廖冬梅 鐘紅衛(wèi) 古遠(yuǎn)云

摘要：目的 探討參蛤益肺膠囊調(diào)節(jié)COPD大鼠穩(wěn)定期IgG、IgM的實(shí)驗(yàn)研究。方法 將50只SD大鼠隨機(jī)分組，空白組10只、余下40只造模。造模成功后，隨機(jī)分為模型組、參蛤益肺膠囊常規(guī)劑量組（常規(guī)劑量組）、參蛤益肺膠囊高劑量組（高劑量組）、茶堿組各10只，給藥后分別于第12周、18周采集大鼠血清并行ELISA測(cè)定。結(jié)果 實(shí)驗(yàn)12、18周結(jié)束后，模型組血清中IgG、IgM的表達(dá)水平較空白組降低（P<0.05），其余組IgG、IgM的表達(dá)水平均有所上升（P<0.05），而高劑量組IgG、IgM的表達(dá)水平上升最為顯著。結(jié)論 參蛤益肺膠囊可提升COPD穩(wěn)定期大鼠血清中IgG、IgM的表達(dá)水平，而參蛤益肺膠囊高劑量組療效越佳，從而提高機(jī)體免疫，延緩COPD病程的進(jìn)展。

關(guān)鍵詞：參蛤益肺膠囊;COPD;大鼠;IgG;IgM

中圖分類號(hào)：R285 ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A ? 文章編號(hào)：1007-2349（2019）07-0065-02

慢性阻塞性肺疾?。╟hronic obstructive pulmonary diseases，COPD）為一種可防治的疾病，主要表現(xiàn)為持續(xù)性呼吸道癥狀及氣流受限[1]。全球發(fā)病率高，約為4%-10%。WHO預(yù)計(jì)到2030年，COPD將成為繼全球缺血性心臟病及猝死之后的的第三大死亡原因[2]。至今，針對(duì)COPD的發(fā)病機(jī)制研究較多，而免疫機(jī)制備受關(guān)注。其中，IgG、IgM為主要研究對(duì)象。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察參蛤益肺膠囊對(duì)穩(wěn)定期COPD大鼠血清中IgG、IgM表達(dá)水平的影響，進(jìn)一步討論免疫機(jī)制。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 清潔級(jí)SD大鼠50只，雌雄各25只，雌鼠體重為（230±10）g，雄鼠體重為（290±10）g。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑 西南醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院生產(chǎn)的參蛤益肺膠囊（0.33 g/粒），廣州邁特興華制藥廠生產(chǎn)的茶堿緩釋片（0.1 g/片），IgG、IgM ELISA試劑盒。

2 方法

2.1 造模及分組 從50只清潔級(jí)SD大鼠中，分別挑選出5只雌鼠和雄鼠作為空白組，造模組為剩下的40只大鼠。根據(jù)實(shí)驗(yàn)研究經(jīng)驗(yàn)，COPD穩(wěn)定期大鼠模型的建立采用煙熏聯(lián)合肺炎克雷伯氏桿菌感染的方法。造模成功后以雌雄各半為原則分為4組：模型組8只、常規(guī)劑量組10只、高劑量組10只、茶堿組10只。

2.2 觀察造模組大鼠

2.2.1 大鼠的一般情況 各造模組精神萎靡，皮毛枯燥，張口喘息，頻繁咳嗽，行動(dòng)遲鈍，進(jìn)食少，大便干，小便調(diào)。

2.2.2 大鼠肺與氣道組織的病理學(xué)改變 造模組各級(jí)支氣管纖毛變性、稍紊亂，部分脫落，鱗狀上皮化生，杯狀細(xì)胞數(shù)目明顯增多，腺體肥大，支氣管管壁明顯增厚，可見(jiàn)中性粒、淋巴細(xì)胞等炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，肺泡壁變薄，肺泡腔明顯擴(kuò)大，大部分肺泡破裂后形成肺大泡，血管水腫、滲出、管壁明顯增厚。

