陳金明，張文煥，羅蘇芹，戴宏杰，黃惠華*

1. 廣州聯(lián)豐香料科技有限公司（廣州 510663）；2. 吉百利糖果（廣州）有限公司（廣州 510730）；3. 華南理工大學(xué)食品科學(xué)與學(xué)院（廣州 510640）

小球藻（Chlorella）屬綠藻門（Chlorophyta）、綠球藻目（Chlorococcales）、小球藻科（Chlorellaceae）中一個(gè)重要的屬，是一種單細(xì)胞真核微藻[1]。小球藻在自然界分布較廣，在海洋、湖泊、池塘、溝渠、潮濕的土壤、樹皮等環(huán)境中均可生長(zhǎng)繁殖，但以淡水環(huán)境為主[2]。小球藻的光合效率高、生長(zhǎng)繁殖快、適應(yīng)性強(qiáng)，具有超量吸收某些有機(jī)物和重金屬的能力[3-4]。小球藻細(xì)胞中的色素主要為葉綠素和類胡蘿卜素，以干物質(zhì)計(jì)，其葉綠素含量通常為4%～6%，胡蘿卜素含量為0.044 1%～0.044 8%，類葉黃素含量為0.267%～0.310%[3]。葉黃素的提取是葉黃素規(guī)模化生產(chǎn)中十分重要的下游環(huán)節(jié)，與葉黃素的最終產(chǎn)品品質(zhì)和生產(chǎn)成本密切相關(guān)。目前提取葉黃素最常見的方法是通過(guò)有機(jī)溶劑提取，但存在萃取效率低、有機(jī)試劑殘留等問(wèn)題，其應(yīng)用性受到很大的限制[5]。

超臨界流體萃取技術(shù)是近20年來(lái)國(guó)際上迅速發(fā)展起來(lái)的最先進(jìn)的物理萃取技術(shù)，已廣泛應(yīng)用于食品、香料、石油、化工、醫(yī)藥等行業(yè)，其中CO2是最常用的超臨界流體[6]。在國(guó)外已有利用超臨界CO2萃取小球藻活性成分的研究報(bào)道[7-10]，但是在國(guó)內(nèi)，這方面的研究相對(duì)較少[11-12]。試驗(yàn)以萃取溫度、萃取壓力、萃取時(shí)間和夾帶劑用量為自變量，以精油得率和葉黃素濃度為因變量，通過(guò)響應(yīng)面優(yōu)化超臨界CO2萃取小球藻精油工藝，以期為超臨界CO2萃取小球藻精油及其活性成分提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 試驗(yàn)材料與方法

1.1 材料與試劑

小球藻，購(gòu)于CSIRO Marine Laboratory（Hobart，Australia）；無(wú)水乙醇，分析純，購(gòu)于天津市百市化工有限公司；乙腈，色譜純，購(gòu)于天津四友精細(xì)化工有限公司；甲醇，色譜純，購(gòu)于天津四友精細(xì)化工有限公司；葉黃素，購(gòu)于美國(guó)Sigma公司。

1.2 設(shè)備與儀器

DHG-9123 A超臨界CO2萃取設(shè)備，廣州輕工業(yè)研究所；高效液相色譜儀，美國(guó)戴安公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 小球藻精油提取技術(shù)路線

小球藻原料的預(yù)處理：購(gòu)買原料→在低溫（40～50 ℃）下烘干→稱取藻粉100 g→加入一定體積的無(wú)水乙醇→密封、避光浸泡24 h。

超臨界CO2萃取小球藻精油流程：

1) SC(L)FE-CO2流程：CO2鋼瓶→冷凍系統(tǒng)→貯罐→高壓泵→萃取釜→解析釜→冷凍系統(tǒng)（循環(huán)）。

2) 真空濃縮：萃取物→0.09 MPa，40 ℃下濃縮，去掉夾帶劑無(wú)水乙醇→小球藻精油（深綠色油狀物）。

1.3.2 單因素試驗(yàn)設(shè)計(jì)

