李秋桐，蘇偉，母應(yīng)春

（貴州大學(xué)釀酒與食品工程學(xué)院，貴州 貴陽 550025）

膻味是羊肉具有的一種不良風(fēng)味，人們對(duì)羊肉的膻味進(jìn)行了大量研究，發(fā)現(xiàn)這種特征風(fēng)味物質(zhì)主要來源于羊肉的脂肪組織[1]。8 個(gè)～10 個(gè)碳原子的不飽和脂肪酸對(duì)羊肉的風(fēng)味影響很大，尤其是4-甲基辛酸和4-乙基辛酸是形成羊肉膻味的主要脂肪酸[2]。微生物除膻是一種較好的除膻方法，通過將菌株接種到羊肉中，微生物產(chǎn)生的脂肪酶與羊肉中的脂肪酸產(chǎn)生作用，對(duì)羊肉的風(fēng)味起到改善作用，一定程度上降低了羊肉的膻味[3]。傳統(tǒng)的方法中，采用添加橄欖油和指示劑的平板對(duì)脂肪酶產(chǎn)生菌進(jìn)行分離篩選。通過對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行改良，將橄欖油替換成羊油，將乳化后的羊油和熒光指示劑加入到篩選平板中，篩選出4 株能酶解羊油的霉菌，經(jīng)鑒定分別為微孢根霉（Rhizopus microsporus），米根霉（Rhizopus oryzae），米曲霉（Aspergillus oryzae）和多枝橫梗霉（Lichtheimia ramosa）。并通過液態(tài)發(fā)酵試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)這4 株霉菌對(duì)4-甲基辛酸和4-乙基辛酸均具有降解作用，可以用于羊肉除膻。

在菌種發(fā)酵的過程中，一些微生物會(huì)產(chǎn)生H2S、生物胺，賦予產(chǎn)品不好的感官品質(zhì)[4-5]。H2S 是一種急性劇毒，吸入少量高濃度的H2S 即可使人于短時(shí)間內(nèi)致命，即使是低濃度的H2S 也會(huì)對(duì)眼睛、呼吸系統(tǒng)及中樞神經(jīng)造成影響[6]。人體攝入過量的生物胺會(huì)引起中毒，表現(xiàn)出頭疼、心悸、嘔吐、血壓變化和呼吸紊亂等嚴(yán)重反應(yīng)，除此之外尸胺、腐胺、精胺和亞精胺等與亞硝酸鹽反應(yīng)能產(chǎn)生致癌物質(zhì)亞硝基胺[7]。發(fā)酵肉制品在制作過程中，大都會(huì)添加一定量的食鹽和亞硝酸鹽，起到調(diào)味和防腐的雙重功效。當(dāng)食鹽及亞硝酸鹽達(dá)到一定濃度時(shí)，會(huì)對(duì)微生物產(chǎn)生透脅迫及毒性作用，使微生物受到抑制甚至死亡[8]。因此篩選出的菌株應(yīng)對(duì)鹽類具有一定的耐受能力。

本試驗(yàn)對(duì)分離篩選出的4 株霉菌進(jìn)行功能性分析，包括脂肪酶活性的測(cè)定、產(chǎn)H2S 測(cè)定試驗(yàn)、產(chǎn)生物胺測(cè)定試驗(yàn)和抑菌試驗(yàn)，并對(duì)其耐鹽性、耐硝酸鹽性及生長(zhǎng)曲線進(jìn)行測(cè)定，進(jìn)一步篩選出合適的菌株進(jìn)行拮抗試驗(yàn)和復(fù)配試驗(yàn)，為后續(xù)菌株應(yīng)用于羊肉發(fā)酵提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

微孢根霉（Rhizopus microsporus）TZH1、米根霉（Rhizopus oryzae）TZH3、米曲霉 （Aspergillus oryzae）TZH4、多枝橫梗霉（Lichtheimia ramosa）4QT3、大腸桿菌（Escherichia coli）、金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）：貴州大學(xué)畜產(chǎn)品加工實(shí)驗(yàn)室。