2.3 給藥 第7周的第1 d開(kāi)始給藥，空白組、模型組以同等容積的蒸餾水灌胃，各治療組則以相應(yīng)的藥物灌胃.常規(guī)劑量組：0.42 g/kg/d，高劑量組：0.62 g/kg/d，茶堿組：0.02 g/kg/d。

2.4 采集血清 分別在第12、18周結(jié)束后的第1 d取材，取材前所有大鼠禁食12 h（除水），麻醉后采集腹主動(dòng)脈血，將其靜置于4℃冰箱4 h，取出后以3000 r/min的轉(zhuǎn)速離心10 min，將其血清于-80℃冰箱內(nèi)保存待測(cè)。

3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

統(tǒng)計(jì)描述采用軟件SPSS17.0，其中用均數(shù)及標(biāo)準(zhǔn)差表示定量資料，選用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)來(lái)行組間比較（2組）;或者單因素方差分析（3組及以上）。

4 結(jié)果

4.1 12周、18周各組大鼠血清中IgG、IgM的比較 見(jiàn)表1。

由表1可知，12周IgG、IgM分別為：F=286.335，P=0.001，F(xiàn)=282.791，P=0.001，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此，結(jié)果示模型組vs 常規(guī)劑量組、模型組vs 高劑量組、模型組vs 茶堿組、高劑量組vs 常規(guī)劑量組、高劑量組vs 茶堿組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;常規(guī)劑量組vs 茶堿組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。18周IgG、IgM分別為：F=931.454，P=0.001，F(xiàn)=350.691，P=0.001，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此，結(jié)果示模型組vs 常規(guī)劑量組、模型組vs 高劑量組、模型組vs 茶堿組、高劑量組vs 常規(guī)劑量組、高劑量組vs 茶堿組均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）;常規(guī)劑量組vs 茶堿組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。

5 討論

既往研究顯示，在多次急性加重后，COPD患者的肺功能逐漸降低。因此加強(qiáng)穩(wěn)定期治療，是控制COPD病情進(jìn)行性發(fā)展的關(guān)鍵[3]。多數(shù)研究表明免疫與COPD的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)[4]。免疫力低下時(shí)，免疫功能頻繁發(fā)生紊亂，易反復(fù)感染，炎癥不斷刺激氣道壁增厚、管壁破裂，肺泡腔擴(kuò)大，形成氣道重塑、肺大泡等，加速COPD病程的進(jìn)展[5]。因而，COPD穩(wěn)定期的免疫治療顯得格外重要。潘玲等[6]認(rèn)為所有COPD患者存在免疫功能下降及紊亂，主要表現(xiàn)為血清中IgG明顯下降。盧麗君等[7]認(rèn)為COPD患者存在免疫低下、免疫功能失調(diào)，在增強(qiáng)免疫的中醫(yī)中藥治療后，免疫指標(biāo)IgG和IgM明顯改善，免疫功能明顯提高，表明免疫功能與COPD密切相關(guān)。

COPD屬中醫(yī)“肺脹”范疇，《靈樞·脹論》曰：“肺脹者，虛滿而喘咳?！盵8]《靈樞·經(jīng)脈》：“肺手太陰之脈……是動(dòng)則病肺脹滿膨膨而咳喘?！盵9]臨床上主要表現(xiàn)為咳嗽、咯痰、喘氣、水腫、發(fā)紺、心悸等癥狀，其病位主要在肺脾腎，性屬本虛標(biāo)實(shí)，穩(wěn)定期病機(jī)為肺脾腎虛、痰瘀互結(jié)，以虛為主。參蛤益肺膠囊由紅參、蛤蚧、三七、川芎等藥物組成，共奏補(bǔ)肺益腎，化瘀祛痰，納氣平喘，標(biāo)本兼治之功。國(guó)內(nèi)外報(bào)道中，對(duì)上述藥物的現(xiàn)代藥理研究較多。黃寶亮等[10]實(shí)驗(yàn)研究表明紅參非皂苷類物質(zhì)-精氨酸雙糖苷能對(duì)抗小鼠疲勞，同時(shí)影響其免疫功能。楊帆等[11]運(yùn)用蛤肽作用于小鼠，實(shí)驗(yàn)研究表明蛤蚧肽能提升小鼠的免疫力，以NK細(xì)胞的增加為主。譚亮等[12]認(rèn)為三七皂苷R1對(duì)心腦系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、肝臟、肺動(dòng)脈高壓、腸道等均有保護(hù)作用，同時(shí)可抗腫瘤及提升免疫力。周時(shí)[13]認(rèn)為川芎嗪對(duì)心、腦、肺、腎等血管均有擴(kuò)張作用，可緩解肺動(dòng)脈高壓;同時(shí)川芎嗪能提高免疫力，通過(guò)促進(jìn)淋巴細(xì)胞的表達(dá)等?？梢?jiàn)，以上藥物均有提高免疫力作用。