影響超臨界CO2萃取效果的主要因素有：萃取壓力（MPa）、萃取溫度（℃）、萃取時(shí)間（h）、夾帶劑用量（mL）以及CO2流量（L/min）?？紤]到萃取時(shí)的成本和萃取儀器的穩(wěn)定性，單因素試驗(yàn)時(shí)未將CO2流量列入考察范圍而將其固定在2.0 L/min。試驗(yàn)主要研究小球藻中的活性成分，所以確定以小球藻精油得率（g/100 g小球藻粉）以及油中的葉黃素濃度（mg/g小球藻精油）為考察指標(biāo)，研究了萃取壓力（7～30 MPa）、萃取溫度（25～60 ℃）、萃取時(shí)間（1.0～6.0 h）、夾帶劑無(wú)水乙醇用量（0～300 mL）對(duì)小球藻精油得率和葉黃素濃度的影響。

1.3.3 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)

小球藻精油得率響應(yīng)面優(yōu)化：在單因素試驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計(jì)，選取顯著性影響因素萃取壓力、萃取溫度和夾帶劑無(wú)水乙醇用量三個(gè)因素為自變量，以小球藻精油得率為因變量進(jìn)行三因素三水平的響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)（見表1）。采用Design-Expert 8.0.5軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，并預(yù)測(cè)最佳萃取工藝。

表1 小球藻精油得率的響應(yīng)面分析設(shè)計(jì)

小球藻精油葉黃素含量響應(yīng)面優(yōu)化：在單因素試驗(yàn)結(jié)果基礎(chǔ)上進(jìn)行響應(yīng)面設(shè)計(jì)，選取顯著性影響因素萃取壓力、萃取溫度、萃取時(shí)間和夾帶劑無(wú)水乙醇用量四個(gè)因素為自變量，以小球藻精油葉黃素濃度為因變量進(jìn)行四因素三水平的響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)（見表2）。采用Design-Expert 8.0.5軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸分析，并預(yù)測(cè)最佳萃取工藝。

表2 葉黃素濃度的響應(yīng)面分析設(shè)計(jì)

1.3.4 葉黃素含量分析

應(yīng)用高效液相色譜進(jìn)行葉黃素含量的分析[13]。采用Dionex HPLC系統(tǒng)測(cè)定，選用Symmetry C18色譜柱（5 μm；250 mm×4.6 mm），流動(dòng)相為甲醇-乙腈（9:1，V/V），流動(dòng)相流速1.0 mL/min，進(jìn)樣量10 μL，柱溫25 ℃，PDA 996檢測(cè)器在440 nm與470 nm處檢測(cè)葉黃素，以Sigma公司的葉黃素作為標(biāo)樣進(jìn)行葉黃素定量分析。得到回歸方程Y=8.766 8X-40.546，其中Y為峰面積（R2=0.999 2）。

2 結(jié)果與討論

2.1 單因素試驗(yàn)結(jié)果

2.1.1 萃取壓力對(duì)小球藻精油得率與葉黃素濃度的影響

稱取小球藻粉100 g，萃取溫度為40 ℃，萃取時(shí)間為3 h，夾帶劑無(wú)水乙醇為200 mL（液固比為2:1（mL·g）），萃取壓力分別設(shè)定為7，10，15，20，25和30 MPa，進(jìn)行萃取，每次萃取試驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行3次。小球藻精油得率分別為：3.89±0.13，4.85±0.12，5.11±0.07，5.80±0.09，5.48±0.07和5.13±0.06 g/100 g（見圖1（a））；小球藻精油中葉黃素濃度分別為：4.62±0.09，4.80±0.09，5.61±0.07，6.36±0.08，5.28±0.05和5.55±0.05 mg/g小球藻精油（見圖1（b））。單因素方差分析結(jié)果表明萃取壓力對(duì)小球藻精油得率和葉黃素濃度均有顯著性的影響，從圖1（a）中可知對(duì)精油得率影響最大的范圍為15～25 MPa之間，從圖1（b）中可知對(duì)葉黃素濃度影響最大的范圍為10～25 MPa之間。