NaOH、酚酞（分析純）：成都金山化學(xué)試劑有限公司；橄欖油（分析純）：國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；Na2HPO4·12H2O、FeCl2（分析純）：天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所；KH2PO4、溴甲酚紫（分析純）：天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心；95%酒精（分析純）：天津市富宇精細(xì)化有限公司；NaCl（分析純）：天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司；NaNO2（分析純）：天津市永大化學(xué)試劑有限公司；磷酸吡哆醛、硫胺素、賴氨酸、酪氨酸、精氨酸（分析純）：北京索萊寶科技有限公司；用于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（polymerase chain reaction，PCR）擴(kuò)增的全套試劑和擴(kuò)增引物：生工生物工程（上海）股份有限公司。

液體發(fā)酵培養(yǎng)基[9-10]：蛋白胨20.0 g、蔗糖5.0 g、（NH4）2SO41.0 g、MgSO40.5 g、K2HPO41.0 g、羊油 10.0 g（用2%聚乙烯醇乳化，羊油與聚乙烯醇按質(zhì)量比1 ∶4、蒸餾水 1 000 mL，pH7.0，121 ℃滅菌 20 min。

馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（potato dextrose agar，PDA）培養(yǎng)基：馬鈴薯浸粉5.0 g、葡萄糖20.0 g、瓊脂15.0 g、氯霉素 0.1 g、蒸餾水 1 000 mL，pH7.0，121 ℃滅菌20 min。

馬鈴薯葡萄糖肉湯（potato dextrose both，PDB）培養(yǎng)基：馬鈴薯浸粉5.0 g、葡萄糖20.0 g、氯霉素0.1 g、蒸餾水 1 000 mL，pH7.0，121 ℃滅菌 20 min。

H2S 測(cè)定培養(yǎng)基：蛋白胨 10.0 g、牛肉膏 5.0 g、瓊脂 20.0 g、NaCl 5.0 g、蒸餾水 1 000 mL，pH7.0，121 ℃滅菌20 min；FeCl2溶液：將FeCl2晶體先溶解在較濃鹽酸中，然后再用蒸餾水稀釋，再加入少量鐵粉；在瓊脂凝固前，將等量的FeCl2溶液在無菌條件下注入試管中，待其冷卻凝固即可接種菌株。

生物胺測(cè)定培養(yǎng)基[11]：蛋白胨10.0 g、牛肉膏5.0 g、K2HPO42.0 g、CaCO30.1 g，蒸餾水 1 000 mL，pH7.0，121 ℃滅菌20 min；無菌條件下加入硫胺素0.01 g、磷酸吡哆醛0.05 mg、溴甲酚紫0.05 g。

耐鹽測(cè)試培養(yǎng)基：蛋白胨10.0 g、牛肉膏5.0 g、NaCl 80.0 g、蒸餾水 1 000 mL，pH7.0，121 ℃滅菌 20 min。

耐亞硝酸鹽測(cè)試培養(yǎng)基：蛋白胨10.0 g、牛肉膏5.0 g、NaNO2150.0 mg、蒸餾水 1 000 mL，pH7.0，121 ℃滅菌20 min。

1.2 儀器與設(shè)備

YXQ-LS-100SII 立式壓力蒸汽滅菌器：上海博訊實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠；電熱恒溫培養(yǎng)箱（DPH-420）：天津天泰儀器有限公司；電子天平（FA2004N）：上海青海儀器有限公司；全溫?fù)u瓶柜（HYG-A）：蘇州培英實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司；超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)（BILON88-II）：上海比郎儀器制造有限公司；離心機(jī)（TGL20M）：長(zhǎng)沙邊佳森儀器設(shè)備有限公司；恒溫水浴箱（DK-98-II）：天津泰斯特儀器有限公司；紫外可見光光度計(jì)（756S）：上海棱光技術(shù)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 種子液的制備

無菌條件下，分別將TZH1、TZH3、TZH4 和4QT3這4 株霉菌接種于配制好的PDB 培養(yǎng)基中，30 ℃下培養(yǎng)72 h，制成4 株霉菌的種子菌液。

