宋健剛,鐘方麗*,王曉林,牟榮琴
吉林化工學(xué)院化學(xué)與制藥工程學(xué)院(吉林 132022)
黑果腺肋花楸(Aronia melanocarpa)系薔薇科腺肋花楸屬灌木,該樹種集藥用、食用、園林和生態(tài)價(jià)值于一體,市場(chǎng)前景非常廣闊。其果實(shí)為黑色球形,味甜酸稍有澀感,食用方法眾多,如果汁、果脯、果干和果醬等[1-3]。果實(shí)富含多酚、維生素和黃酮類化合物,具有眾多的保健功能。在歐美等國(guó)家,其果實(shí)提取物已在食品、藥品等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用[4-5]。黑果腺肋花楸果具有保肝、抗微波輻射及紫外線作用,還有防治糖尿病及心腦血管疾病等生理活性[6-9]。已從黑果腺肋花楸果實(shí)中成分分離得到三萜類、黃酮類、酚酸類、甾醇類、糖及糖苷類等成分[10],黃酮類化合物以花色苷、槲皮素及其衍生物為主。槲皮素衍生物主要以金絲桃苷、異槲皮素為主,金絲桃苷具有抗炎、抗腫瘤、利尿、止咳、降血壓、降低膽固醇、增強(qiáng)免疫力和抗抑郁等眾多功能[11-12]。離子液體是在室溫下呈液體的有機(jī)離子體系,具有溶解能力高、性質(zhì)穩(wěn)定、揮發(fā)性低等獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì),與傳統(tǒng)有機(jī)溶劑相比,離子液體具有綠色環(huán)保、不易燃燒等特點(diǎn),其在天然植物活性成分提取領(lǐng)域已有所應(yīng)用[13-15]。超聲波能夠使植物組織破碎,加速提取溶劑在植物中的滲透,如果將離子液體與超聲波聯(lián)用,將提高目標(biāo)物質(zhì)的提取率[16-17]。因此,試驗(yàn)采用離子液體輔助超聲波技術(shù),通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn)優(yōu)化了黑果腺肋花楸果中金絲桃苷的提取工藝條件,為黑果腺肋花楸果的深入開發(fā)提供了試驗(yàn)依據(jù)。
黑果腺肋花楸果購自吉林省黑果花楸農(nóng)業(yè)科技開發(fā)有限責(zé)任公司,干燥,粉碎,待用。
金絲桃苷對(duì)照品(成都曼思特生物科技有限公司);1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽、氯化-1-丁基-3-甲基咪唑、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽、1-丁基-3-甲基咪唑硫酸氫鹽、溴化-1-丁基-3-甲基咪唑(純度99%,上海成捷化學(xué)有限公司);甲醇、乙腈(色譜純,天津大茂化學(xué)試劑公司);水為重蒸餾水;其余所用試劑均為國(guó)產(chǎn)分析純。
LC-2000型高效液相色譜儀(大連依利特分析儀器有限公司);W 5-100 SP型恒溫水浴鍋(上海申生科技有限公司);FA 2004 N型電子分析天平(上海精密科學(xué)儀有限公司);JBT/C-YCL型超聲波藥品處理機(jī)(濟(jì)寧金百特電子有限責(zé)任公司);JYL型粉碎料理機(jī)(山東九陽小家電有限公司)。
1.3.1 黑果腺肋花楸果提取液中金絲桃苷的HPLC含量測(cè)定方法
1.3.1.1 色譜條件
色譜柱為大連依利特ODS2 C18(4.6 mm×250 mm,5 μm);流動(dòng)相A為乙腈,流動(dòng)相B為0.25%醋酸水溶液;程序:0~45 min,15%~20% A;流速為1.0 mL/min;柱溫為30 ℃;進(jìn)樣量為20 μL;檢測(cè)波長(zhǎng)為360 nm[18]。在此條件下,金絲桃苷的保留時(shí)間為16.03 min,理論塔板數(shù)為87 242,與相鄰峰的分離度為2.53。HPLC色譜圖見圖1。
1.3.1.2 對(duì)照品溶液的制備
精密稱取2.30 mg干燥至恒質(zhì)量的金絲桃苷對(duì)照品,置于25 mL的容量瓶中,用甲醇溶解并定容至刻度,搖勻,配制成質(zhì)量濃度為0.092 mg·mL-1的對(duì)照品溶液,置于冰箱中避光保存?zhèn)溆肹19]。
