駱玉玲 張輝 白海鋒 袁永鋒 李引娣

摘?要：為了解復(fù)合芽孢桿菌微生態(tài)制劑對克氏原螯蝦（Procambarus clarkii）養(yǎng)殖池塘水質(zhì)及螯蝦成活率的影響，設(shè)計了3組試驗塘（使用復(fù)合芽孢桿菌）和3組對照塘（未使用復(fù)合芽孢桿菌）進行92 d的養(yǎng)殖對比試驗。結(jié)果表明，試驗塘總體水質(zhì)優(yōu)于對照塘，與對照池相比，試驗池氨氮含量顯著降低了69.6%，亞硝酸鹽含量顯著減少了545%，透明度顯著降低了23.5%， pH值和電導(dǎo)率變化顯著（P<0.05），試驗塘克氏原螯蝦成活率顯著提高了128%，養(yǎng)成規(guī)格顯著增加了27.8%，生長率顯著高于對照塘（P<0.05）。研究表明，濃縮復(fù)合芽孢桿菌微生態(tài)制劑對養(yǎng)蝦池塘的水質(zhì)具有一定的凈化效果，并可通過調(diào)節(jié)螯蝦免疫系統(tǒng)減少病害發(fā)生，提高螯蝦養(yǎng)殖成活率。

關(guān)鍵詞：復(fù)合芽孢桿菌;水質(zhì)調(diào)節(jié);成活率;克氏原螯蝦（Procambarus clarkii）

克氏原螯蝦（Procambarus clarkii）是我國主要的淡水養(yǎng)殖品種之一[1]，也是稻蝦共作、輪作模式首選品種。因其適應(yīng)性強，養(yǎng)殖效益高，近年來養(yǎng)殖規(guī)模逐年擴大，集約化程度越來越高，但與此同時克氏原螯蝦發(fā)病率也逐年提高[2]。此外，在克氏原螯蝦養(yǎng)殖生產(chǎn)中常大量使用抗生素、激素及化學(xué)消毒劑等，其結(jié)果不僅導(dǎo)致養(yǎng)殖克氏原螯蝦的藥物殘留超標(biāo)，而且還對養(yǎng)殖區(qū)域水環(huán)境產(chǎn)生影響。在這種形式下，克氏原螯蝦養(yǎng)殖走可持續(xù)發(fā)展的健康、生態(tài)之路迫在眉睫。微生態(tài)制劑因其遵循生態(tài)環(huán)境自然循環(huán)法則，在養(yǎng)殖水環(huán)境處理以及養(yǎng)殖動物飼料添加等方面具有“三無”（無殘留、無污染、無毒副）作用和不產(chǎn)生抗性等優(yōu)點已被公認為無公害生態(tài)制劑，可有效替代眾多抗生素類以及促生長類藥物[3]?；诖?，為了更好地指導(dǎo)陜西地區(qū)克氏原螯蝦生態(tài)健康養(yǎng)殖模式的示范與推廣，筆者及其團隊于2017年5-8月在渭河陜西華陰段克氏原螯蝦養(yǎng)殖池塘開展了微生態(tài)制劑應(yīng)用對比試驗。

1?材料與方法

1.1?試驗池塘

試驗地點位于陜西省華陰市渭河灘養(yǎng)殖區(qū)，試驗池塘面積均為0.4 hm2，水深1.5～1.8 m，池塘東西走向，長方形，池底平坦，坡比1∶2.5，池塘設(shè)置對角線排灌，四周鋪設(shè)防逃網(wǎng)布，試驗期間用水來自黃河，經(jīng)抽取、沉淀、過濾三道程序后進入蝦池。

1.2?試驗前準(zhǔn)備工作

1.2.1?池塘消毒?池塘在養(yǎng)蝦前要進行冬排、淸整、除淤、凍土、消毒。在放養(yǎng)蝦苗的前10 d，采用生石灰消毒，用2 250～2 700 kg/hm2生石灰溶化后全池潑灑。生石灰使用7 d后加水至20～30 cm，使用生物有機肥肥水，用量控制在525～750 kg/hm2，促進餌料生物生長繁殖。