1.3.2 脂肪酶活力的測(cè)定

將菌株的種子菌液接種到液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，接種量為5%，30 ℃下180 r/min 培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)完畢后，取發(fā)酵液于4 ℃，8 000 r/min 離心15 min，上清液即為粗酶液，用于測(cè)定脂肪酶活力[12]。

取兩個(gè)150 mL 的三角瓶，記為為空白組和樣品組。分別向兩組三角瓶中加入4.0 mL 乳化橄欖油底物溶液和5.0 mL 緩沖液，再于空白組中加入95%的酒精15.00 mL，于40 ℃下水浴中預(yù)熱5 min，然后各自加入1.0 mL 酶液充分混勻，反應(yīng)15 min 后立即向樣品組中加入95%的酒精15.00 mL 使反應(yīng)終止，取出[13]。

向兩組三角瓶中分別滴入兩滴酚酞指示劑，用0.05 mol/L 的NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行滴定，至微紅色并在30 s 后不褪色為滴定終點(diǎn)，記錄NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液消耗體積并計(jì)算。脂肪酶活力的計(jì)算公式如下：

式中：X 為樣品的酶活力，U/g；V1為滴定樣品組時(shí)消耗NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積數(shù)，mL；V2為滴定空白組時(shí)消耗 NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積數(shù)，mL；c 為 NaOH 標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度，mol/L；n1為樣品的稀釋倍數(shù)。

1.3.3 生長(zhǎng)曲線的測(cè)定

分別將菌株以2%的接種量接種于PDB 培養(yǎng)基中，30 ℃下培養(yǎng)，每隔2 h 取菌液測(cè)定600 nm 下的OD值，取至36 h，繪制菌株的生長(zhǎng)曲線圖。

1.3.4 產(chǎn)H2S 及產(chǎn)生物胺測(cè)定試驗(yàn)

將FeCl2溶液注入到試管中，待瓊脂冷卻凝固后，用移液槍分別吸取4 種菌液各50 μL，插入到瓊脂中進(jìn)行接種，30 ℃下培育7 d，觀察瓊脂是否變成黑色，若變?yōu)楹谏珓t說明該菌株產(chǎn)H2S 記為陽性，不變黑色記為陰性，每株菌做2 個(gè)平行試驗(yàn)[14]。

無菌條件下，稱取1%的賴氨酸、酪氨酸和精氨酸混合氨基酸，添加到生物胺測(cè)定培養(yǎng)基中，混勻，對(duì)照組培養(yǎng)基中不添加氨基酸。分別將菌株接種到生物胺培養(yǎng)基中，30 ℃下培養(yǎng)3 d，觀察顏色變化，若由黃色變?yōu)樽仙珓t說明該菌株產(chǎn)氨基酸脫羧酶記為陽性，反之記為陰性[15]。

1.3.5 抑菌試驗(yàn)

以大腸桿菌和葡萄球菌作為指示菌。各挑取一環(huán)保藏在甘油中的大腸桿菌和葡萄球菌，在平板上劃線活化2 代后，用無菌生理鹽水制成濃度為107cfu/mL的菌懸液。用移液槍分別吸取200 μL 的指示菌菌懸液于PDA 培養(yǎng)基中，用涂布棒涂布均勻，靜置5 min。隨后用6 mm 的無菌打孔器在培養(yǎng)基上打孔。分別取4株菌株的菌液各 50 μL，4 ℃下 8 000 r/min 冷凍離心15 min，加入到培養(yǎng)基孔中，30 ℃下培養(yǎng)48 h。觀察孔周圍是否出現(xiàn)抑菌圈，并記錄出現(xiàn)的抑菌圈直徑，每株菌做2 個(gè)平行試驗(yàn)[14]。

1.3.6 耐鹽性及耐亞硝酸鹽性試驗(yàn)

將菌株分別接種于含8%NaCl 的耐鹽測(cè)試培養(yǎng)基中，對(duì)照組不接種菌液，30 ℃下培養(yǎng)72 h，測(cè)定600 nm處的OD 值，每組樣品測(cè)定3個(gè)平行，并計(jì)算“對(duì)照組OD 值/樣品組 OD 值”的比值[16]。

