段白麗

(山西省中條山國有林管理局，山西 侯馬 044400)

黃酮全稱為黃酮類化合物，是植物中分布非常廣泛的一類天然物質(zhì)，具有抗心腦血管疾病、抗炎、抗免疫、抗微生物、保護(hù)消化性潰瘍、抗腫瘤等作用。黃酮作為一種功效成分，越來越受到人們的重視。沙棗(Elaeagnusangustifolia)是胡頹子科胡頹子屬落葉喬木或灌木，在山西省主要分布于黃土丘陵區(qū)和晉北風(fēng)沙區(qū)，有研究報(bào)道沙棗是一種集生態(tài)效益與經(jīng)濟(jì)效益于一體的重要樹種。因此，研究山西沙棗果肉中的總黃酮含量對進(jìn)一步認(rèn)識(shí)其經(jīng)濟(jì)價(jià)值具有重要意義，可為山西沙棗藥用價(jià)值的開發(fā)提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

2017年10月，在山西省黃土丘陵區(qū)和晉北風(fēng)沙區(qū)采集不同大小的沙棗果實(shí)，取果肉后自然陰干，用粉碎機(jī)研碎，于室溫下保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 儀器與試劑

儀器：721紫外可見分光光度計(jì)，上海第三分析儀器廠；BS110S型電子天平，北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；Centrisart D-16C 實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)，賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司；SB25-12超聲波清洗器，寧波新芝生物科技股份有限公司。

試劑：蘆丁標(biāo)品，批號(hào)100080-200707，中國藥品生物制品檢定所。其余試劑均為分析純。

1.3 方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作

準(zhǔn)確稱取20 mg蘆丁，用無水乙醇溶解后，定容至100 mL容量瓶中，配制成濃度為0.2 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在7個(gè)25 mL容量瓶中分別吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0 mL，0.5 mL，1.0 mL，2.0 mL，3.0 mL，4.0 mL，5.0 mL，之后在每個(gè)容量瓶中依次加入5%的NaNO2溶液0.3 mL，10%的Al(NO3)3溶液0.3 mL，4%的NaOH溶液4.0 mL.每加入1種溶液后要搖勻，并放置6 min，最后用60%的乙醇定容搖勻，放置15 min后，于498 nm波長處測定吸光度。

1.3.2 供試樣品的制備

稱取2.00 g沙棗果肉，按照料液比1∶22加入60%的乙醇溶液，在320 W功率下超聲處理15 min，之后在4 000 r/min下離心10 min，取上清液至25 mL容量瓶中，用蒸餾水定容。取1 mL樣液至25 mL容量瓶中，重復(fù)3次，按照標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作方法在498 nm波長處測定吸光度，計(jì)算總黃酮含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

用紫外可見分光光度計(jì)測定蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度值，見表1.

表1 蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液吸光度

以蘆丁濃度為X軸，對應(yīng)的吸光度值為Y軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖1所示。

對蘆丁濃度和吸光度值數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸后，得線性方程式為：Y=14.698 0X+0.001 1，R2=0.998 0.

2.2 不同分布區(qū)沙棗果肉中的總黃酮含量

以測定樣品的吸光度值為基礎(chǔ)，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性方程計(jì)算山西沙棗兩個(gè)分布區(qū)果肉中的總黃酮含量，如圖2所示。

圖1 蘆丁吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2 不同分布區(qū)沙棗果肉中的總黃酮含量

從圖2可看出，黃土丘陵區(qū)沙棗果肉中的總黃酮含量(7.37 mg/g)高于晉北風(fēng)沙區(qū)(6.21 mg/g)。對兩個(gè)分布區(qū)沙棗果肉中的總黃酮含量運(yùn)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件中的One-way ANOVA模塊進(jìn)行方差分析，結(jié)果表明，沙棗果肉中總黃酮含量在兩個(gè)分布區(qū)間差異不顯著(p>0.05)?？梢?，沙棗分布的立地條件對其果肉中總黃酮含量的影響不明顯。

2.3 不同大小沙棗果肉的總黃酮含量

將不同分布區(qū)的沙棗果實(shí)分別按照縱徑、橫徑進(jìn)行聚類分析，結(jié)果表明，兩個(gè)分布區(qū)的沙棗果實(shí)均可分為大果、中果、小果3類。運(yùn)用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件中的One-way ANOVA模塊對兩個(gè)分布區(qū)不同大小沙棗果實(shí)果肉中的總黃酮含量進(jìn)行方差分析，并用Duncan法對其進(jìn)行多重比較，結(jié)果見表2.

表2 不同大小沙棗果實(shí)果肉總黃酮含量 mg/g

從表2可以看出，兩個(gè)分布區(qū)不同大小沙棗果實(shí)果肉中總黃酮含量變化規(guī)律不一致。黃土丘陵區(qū)沙棗果肉中總黃酮含量呈現(xiàn)出隨著果實(shí)的增大而增加的趨勢，晉北風(fēng)沙區(qū)沙棗果肉中總黃酮含量則表現(xiàn)為隨著果實(shí)的增大而減少的趨勢。黃土丘陵區(qū)大果中的總黃酮含量明顯高于中果和小果的總黃酮含量，中果和小果果肉中總黃酮含量差異不顯著；晉北風(fēng)沙區(qū)大果中的總黃酮含量明顯小于中果和小果的，但中果和小果果肉中總黃酮含量差異不顯著。

3 結(jié)論

山西黃土丘陵區(qū)沙棗果肉中的總黃酮含量高于晉北風(fēng)沙區(qū)，但兩者間差異不顯著，即立地條件對沙棗果肉中總黃酮含量的影響不明顯。果實(shí)大小對果肉中總黃酮含量的變化有顯著影響，黃土丘陵區(qū)沙棗果肉中總黃酮含量呈現(xiàn)出隨著果實(shí)的增大而增加的趨勢，晉北風(fēng)沙區(qū)的則表現(xiàn)為隨果實(shí)的增大而減少的趨勢，但中果和小果果肉中的總黃酮含量間均無顯著差異。