1.2.2?水草移栽?伊樂藻是養(yǎng)殖克氏原螯蝦的首選水草，在池塘消毒后種植，覆蓋面積控制在20%左右，水位保持在20～30 cm。4月上旬開始在伊樂藻周邊移栽輪葉黑藻和金魚藻，水草覆蓋面積25%～35%，此時加水至50～60 cm。6～8月份水溫過高時，水草覆蓋率50%～60%，水深控制在100～120 cm。

1.2.3?苗種選擇與投放?蝦苗采購于渭南市華陰小龍蝦繁育場，選擇標(biāo)準(zhǔn)為：體格健壯、附肢完整、反應(yīng)靈敏、規(guī)格整齊（160～200只/kg），運輸成活率不小于95%。5月初開始投放蝦苗，放養(yǎng)密度為12萬～15萬尾/hm2，同時分別混養(yǎng)鰱魚苗（20～40尾/kg）75～150 kg/hm2。蝦苗和魚苗入池前均要用3%～4%食鹽水浸洗5～10 min進行消毒。投放蝦苗時間選擇在晴天水溫較低的早晨，淺水區(qū)多點投放，幼蝦自行爬入水中為宜。

1.3?對比試驗

1.3.1?試驗用微生態(tài)制劑?試驗所用的微生態(tài)制劑為西安富祺生物科技有限公司生產(chǎn)的復(fù)合芽孢桿菌純粉，其主要成分包括枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、硝化細菌等多種有益活菌，總菌數(shù)≥2.8×1010ind/g（有效期2年）。

1.3.2?試驗方法?試驗在3個面積相同的相鄰池塘中進行，復(fù)合芽孢桿菌使用量為每水深1 m時全池潑灑750～900 g/hm2，使用頻次15 d;此外，采用拌餌形式，添加量控制在1 kg飼料添加2～3 g，同時選擇3個情況相似池塘作為對照池塘，對照塘不使用復(fù)合芽孢桿菌，6個池塘保持一致性日常管理。試驗期間，投喂餌料以人工配合蝦飼料為主，天然動植物性餌料為輔，堅持“兩頭精，中間粗”的投喂原則，日投喂量控制在3%～5%。通過加注新水和使用微生態(tài)制劑進行水質(zhì)管理，池塘透明度保持在30～40 cm，同時15～20 d用生石灰150～225 kg/hm2對池塘進行水質(zhì)調(diào)節(jié)和底質(zhì)改良，生石灰的使用時間與微生態(tài)制劑的使用時間相隔10～15 d。

1.4?水質(zhì)監(jiān)測與蝦苗測定

試驗期間每15 d對各個池塘的氨氮（NH+4-N）、亞硝態(tài)氮（NO-2-N）、溶解氧（DO）、pH值、電導(dǎo)率（EC）、透明度（SD）、水溫（WT）、水深（WD）等指標(biāo)進行現(xiàn)場采樣及檢測，檢測時間選擇在上午，每個池塘固定4個檢測點。隨機取螯蝦樣本50尾，用游標(biāo)卡尺測量體長，用電子秤（001 g）測定體重。

1.5?數(shù)據(jù)處理與分析

特定生長率（SGR）和成活率（SR）計算依據(jù)下面公式：

SGR（%/d）= 100 ×（lnWb- lnWa）/T

SR（%）= 100×（Pb/Pa）

其中，Wa、Wb分別為試驗開始和結(jié)束時克氏原螯蝦的體重，mg;Pa、Pb分別為試驗開始和結(jié)束時的克氏原螯蝦數(shù)量，尾;T為試驗時間，d。

使用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行試驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計，顯著性分析采用單因素分析中的最小顯著差數(shù)法檢驗比較（P<0.05）。

2?結(jié)果與分析

2.1?池塘水環(huán)境監(jiān)測

從5月8日至8月10日共監(jiān)測水質(zhì)理化指標(biāo)7次，結(jié)果顯示試驗池塘氨氮含量顯著低于對照池塘（P<0.05），相比降低了69.6%，亞硝酸鹽含量顯著低于對照池塘（P<0.05），相比減少了54.5%，兩個池塘的pH值和電導(dǎo)率均存在顯著差異（P<0.05），透明度均值相比顯著降低了235%（P<0.05）。試驗池塘和對照池塘在水溫、水深和溶解氧之間無顯著差異（P>0.05），見表1。