將菌株分別接種于含0.015%NaNO2的耐亞硝酸鹽培養(yǎng)基中，對(duì)照組不接種菌液，30 ℃下培養(yǎng)72 h，測(cè)定600 nm 處的OD 值，每組樣品測(cè)定3 個(gè)平行，并計(jì)算“對(duì)照組 OD 值/樣品組 OD 值”的比值。

1.3.7 菌株的拮抗試驗(yàn)與復(fù)配試驗(yàn)

通過上述試驗(yàn)篩選出2 株合適的菌株，將菌株在PDA 培養(yǎng)基上交叉劃Z 線，30 ℃下培養(yǎng)72 h 后，觀察是否均有菌落生長(zhǎng)，劃線的交叉處是否出現(xiàn)相互抑制生長(zhǎng)的現(xiàn)象，若無該現(xiàn)象則說明這2 株菌不具有措抗作用[17]。

將 2 株菌的種子液按 1 ∶1、1 ∶2、2 ∶1 的體積比分別接種于新的PDB 培養(yǎng)基中，30 ℃下培養(yǎng)，在培養(yǎng)12、24、36、48、60、72 h 時(shí)取菌液測(cè)定 600 nm 處的 OD值，同時(shí)測(cè)定pH 值。

2 結(jié)果與分析

2.1 脂肪酶活力的測(cè)定試驗(yàn)

在相同條件下對(duì)菌株進(jìn)行培養(yǎng)，脂肪酶活力測(cè)定結(jié)果如圖1所示。

圖1 菌株產(chǎn)脂肪酶活力Fig.1 Strains producing lipase activity

如圖1所示，THZ1 的酶活力最高為（4.35±0.02）U/mL，其次 TZH4 的酶活力為（3.62±0.05）U/mL，4QT3 的酶活力為（2.63±0.04）U/mL，TZH3 的酶活力為（2.34±0.02）U/mL。菌株TZH1 的酶活力顯著高于其他3 株菌（P＜0.05）。

發(fā)酵肉制品在風(fēng)味形成的過程中，脂類物質(zhì)起著重要的作用，而脂肪酶能催化脂類物質(zhì)的反應(yīng)，有利于風(fēng)味物質(zhì)的形成。于華等[18]從四川臘肉中分離獲得一株產(chǎn)脂肪酶能力較強(qiáng)的霉菌，在其最適產(chǎn)酶條件下脂肪酶活力可達(dá)384.05 U/100 mL。姚曉蕾[19]采用脂肪酶對(duì)豬肉進(jìn)行酶解，發(fā)現(xiàn)其揮發(fā)性分為物質(zhì)有明顯的增加，包括硫化物、有機(jī)硫化物、芳香類化合物及含乙醇類物質(zhì)等。因此菌株的脂肪酶活力越高，越能形成發(fā)酵肉制品中的優(yōu)良風(fēng)味。

2.2 菌株的生長(zhǎng)曲線

4 株菌的生長(zhǎng)活性曲線如圖2所示。

圖2 株菌株的生長(zhǎng)曲線Fig.2 Growth curves of 4 strains

4 株菌的生長(zhǎng)趨勢(shì)相似，其中0 h～8 h 為遲緩期，8 h～18 h 為對(duì)數(shù)期，18 h～26 h 為穩(wěn)定期，26 h～36 h 為衰亡期?？梢钥闯鼍闠ZH4 的生長(zhǎng)活性較強(qiáng)，其余3株的生長(zhǎng)活性相似。

2.3 產(chǎn)H2S和產(chǎn)生物胺測(cè)定試驗(yàn)

4 株菌株進(jìn)行產(chǎn)H2S 和產(chǎn)生物胺測(cè)定試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。

表1 菌株產(chǎn)H2S 產(chǎn)生物胺測(cè)定結(jié)果Table 1 Results of determination of amines produced by strains producing H2S

產(chǎn) H2S 測(cè)定試驗(yàn)中，TZH1、TZH3、TZH4 和 4QT3的瓊脂均無變黑現(xiàn)象，因此這4 株菌均不產(chǎn)生H2S。產(chǎn)H2S 測(cè)定試驗(yàn)中，4QT3 的培養(yǎng)基由黃色變?yōu)樽仙?，其余不變色，因此菌?QT3 產(chǎn)生物胺，其余3 株菌不產(chǎn)生生物胺。

