)程的進(jìn)展，進(jìn)而提高胃癌患者的臨床分期。

綜上所述，在胃癌患者血清中，SOD、GSH-Px的表達(dá)水平均下降，而MDA的表達(dá)水平上升，SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系，且與臨床分期有關(guān)。對(duì)于SOD、GSH-Px、MDA的表達(dá)與胃癌患者預(yù)后的關(guān)系有待進(jìn)一步的研究。