翁偉妍　許文愷　張宏濤

高效液相色譜法對(duì)氰霜唑的分析檢測(cè)

翁偉妍許文愷張宏濤

（廣東中科英?？萍加邢薰緩V東佛山528000）

文章探究了一種氰霜唑的高效液相色譜（HPLC）檢測(cè)方法。方法：采用SymmetryC18色譜柱（填料粒徑5μm,規(guī)格4.6 mm×150mm），流動(dòng)相：0.01%磷酸溶液：乙腈=35.0%：65.0%，流速為1.00ml/min，進(jìn)樣體積：20 μl，柱溫：35 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm，運(yùn)行時(shí)間：8.0 min。結(jié)果表明：氰霜唑的濃度在0.01 mg /L～10.0 mg/L范圍內(nèi)線性良好（低濃度線性0.0100 mg /L～0.500 mg /L，Y=5.30×104X+3.61×10，r=1.0000；高濃度線性0.200 mg /L～10.0 mg /L，Y=5.25×104X+7.02×102，r=1.0000）；方法的最低檢測(cè)限為0.01mg/L；氰霜唑相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.366%，在水中的平均回收率為99.5%。結(jié)論：此法操作簡(jiǎn)便、精密度高、靈敏高、重復(fù)性好，適用于氰霜唑的含量測(cè)定。

氰霜唑；高效液相色譜法；含量測(cè)定；分析方法

氰霜唑?yàn)楸Ｗo(hù)性殺菌劑，具有很低的毒性及良好的環(huán)境兼容性，本文以擴(kuò)大檢測(cè)范圍，降低檢測(cè)限為目的，通過(guò)紫外檢測(cè)波長(zhǎng)，流動(dòng)相配比、流速等方面對(duì)氰霜唑高效液相色譜測(cè)定方法進(jìn)行研究，確立了一種精密度高，靈敏度高，檢測(cè)限低、重復(fù)性好的高效液相色譜分析方法。

1 儀器與試劑

AcquityArc高效液相色譜儀。配UV檢測(cè)器（紫外檢測(cè)器）、Empower色譜工作站；梅特勒-托利多XP205 ME2型電子天平;親水PTFE針式過(guò)濾器0.22 μm（上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司）。

乙腈：色譜純（默克股份兩合公司）；水：蒸餾水（廣州屈臣氏食品飲料有限公司）；磷酸：色譜純（上海安譜實(shí)驗(yàn)科技有限公司）；氰霜唑標(biāo)樣（純度：98.7 %±0.3 %） (批號(hào)G123418 )由上海安譜實(shí)驗(yàn)科技股份有限公司提供。

0.01 %磷酸溶液配制：吸取0.100 ml磷酸溶于1 000 ml蒸餾水，用0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾，備用。

2 色譜條件

色譜柱：SymmetryC18 （填料粒徑5 μm，規(guī)格4.6 mm×150 mm），流動(dòng)相：0.01 %磷酸溶液：乙腈=35.0：65.0（V:V），流速為1.00 ml/min，進(jìn)樣體積：20 μl，柱溫：35 ℃，檢測(cè)波長(zhǎng)：280 nm，運(yùn)行時(shí)間：8.0min。在此色譜條件下，氰霜唑標(biāo)樣保留時(shí)間5.273 min。氰霜唑標(biāo)樣高效液相色譜圖見圖1.

圖1　氰霜唑高效液相色譜圖

3 標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液的配制

取氰霜唑標(biāo)準(zhǔn)樣品，精密稱取適量于10 ml容量瓶中，加流動(dòng)相溶解并定容至標(biāo)線，配制成濃度為1.00×103mg/L的標(biāo)準(zhǔn)貯備液。用流動(dòng)相稀釋。分別配制0.0100 mg/L，0.0200 mg/L，0.0500 mg/L，0.100 mg/L，0.200 mg/L，0.500 mg/L，1.00 mg/L，2.00 mg/L，5.00 mg/L，和10.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。

4 方法考察

4.1 檢測(cè)限、定量限和精密度

以0.0100 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)樣進(jìn)行分析，得到信噪比（S/N）為10.6，以峰高為基線噪音2～3倍時(shí)的濃度作為方法的檢測(cè)限，以峰高為基線噪音約10 倍時(shí)的濃度作為方法的定量限。結(jié)果：檢測(cè)限為0.00283 mg/L，定量限為 0.00943 mg/L。以10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣進(jìn)行6次重復(fù)測(cè)定，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.366 %。結(jié)果顯示方法的靈敏度高，檢測(cè)限低、精密度良好。

4.2 線性與范圍

以“3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制”系列的標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照“2 色譜條件”，取標(biāo)準(zhǔn)溶液20 μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖峰面積，以峰面積y對(duì)濃度x進(jìn)行回歸分析，得低濃度濃度回歸方程為：線性方程1為Y=5.30 ×104X+3.61 ×10 ，r=1.0000 ；得高濃度回歸方程為：Y=5.25 ×104X+7.02 ×102，r=1.0000 。結(jié)果表明氰霜唑濃度在0.0100 mg/L～ 10.0 mg/L范圍內(nèi)與峰面積呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

4.3 添加回收率試驗(yàn)

以空白水體為基質(zhì)，分別在10 ml的水體中加入0.200 ml的10 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液和0.100 ml的1 000 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液，混合均勻后，分別取1.00 ml溶液經(jīng)0.2μm濾膜過(guò)濾后，2按照“2 色譜條件”，取溶液20 μl注入液相色譜儀，進(jìn)行5次平行測(cè)定，測(cè)得氰霜唑的平均回收率99.5%（RSD %=0.248 %）.

5 小結(jié)

5.1 檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇

取氰霜唑?qū)φ掌愤m量，加流動(dòng)相稀釋至適宜濃度，在200 ～400 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行3D掃描，結(jié)果：氰霜唑280 nm處有最大吸收。故選擇280 nm為檢測(cè)波長(zhǎng)。

5.2 流動(dòng)相及流速選擇

參考有關(guān)文獻(xiàn)選擇乙腈-水等多種系統(tǒng)作為流動(dòng)相，在經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)后最終確定0.01%磷酸溶液：乙腈（35:65）。采用該流動(dòng)相時(shí)，基線噪音低，氰霜唑與相鄰的組分的峰形及分離度均較為理想。調(diào)節(jié)流速?gòu)?.6-1.2ml/min，綜合考慮分離度和保留時(shí)間，以流速為1.00 ml/min時(shí)為最佳。

方法研究表明，該法操作簡(jiǎn)便、結(jié)果準(zhǔn)確、靈敏度高、重現(xiàn)性好，且快捷、高效、對(duì)色譜柱傷害少，可作為理想的氰霜唑含量分析方法。

[1]SUNYU–qing(孫毓慶). ModernChromatographyanditsApplicatiobinMedicine (現(xiàn)代色譜法及其在醫(yī)藥中的應(yīng)用).Beijing(北京):MedicalPublishingHouse (人民衛(wèi)生出版社),2000.140

[2] SHENGLong-sheng(盛龍生).PharmaceuticalAnalysis(藥物分析). Beijing(北京):ChemicalIndustryPress(化學(xué)工業(yè)出版社),2003.

[3]陳鐵春.農(nóng)藥分析手冊(cè)[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2012.

10.3969/j.issn.2095-1205.2019.05.32

翁偉妍（1982- ），廣東云浮人，助理工程師，研究方向：環(huán)境毒理檢測(cè)及理化分析。

張宏濤（1978- ），吉林雙遼人，工程師，研究方向：毒理學(xué)。

S481.8

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2095-1205(2019)05-55-02