H2S 是一種有毒物質(zhì)，不僅影響食品的口味，而且還對(duì)人體有害，它被稱為是人體神經(jīng)的毒劑，是窒息和刺激性較強(qiáng)的危害性氣體[20]。H2S 能與肉品中的還原性血紅蛋白作用生成紫紅色硫化血紅色蛋白，進(jìn)一步氧化形成綠色[21]。生物胺普遍存在于各種發(fā)酵食品，在生物細(xì)胞中具有重要的生理功能，但當(dāng)人體吸收過量的生物胺時(shí)，可能會(huì)引起頭痛、心悸、血壓變化等過敏性反應(yīng)[22]。某些微生物則會(huì)在充足的生物胺前體物（氨基酸）、具有氨基酸脫羧酶活性以及適合的生長(zhǎng)繁殖等條件下產(chǎn)生生物胺[23]。因此篩選用于發(fā)酵肉制品的菌株，不得產(chǎn)生H2S 和生物胺。

2.4 抑菌試驗(yàn)

4 株菌株進(jìn)行抑菌試驗(yàn)的結(jié)果見表2所示。

表2 菌株的抑菌能力Table 2 Antibacterial ability of the strain

如表2所示，TZH1、TZH3、TZH4 和 4QT3 對(duì)大腸桿菌的抑菌圈分別為 11.5、18.0、22.5、11.0 mm，TZH1、TZH3、TZH4 和4QT3 對(duì)金黃色葡萄球菌的抑菌圈分別為 11.0、21.5、19.5、14.5 mm。抑菌圈越大，說明抑菌能力越強(qiáng)。

由金黃色葡萄球菌和大腸桿菌O157：H7 等細(xì)菌性食物中毒引起的疾病在我國約占食品安全事件的30%～90%，也是世界范圍內(nèi)的主要公共衛(wèi)生問題[24]。致病性大腸桿菌和金黃色葡萄球菌通常引起腹部痙攣、水性或血性腹瀉、發(fā)燒、惡心和嘔吐等中毒癥狀，常出現(xiàn)在畜禽肉、水產(chǎn)品、奶、蛋等食品中?？梢钥闯觯闠ZH3 和TZH4 的抑菌能力較強(qiáng)，能更好地抑制有害微生物的生長(zhǎng)。

2.5 耐鹽性和耐亞硝酸鹽性試驗(yàn)

4 株菌株進(jìn)行耐鹽性驗(yàn)和耐亞硝酸鹽性試驗(yàn)的結(jié)果如圖3所示。

如圖3所示，耐鹽性試驗(yàn)中，TZH1、TZH3、TZH4和 4QT3 的“對(duì)照組 OD 值/樣品組 OD 值”比值分別為1.55、8.57、9.75、2.27。菌株 TZH3 的比值顯著高于其他3 株菌（P＜0.05），比值越大，說明耐鹽性越強(qiáng)。耐亞硝酸鹽性試驗(yàn)中，TZH1、TZH3、TZH4 和 4QT3 的“對(duì)照組OD 值/樣品組 OD 值”比值分別為 1.26、2.61、3.58、1.17。菌株TZH3 的比值顯著高于其他 3 株菌（P＜0.05），比值越大，說明耐亞硝酸鹽性越強(qiáng)。

圖3 菌株的耐鹽性及耐亞硝酸鹽性Fig.3 Salt tolerance and nitrite resistance of the strain

一般微生物細(xì)胞液的滲透壓為0.85%NaCl 的等滲狀態(tài)，微生物在等滲壓的食鹽溶液中代謝活動(dòng)仍可正常進(jìn)行，但當(dāng)增加食鹽時(shí)，食鹽溶液的滲透壓大于微生物細(xì)胞液的滲透壓，當(dāng)食鹽的濃度達(dá)到13%以上時(shí)，可以完全抑制微生物的生長(zhǎng)，包括乳酸菌以及大腸桿菌等[25]。當(dāng)食鹽及亞硝酸鹽達(dá)到一定濃度時(shí)，會(huì)對(duì)微生物產(chǎn)生滲透脅迫及毒性作用，使微生物受到抑制甚至死亡[14]。而在發(fā)酵肉制品時(shí)，難免會(huì)用到NaCl 和NaNO2等腌制劑，因此所篩選出的菌株應(yīng)當(dāng)具有良好的耐鹽性和耐亞硝酸鹽性?？梢钥闯?，4 株菌中TZH3和TZH4 的耐鹽性和耐亞硝酸鹽性較好。