1.3.1.3 供試樣品溶液的制備
稱取5 g黑果腺肋花楸果粉末,放入圓底燒瓶中,以一定的料液比加入離子液體乙醇水溶液,超聲提取,過濾,收集提取液,轉(zhuǎn)移至50 mL容量瓶中并用提取溶劑稀釋至刻度,搖勻,用微孔濾膜(0.22 μm)濾過,取續(xù)濾液,作為供試品溶液。
1.3.1.4 流動(dòng)相的選擇
試驗(yàn)主要考察甲醇-0.1%醋酸水溶液、乙腈-0.25%醋酸水溶液、乙腈-0.25%磷酸水溶液等各種流動(dòng)相對(duì)黑果腺肋花楸果提取液中金絲桃苷保留時(shí)間和分離度的影響。
圖1 對(duì)照品溶液及供試品溶液的HPLC圖譜
1.3.1.5 線性關(guān)系考察
吸取金絲桃苷的對(duì)照品溶液,配制成質(zhì)量濃度分別為0.97,1.84,3.68,5.52,7.36,29.0,11.04,14.72和18.40 μg·mL-1的系列對(duì)照品溶液,分別進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積。以金絲桃苷峰面積為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[20],得回歸方程Y=56.205X+11.297,R=0.998 1(n=9)。結(jié)果表明金絲桃苷進(jìn)樣濃度在0.97~18.40 μg·mL-1范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。
1.3.1.6 重復(fù)性試驗(yàn)
取6份同一批號(hào)黑果腺肋花楸果粉末,按1.3.1.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液,進(jìn)樣量各20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積。金絲桃苷峰面積分別為140.68,141.87,140.84,141.54,141.95和140.76,RSD為0.41%,表明該含量測(cè)定方法具有較好的重復(fù)性。
1.3.1.7 儀器精密度試驗(yàn)
吸取對(duì)照品及供試品溶液,連續(xù)進(jìn)樣6次,每次進(jìn)樣20 μL,分別測(cè)定對(duì)照品及供試品溶液中金絲桃苷的峰面積。供試品中金絲桃苷峰面積分別為141.84,142.28,139.87,145.62,141.95和140.88,RSD為1.37%。對(duì)照品中金絲桃苷峰面積分別為496.09,485.94,497.15,488.47,491.28和487.96,RSD為0.93%,表明儀器精密度符合要求。
1.3.1.8 供試品溶液的穩(wěn)定性試驗(yàn)
吸取供試品溶液,分別于0,1,3,5,7和24 h進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積。供試品中金絲桃苷峰面積分別為141.84,140.82,138.75,142.73,141.07和142.12,RSD為0.99%,表明供試品溶液在室溫下24 h內(nèi)穩(wěn)定,滿足測(cè)定要求。
1.3.1.9 加樣回收率試驗(yàn)
稱取6份金絲桃苷含量已知的黑果腺肋花楸果粉末,每份中加入0.5 mL質(zhì)量濃度為92.00 μg·mL-1的金絲桃苷對(duì)照品溶液,按1.3.1.3項(xiàng)下方法制備供試品溶液,在上述色譜條件下,測(cè)定金絲桃苷的峰面積。
1.3.1.10 檢測(cè)限與定量限試驗(yàn)
吸取適量對(duì)照品溶液,逐步稀釋,直到檢測(cè)峰高為基線噪聲的3倍為止,計(jì)算金絲桃苷的最低檢測(cè)濃度。結(jié)果表明,金絲桃苷的最低檢測(cè)限為0.029 44 μg·mL-1。吸取適量對(duì)照品溶液,逐步稀釋,直到檢測(cè)峰高為基線噪聲的10倍為止,計(jì)算金絲桃苷的定量限[21]。結(jié)果表明,金絲桃苷的定量限為0.055 20 μg·mL-1。