2.1.2 萃取溫度對(duì)小球藻精油得率與葉黃素濃度的影響

稱取小球藻粉100 g，萃取壓力為20 MPa，萃取時(shí)間為3 h，夾帶劑無(wú)水乙醇用量為200 mL（液固比為2:1（mL·g）），萃取溫度分別設(shè)定為25，30，35，40，50和60 ℃，進(jìn)行萃取，每次萃取試驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行3次。小球藻精油得率分別為：4.53±0.10，4.80±0.09，5.09±0.07，5.24±0.07，4.71±0.10和3.60±0.07 g/100 g（見圖1（c））；小球藻油中葉黃素濃度分別為：5.92±0.10，6.26±0.16，6.14±0.11，6.89±0.08，6.05±0.13和5.82±0.11 mg/g小球藻精油（見圖1（d））。單因素方差分析結(jié)果表明萃取溫度對(duì)小球藻精油得率和葉黃素濃度均有顯著性的影響，從圖1（c）和（d）中可知對(duì)精油得率和葉黃素濃度影響最大的范圍均在30～50 ℃之間。

2.1.3 萃取時(shí)間對(duì)小球藻精油得率與葉黃素濃度的影響

稱取小球藻粉100 g，萃取壓力為20 MPa，萃取溫度為40 ℃，夾帶劑無(wú)水乙醇用量為200 mL（液固比為2:1（mL·g）），萃取時(shí)間分別設(shè)定為1.0，2.0，3.0，4.0，5.0和6.0 h進(jìn)行萃取，每次萃取試驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行3次。小球藻精油得率分別為：5.43±0.06，5.55±0.05，5.67±0.06，5.71±0.07，5.70±0.07和5.60±0.06 g/100 g（見圖1（e））；小球藻精油中葉黃素濃度分別為：5.34±0.07，6.33±0.07，6.89±0.08，6.81±0.07，6.63±0.09和6.80±0.07 mg/g小球藻精油（見圖1（f））。單因素方差分析結(jié)果表明萃取時(shí)間對(duì)小球藻精油的得率沒(méi)有顯著性的影響，后續(xù)試驗(yàn)將萃取時(shí)間固定在3.0 h。萃取時(shí)間對(duì)葉黃素濃度有顯著性的影響，從圖1（f）中可知對(duì)葉黃素濃度影響最大的范圍為2.0～5.0 h之間。

2.1.4 夾帶劑無(wú)水乙醇用量對(duì)小球藻精油得率與葉黃素濃度的影響

稱取小球藻粉100 g，萃取壓力為20 MPa，萃取溫度為40 ℃，萃取時(shí)間為3 h，夾帶劑無(wú)水乙醇分別設(shè)定為0，50，100，150，200和300 mL，即液固比分別為0，0.5:1，1:1，1.5:1，2:1和3:1（mL/g）進(jìn)行萃取，每次萃取試驗(yàn)重復(fù)進(jìn)行3次。小球藻精油得率分別為：0.48±0.09，2.81±0.08，5.00±0.12，5.84±0.08，5.67±0.07和5.56±0.06 g/100 g（見圖1（g））；小球藻精油中葉黃素濃度分別為：1.79±0.09，5.25±0.07，5.62±0.08，6.87±0.12，6.85±0.11和5.46±0.10 mg/g小球藻精油（見圖1（h））。單因素方差分析結(jié)果表明夾帶劑無(wú)水乙醇用量對(duì)小球藻精油得率和葉黃素濃度均有顯著性的影響，從圖1（g）和圖1（h）中可知對(duì)精油得率和葉黃素濃度影響最大的范圍均在100～300 mL之間。

圖1 萃取壓力、萃取溫度、萃取時(shí)間和夾帶劑用量分別對(duì)小球藻精油得率和葉黃素濃度的影響

2.2 響應(yīng)面分析優(yōu)化試驗(yàn)

2.2.1 小球藻精油得率響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)與結(jié)果分析

運(yùn)用Design-Expert 8.0.5軟件進(jìn)行響應(yīng)面數(shù)據(jù)分析，小球藻精油得率響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果見表3。