2.6 菌株的拮抗試驗(yàn)與復(fù)配試驗(yàn)

綜合以上分析，最終選擇TZH3 和TZH4 進(jìn)行拮抗試驗(yàn)及復(fù)配試驗(yàn)。將菌株TZH3 和TZH4 在PDA 培養(yǎng)基上交叉劃線培養(yǎng)后，發(fā)現(xiàn)均有菌落生長(zhǎng)，并且在兩株菌的交叉劃線處均沒有發(fā)現(xiàn)相互抑制的現(xiàn)象，說明菌株TZH3 和THZ4 不具有拮抗作用。

菌株THZ3 和 TZH4 復(fù)配試驗(yàn)的 OD 值和 pH 值如圖4和圖5所示。

圖4 復(fù)配生長(zhǎng)情況比較Fig.4 Comparison of compound growth

由圖4、圖5可以看出當(dāng)TZH3 和TZH4 的復(fù)配體積比為 1 ∶1 時(shí)，生長(zhǎng)情況較優(yōu)，且在 48 h 時(shí) OD 值達(dá)到最大值。而pH 值變化不大，說明3 種復(fù)配比的產(chǎn)酸能力相似。因此可選擇TZH3 和TZH4 的復(fù)配體積比為1 ∶1 來對(duì)羊肉制品進(jìn)行發(fā)酵。

圖5 復(fù)配pH 值比較Fig.5 Comparison of compound pH values

3 結(jié)論

本試驗(yàn)將4 株具有除膻效果的霉菌進(jìn)行了功能性分析，包括微孢根霉（Rhizopus microsporus）TZH1、米根霉（Rhizopus oryzae）TZH3、米曲霉（Aspergillus oryzae）TZH4、多枝橫梗霉4QT3。通過脂肪酶活力測(cè)定試驗(yàn)、生長(zhǎng)曲線的測(cè)定、產(chǎn)H2S 和產(chǎn)生物胺測(cè)定試驗(yàn)、抑菌試驗(yàn)、耐鹽性和耐亞硝酸鹽性試驗(yàn)、拮抗試驗(yàn)與復(fù)配試驗(yàn)，驗(yàn)證菌株安全性。結(jié)果表明，菌株TZH3 和TZH4安全性較好，適用于羊肉制品發(fā)酵。

近年來，國內(nèi)許多學(xué)者將細(xì)菌或霉菌制成混合發(fā)酵制劑，接種到羊肉制品中。在發(fā)酵過程中，微生物產(chǎn)生的脂肪酶與羊肉中的脂肪酸產(chǎn)生作用，蛋白酶與蛋白質(zhì)產(chǎn)生作用，對(duì)羊肉的風(fēng)味及質(zhì)構(gòu)起到改善作用，一定程度上降低了羊肉的膻味[3]，為發(fā)酵制品提供特殊風(fēng)味和色澤的同時(shí)又不會(huì)破壞羊肉的品質(zhì)。現(xiàn)研究多采用直接購買的純種菌株進(jìn)行肉制品發(fā)酵，很少會(huì)篩選出具有特定功能性的菌株。菌株TZH3 和TZH4除了能夠產(chǎn)生脂肪酶外，經(jīng)試驗(yàn)驗(yàn)證還具有降解4-甲基辛酸和4-乙基辛酸的功能，可以制成發(fā)酵劑應(yīng)用于養(yǎng)肉制品發(fā)酵，開發(fā)新型羊肉制品并改善羊肉風(fēng)味，對(duì)擴(kuò)大羊肉消費(fèi)市場(chǎng)具有重要的實(shí)現(xiàn)意義。