1.3.2 離子液體超聲輔助提取黑果腺肋花楸果中金絲桃苷工藝條件的優(yōu)化
1.3.2.1 單因素試驗(yàn)
1) 離子液體類型的選擇。稱取5 g黑果腺肋花楸果粉末,放入圓底燒瓶中,加入濃度為0.05 mol·L-1的不同離子液體的50%乙醇水溶液,離子液體分別為:溴化-1-丁基-3-甲基咪唑、氯化-1-丁基-3-甲基咪唑、1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸鹽、1-丁基-3-甲基咪唑硫酸氫鹽、1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽。放入超聲機(jī)中,料液比為1:20(g/mL),設(shè)定水浴溫度50~60 ℃、超聲功率80 W、提取30 min,過濾,濾液轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶中,50%乙醇水溶液定容,搖勻,用微孔濾膜(0.22 μm)濾過,棄去初濾液,取續(xù)濾液作為供試品溶液。按1.3.1.1節(jié)色譜條件進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積,計(jì)算金絲桃苷的提取率。
式中:C為提取液中金絲桃苷的質(zhì)量濃度(μg·mL-1);V為提取液定容的體積(mL);W為黑果腺肋花楸果粉末的質(zhì)量(g)。
2) 提取溶劑的選擇。稱取5 g黑果腺肋花楸果粉末,放入圓底燒瓶中,加入濃度為0.05 mol·L-1的1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽乙醇水溶液,乙醇體積分?jǐn)?shù)分別設(shè)定為0,10%,30%,50%,70%和90%,放入超聲機(jī)中,其他按1.3.2.1節(jié)中(1)方法提取。按1.3.1.1節(jié)色譜條件進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積,計(jì)算金絲桃苷的提取率。
3) 離子液體濃度的選擇。稱取5 g黑果腺肋花楸果粉末,放入圓底燒瓶中,加入濃度分別為0.05,0.1,0.3,0.5,0.7,0.9和1.1 mol·L-1的1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽50%乙醇水溶液[22],放入超聲機(jī)中,其他按1.3.2.1節(jié)中(1)方法提取。按1.3.1.1節(jié)色譜條件進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積,計(jì)算金絲桃苷的提取率。
4) 料液比的選擇。稱取5 g黑果腺肋花楸果粉末,放入圓底燒瓶中,加入濃度為0.05 mol·L-1的1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽50%乙醇水溶液,放入超聲機(jī)中,料液比分別設(shè)定為1:5,1:10,1:20,1:30,1:40和1:50(g/mL),其他按1.3.2.1節(jié)中(1)方法提取。按1.3.1.1節(jié)色譜條件進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積,計(jì)算金絲桃苷的提取率。
5) 提取時(shí)間的選擇。稱取5 g黑果腺肋花楸果粉末,放入圓底燒瓶中,加入濃度為0.05 mol·L-1的1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽50%乙醇水溶液,放入超聲機(jī)中,料液比設(shè)定為1:20(g/mL),提取時(shí)間分別設(shè)定為5,10,15,20,30,40,50和60 min,其他按1.3.2.1節(jié)中(1)方法提取。按1.3.1.1節(jié)色譜條件進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積,計(jì)算金絲桃苷的提取率。