本實(shí)驗(yàn)COPD穩(wěn)定期大鼠模型的建立采用煙熏聯(lián)合肺炎克雷伯氏桿菌感染的方法，更符合COPD穩(wěn)定期病機(jī)。從實(shí)驗(yàn)結(jié)果上看，實(shí)驗(yàn)12、18周結(jié)束后，模型組血清中IgG、IgM的表達(dá)水平較空白組降低（P<0.05），其余組IgG、IgM的表達(dá)水平均有所上升（P<0.05）。說(shuō)明參蛤益肺膠囊可提升COPD穩(wěn)定期大鼠血清中IgG、IgM的表達(dá)水平，從而提高機(jī)體免疫，延緩COPD病程的進(jìn)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]陳亞紅，2019 gOLD慢性阻塞性肺疾病診斷、治療及預(yù)防全球策略解讀[J].中國(guó)醫(yī)學(xué)前沿雜志，2019，11（1）.

[2]章潛，嚴(yán)萍.健脾益氣方對(duì)不同分級(jí)慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期患者的影響[J].中國(guó)中醫(yī)藥科技，2017，24（4）：495-496.

[3]付敏，孫增濤.慢性阻塞性肺疾病研究進(jìn)展及中醫(yī)治療的思考[J].中國(guó)中醫(yī)急癥，2012，21（4）：544-545+553.

[4]陳立文，李崇文.不同病程COPD患者免疫功能的臨床分析[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2017，21（1）：32-34.

[5]鄔學(xué)斌，高雷山，夏陽(yáng)，等.祛瘀補(bǔ)肺中藥治療慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期療效及對(duì)免疫功能、炎性細(xì)胞因子水平的影響[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2017，26（20）：2188-2191.

[6]潘玲，毛德強(qiáng)，羅玲.慢性阻塞性肺病患者外周血中T細(xì)胞及IgA、IgG等免疫功能情況的研究[J].國(guó)際呼吸雜志，2014，34（13）：974-976.

[7]盧麗君，杜曉紅，黃炎芳.溫補(bǔ)肺腎法對(duì)慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期患者肺功能及免疫功能的影響[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志，2017，21（11）：38-41.

[8]于佳琦.肺脹古代文獻(xiàn)研究[D].遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，2010.

[9]胡宗仁.慢性阻塞性肺疾病穩(wěn)定期的古代文獻(xiàn)研究[D].湖南中醫(yī)藥大學(xué)，2017.

[10]黃寶亮，劉博宇，王佳奇，等.紅參非皂苷類物質(zhì)精氨酸雙糖苷對(duì)小鼠疲勞及免疫功能的影響[J].中國(guó)藥學(xué)雜志，2016，（15）：27-29.

[11]楊帆，席偉，謝裕安，等.蛤蚧肽對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用[J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2011，28（3）：342-344.

[12]譚亮，湯秋凱，王守章，等.三七皂苷R1藥理作用的研究進(jìn)展[J].中國(guó)藥理學(xué)通報(bào)，2018，34（5）：604-607.

[13]周時(shí).中藥川芎中有效成分的藥理作用研究[J].內(nèi)蒙古中醫(yī)藥，2015，（5）：157-157，170.

（收稿日期：2019-04-11）