注： 同一行相同字母代表差異不顯著（P>0.05），不相同字母代表差異顯著（P<0.05）。

2.2?小龍蝦生長及成活

5月8日開始放苗，經(jīng)過3個月的對比試驗，8月10日開始4口塘同時采用多點位設(shè)置地籠的方式進行捕撈上市。統(tǒng)計測量結(jié)果（見表2）顯示，試驗開始時試驗塘與對照塘放養(yǎng)的螯蝦苗種大小無顯著性差異（P>0.05）;試驗結(jié)束時試驗塘螯蝦養(yǎng)殖平均成活率為76.5%，顯著高于對照池塘（P<0.05）。生長參數(shù)：試驗塘特定生長率為1.89%/d，平均規(guī)格為38.6 g/尾，均顯著大于對照塘（P<0.05），兩個池塘的螯蝦平均體長差異不顯著（P>0.05）。

注：同一列相同字母代表差異不顯著（P>0.05），不相同字母代表差異顯著（P<0.05）

3?討論

有研究顯示，微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中潑灑使用后可快速分散，分布于水體各水層不同部位，參與養(yǎng)殖動物殘餌、糞便以及水體中有機質(zhì)的分解，加快水環(huán)境改良，抑制有害微生物滋生[4]。本研究顯示，復(fù)合芽孢桿菌純粉能有效降低克氏原螯蝦池塘的pH值、亞硝酸鹽濃度、氨氮濃度，增加溶解氧含量，這一結(jié)果與南美白對蝦、中華絨螯蟹養(yǎng)殖中使用微生態(tài)制劑試驗結(jié)果相似[4-5]。這表明水產(chǎn)用微生態(tài)制劑在淡水經(jīng)濟甲殼類養(yǎng)殖期間對維持池塘水環(huán)境平衡具有積極的促進作用。

微生態(tài)制劑作為水產(chǎn)養(yǎng)殖飼料添加劑，其作用主要表現(xiàn)為在養(yǎng)殖動物體內(nèi)產(chǎn)生各種消化酶參與能量代謝，提高動物對飼料的利用率，同時產(chǎn)生的有些酶類對促進養(yǎng)殖動物的生命活動起著重要作用[3]。此外，微生態(tài)制劑所產(chǎn)生的大量有益菌群與病原菌間就生存和繁殖的空間、時間、定居部位以及營養(yǎng)素等展開競爭，有效抑制了病原菌的生存、繁殖、定居以及附著，改善了養(yǎng)殖動物體內(nèi)外生存環(huán)境，提高了養(yǎng)殖動物的存活率[6]。對比試驗結(jié)果顯示，試驗池塘克氏原螯蝦成活率和生長效果均顯著高于對照組，此結(jié)果與賈秋紅等[7]、高宏偉等[8]研究的結(jié)果一致，這說明水產(chǎn)用微生態(tài)制劑在提高養(yǎng)殖動物成活率上具有重要作用。有研究發(fā)現(xiàn)，水產(chǎn)用的微生態(tài)制劑中大部分有益菌能使動物機體免疫器官發(fā)育加快，T、B、淋巴細胞的數(shù)量增多，從而增強機體免疫力，提高養(yǎng)殖成活率[9]。此外，微生態(tài)制劑可通過物種間的競爭抑制動物腸道中的有害細菌生長繁殖，其中芽孢桿菌還能通過提高飼料轉(zhuǎn)化和吸收，促進動物的生長。

近年來隨著生物技術(shù)不斷創(chuàng)新，具有特異性和針對性的新菌株獲得成功培育，同時其穩(wěn)定性也在很大程度上得到了提高，因此，適宜在水產(chǎn)上使用的微生態(tài)制劑終將成為飼料工業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)中最具潛力的添加劑與改良劑[10]。在我國目前生態(tài)環(huán)境大保護的歷史背景下，水產(chǎn)養(yǎng)殖要向著提質(zhì)增效、綠色環(huán)保方向發(fā)展，陜西省克氏原螯蝦養(yǎng)殖也必將走一條清潔養(yǎng)殖、健康養(yǎng)殖之路，微生態(tài)制劑在克氏原螯蝦健康生態(tài)養(yǎng)殖中的應(yīng)用前景廣闊。

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