6) 超聲功率的選擇。稱取5 g黑果腺肋花楸果粉末,放入圓底燒瓶中,加入濃度為0.05 mol·L-1的1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽50%乙醇水溶液,放入超聲機(jī)中,超聲功率分別為60,70,80,90和100 W,料液比為1:20(g/mL),提取時(shí)間為40 min,其他按1.3.2.1節(jié)中(1)方法提取。按1.3.1.1節(jié)色譜條件進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積,計(jì)算金絲桃苷的提取率。
7) 提取水浴溫度的選擇。稱取5 g黑果腺肋花楸果粉末,放入圓底燒瓶中,加入濃度為0.05 mol·L-1的1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽50%乙醇水溶液,放入超聲機(jī)中,料液比設(shè)定為1:20(g/mL),超聲功率為90 W,提取時(shí)間為40 min,提取水浴溫度分別設(shè)定為30~40,40~50,50~60,60~70和70~80 ℃,其他按1.3.2.1節(jié)中(1)方法提取。按1.3.1.1節(jié)色譜條件進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積,計(jì)算金絲桃苷的提取率。
1.3.2.2 正交試驗(yàn)
根據(jù)單因素試驗(yàn)結(jié)果,將提取水浴溫度固定為70~80 ℃,離子液體固定為1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽,離子液體濃度固定為0.05 mol·L-1,選擇提取溶劑乙醇體積分?jǐn)?shù)、料液比、提取時(shí)間、超聲功率作為考察因素,按四因素三水平進(jìn)行試驗(yàn),因素水平表見表1。
表1 正交試驗(yàn)因素水平表
1.3.2.3 工藝驗(yàn)證性試驗(yàn)
稱取3份黑果腺肋花楸果粉末,每份5 g,放入圓底燒瓶中,加入濃度為0.05 mol·L-1的1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽60%乙醇水溶液,放入超聲機(jī)中,料液比為1:25(g/mL),設(shè)定水浴溫度70~80 ℃、超聲功率80 W、提取35 min,過濾,濾液轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶中,60%乙醇水溶液定容,搖勻,用微孔濾膜(0.22 μm)濾過,棄去初濾液,取續(xù)濾液作為供試品溶液。按1.3.1.1節(jié)色譜條件,分別進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積,計(jì)算金絲桃苷的提取率。
1.3.2.4 離子液體輔助提取黑果腺肋花楸果中金絲桃苷的對(duì)比試驗(yàn)
稱取3份黑果腺肋花楸果粉末,每份5 g,放入圓底燒瓶中,加入60%乙醇水溶液,放入超聲機(jī)中,料液比為1:25(g/mL),設(shè)定水浴溫度70~80 ℃、超聲功率80 W、提取35 min,過濾,濾液轉(zhuǎn)移到50 mL容量瓶中,60%乙醇水溶液定容,搖勻,用微孔濾膜(0.22 μm)濾過,棄去初濾液,取續(xù)濾液作為供試品溶液。按1.3.1.1節(jié)色譜條件,分別進(jìn)樣20 μL,測(cè)定金絲桃苷的峰面積,計(jì)算金絲桃苷的提取率。
結(jié)果表明,適宜的流動(dòng)相為乙腈-0.25%醋酸水溶液梯度洗脫,它能夠?qū)⒑诠倮呋ㄩ惫崛∫褐械慕鸾z桃苷與其他物質(zhì)分開,保留時(shí)間適中。按照金絲桃苷峰計(jì)理論,塔板數(shù)為87 242,與相鄰峰的分離度為2.53,故選擇在上述流動(dòng)相條件下進(jìn)行相關(guān)試驗(yàn)。
表2顯示,金絲桃苷的平均回收率為98.17%,RSD為1.89%。
表2 回收率試驗(yàn)結(jié)果
2.3.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果
2.3.1.1 離子液體類型的選擇
表3顯示,在5種離子液體中,1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽對(duì)金絲桃苷的提取效果最好,所以選擇1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽為后續(xù)試驗(yàn)的離子液體。
2.3.1.2 提取溶劑的選擇
由圖2可知,乙醇體積分?jǐn)?shù)在0~50%范圍內(nèi),金絲桃苷的提取率隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的升高而增加;當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)達(dá)到50%時(shí),金絲桃苷的提取率達(dá)到了最高值,繼續(xù)提高乙醇體積分?jǐn)?shù),金絲桃苷的提取率逐漸下降。分析其原因可能是金絲桃苷為黃酮苷,極性較高,當(dāng)提取溶劑乙醇體積分?jǐn)?shù)較高時(shí),溶劑的極性降低,其對(duì)黃酮苷金絲桃苷的溶解能力下降,提取率逐漸降低,所以選擇50%乙醇水溶液為后續(xù)試驗(yàn)的提取溶劑。
表3 離子液體類型的選擇
圖2 乙醇體積分?jǐn)?shù)對(duì)提取率的影響
2.3.1.3 離子液體濃度的選擇
由圖3可知,當(dāng)離子液體濃度為0.05 mol·L-1時(shí),金絲桃苷的提取率達(dá)到最高值,之后隨著離子液體濃度的增加,金絲桃苷的提取率逐漸下降。分析其原因可能是隨著離子液體濃度的升高,溶液的黏度增大,溶劑滲透進(jìn)藥材基質(zhì)內(nèi)的能力減小,所以提取時(shí)離子液體濃度不要太高。
圖3 離子液體濃度對(duì)提取率的影響
2.3.1.4 料液比的選擇
由圖4可知,隨著料液比的增加,金絲桃苷的提取率逐漸升高,當(dāng)料液比達(dá)到1:20(g/mL)時(shí),金絲桃苷的提取率達(dá)到最大值。繼續(xù)加大料液比,金絲桃苷的提取率緩慢下降。分析原因可能是黑果腺肋花楸果的質(zhì)量固定時(shí),在一定范圍內(nèi)提高提取溶劑的用量,會(huì)使黑果腺肋花楸果中的金絲桃苷更好地轉(zhuǎn)移到溶劑中,所以當(dāng)料液比為1:20(g/mL)時(shí),黑果腺肋花楸果中的金絲桃苷幾乎全部溶出,如果繼續(xù)增大料液比,黑果腺肋花楸果中金絲桃苷的溶出變化就不明顯了,所以選擇1:20(g/mL)為后續(xù)試驗(yàn)的料液比。
圖4 料液比對(duì)提取率的影響
2.3.1.5 提取時(shí)間的選擇
由圖5可知,隨著提取時(shí)間的不斷延長(zhǎng),金絲桃苷的提取率不斷提高,當(dāng)提取時(shí)間從5 min增加到40 min時(shí),金絲桃苷的提取率達(dá)到到最大值,當(dāng)提取時(shí)間繼續(xù)延長(zhǎng)時(shí),金絲桃苷的提取率略有下降。分析原因可能是提取時(shí)間越長(zhǎng),越有利于金絲桃苷的溶出,但如果提取時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)使雜質(zhì)溶出增加,可能會(huì)對(duì)其測(cè)定有一定的影響,所以選擇40 min為后續(xù)試驗(yàn)的提取時(shí)間。
圖5 提取時(shí)間對(duì)提取率的影響
2.3.1.6 超聲功率的選擇
由圖6可知,隨著超聲功率的不斷增加,金絲桃苷的提取率不斷增加,當(dāng)超聲功率由60 W提高到90 W時(shí),金絲桃苷的提取率達(dá)到最高值,繼續(xù)提高超聲功率,金絲桃苷的提取率略有下降。分析其原因可能是隨著超聲功率的提高,超聲波對(duì)黑果腺肋花楸果細(xì)胞的破碎程度不斷增大,從而加速了金絲桃苷的溶出,但超聲功率過高,可能會(huì)對(duì)金絲桃苷的結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響或可能會(huì)使雜質(zhì)溶出增加,從而對(duì)其測(cè)定產(chǎn)生一定的影響,需要進(jìn)一步研究。
2.3.1.7 提取水浴溫度的選擇
由圖7可知,隨著水浴溫度的提高,金絲桃苷的提取率逐漸提高,當(dāng)水浴溫度達(dá)到70~80 ℃時(shí),金絲桃苷的提取率達(dá)到最高值。分析原因可能是隨著水浴溫度的不斷升高,提取溶劑的運(yùn)動(dòng)速度不斷增大,當(dāng)水浴溫度提高到70~80 ℃時(shí),提取溶劑處于微沸狀態(tài),此時(shí)溶劑滲透到黑果腺肋花楸果組織細(xì)胞中的能力最強(qiáng),提取率最高。
圖6 超聲功率對(duì)提取率的影響
圖7 提取溫度對(duì)提取率的影響
2.3.2 正交試驗(yàn)結(jié)果
稱取9份黑果腺肋花楸果粉,每份5 g,放入圓底燒瓶中,按正交試驗(yàn)表進(jìn)行試驗(yàn),將每組試驗(yàn)的提取水浴溫度固定為70~80 ℃,離子液體濃度固定為0.05 mol·L-1,結(jié)果見表4。
表4 正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)結(jié)果
結(jié)果表明:離子液體超聲輔助提取黑果腺肋花楸果中金絲桃苷的最優(yōu)方案為A3B3C1D2,各因素的影響大小為乙醇體積分?jǐn)?shù)>超聲功率>料液比>提取時(shí)間,即離子液體為1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽,離子液體濃度為0.05 mol·L-1,料液比為1:25(g/mL),提取溶劑為60%乙醇水溶液,提取時(shí)間為35 min,提取溫度為70~80 ℃,超聲功率為80 W。
2.3.3 工藝穩(wěn)定性驗(yàn)證試驗(yàn)
經(jīng)3次驗(yàn)證試驗(yàn),金絲桃苷的峰面積分別為158.28,165.75和168.95,平均值為164.33,其提取率分別為26.24,27.57和28.30 μg·g-1,平均值為27.37 μg·g-1,RSD為3.80%,結(jié)果表明,優(yōu)選的離子液體超聲輔助提取工藝比較穩(wěn)定。
2.3.4 對(duì)比試驗(yàn)
提取體系不加入離子液體,其它操作條件與2.3.3節(jié)相同,3次試驗(yàn)結(jié)果中,金絲桃苷的峰面積分別為119.55,119.18和112.21,平均值為116.98,其提取率分別為19.32,19.19和17.95 μg·g-1,平均值為18.82 μg·g-1,RSD為3.98%,根據(jù)2.3.3節(jié)試驗(yàn)結(jié)果可知,離子液體的加入使金絲桃苷提取率提高了45.43%。
1) 試驗(yàn)對(duì)黑果腺肋花楸果中金絲桃苷含量的HPLC測(cè)定方法進(jìn)行了考察。結(jié)果表明,所建立的含量測(cè)定方法操作簡(jiǎn)便,精密度高,重復(fù)性及線性關(guān)系良好,金絲桃苷的平均回收率為98.17%。
2) 試驗(yàn)采用超聲波輔助離子液體法對(duì)黑果腺肋花楸果中的金絲桃苷進(jìn)行了提取,在單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上,通過正交試驗(yàn)進(jìn)一步考察了提取工藝參數(shù)。結(jié)果顯示,最佳提取工藝:離子液體為1-丁基-3-甲基咪唑硝酸鹽,離子液體濃度為0.05 mol·L-1,料液比為1:25(g/mL),提取溶劑為60%乙醇水溶液,提取時(shí)間為35 min,提取溫度為70~80 ℃,超聲功率為80 W。在優(yōu)化提取條件下,金絲桃苷的提取率為27.37 μg·g-1。結(jié)果表明,添加有離子液體的乙醇水溶液比純乙醇水溶液對(duì)金絲桃苷的提取率提高了45.43%,可能是因?yàn)殡x子液體對(duì)植物纖維素的溶解能力較高,有利于目標(biāo)成分的溶出,從而使提取率提高。該方法具有快速、高效、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn),為黑果腺肋花楸果活性成分的提取提供了一種新方法。