各因素經(jīng)過(guò)回歸擬合后，建立的數(shù)學(xué)模型為：Y=5.26+0.64A-0.47B+0.55C-0.071AB-0.32AC+0.41BC-0.38A2-0.54B2-0.48C2。其中，Y為小球藻精油得率（g/100 g），A為萃取壓力（MPa），B為萃取溫度（℃），C為夾帶劑無(wú)水乙醇用量（mL）。

由表4方差分析可知，整體模型的“Prob＞F”值小于0.000 1，表明該二次方程模型高度顯著。失擬項(xiàng)不顯著，說(shuō)明非試驗(yàn)因素對(duì)精油得率影響較小，該模型擬合良好。單因素A（萃取壓力）、B（溫度）以及C（夾帶劑無(wú)水乙醇）均有高度顯著的影響；AC、BC之間的交互作用影響均顯著，而AB之間的交互作用影響不顯著（見表3）。根據(jù)回歸方程一次項(xiàng)系數(shù)絕對(duì)值的大小可得到三個(gè)因素對(duì)精油得率影響大小順序?yàn)锳＞C＞B，即萃取壓力＞夾帶劑用量＞萃取溫度。

表3 小球藻精油得率的響應(yīng)面分析試驗(yàn)結(jié)果

表4 小球藻精油得率的回歸分析結(jié)果

圖2（a）是在夾帶劑無(wú)水乙醇用量為200 mL（液固比2:1（mL·g））時(shí)，萃取壓力與溫度對(duì)小球藻精油得率影響作用的響應(yīng)面曲線。從圖中可知，在較低的溫度水平下，小球藻精油的得率隨著溫度的上升而增大，這是因?yàn)殡S著溫度的上升，溶質(zhì)的傳質(zhì)系數(shù)增大；而在較高的溫度水平下，由于隨著溫度的升高，CO2的密度下降，導(dǎo)致了小球藻精油的得率隨著溫度的上升而下降的現(xiàn)象出現(xiàn)。同樣，在較低的壓力水平下，小球藻精油的得率隨著壓力的上升而增大并到達(dá)最高點(diǎn)，這是由于隨著壓力的增大，CO2流體的密度增大從而導(dǎo)致小球藻精油的溶解度增加[14]；小球藻精油得率出現(xiàn)最高點(diǎn)后開始回落，這可能是由于在高壓低溫狀態(tài)下，物料被壓緊密度增大而且在低溫下物料出現(xiàn)凝固現(xiàn)象，導(dǎo)致了傳質(zhì)速度的下降；或者在高壓狀態(tài)下，出現(xiàn)了溶質(zhì)與溶劑間的互相排擠的現(xiàn)象，這些原因均會(huì)導(dǎo)致小球藻精油得率的下降[15]。圖2（b）是在萃取溫度為40 ℃，萃取壓力與夾帶劑無(wú)水乙醇對(duì)小球藻精油得率影響作用的響應(yīng)面曲線。在高壓力水平下，無(wú)水乙醇用量在較低水平下時(shí)，小球藻精油的得率隨著無(wú)水乙醇用量的增加而提高，這是因?yàn)闊o(wú)水乙醇的增加使得越來(lái)越多的小球藻精油溶出，濃度增大，傳質(zhì)速度增加；而無(wú)水乙醇在較高的水平時(shí)，小球藻精油得率隨著用量的增加而降低，這可能是由于過(guò)量的無(wú)水乙醇使得小球藻精油濃度下降，傳質(zhì)速度下降或者是在高壓狀態(tài)下產(chǎn)生了溶質(zhì)與溶劑間的互相排擠的現(xiàn)象[15]。

圖2 萃取壓力與溫度和夾帶劑用量和萃取壓力對(duì)小球藻精油得率交互作用的響應(yīng)面圖

根據(jù)所建立的數(shù)學(xué)模型進(jìn)行參數(shù)最佳化分析，得到小球藻精油得率最高所需的參數(shù)條件為：萃取壓力24.16 MPa，萃取溫度35.59 ℃，夾帶劑無(wú)水乙醇用量155.42 mL（液固比約為1.55:1 mL/g）。此時(shí)小球藻精油得率為5.66 g/100 g藻粉。根據(jù)實(shí)際的應(yīng)用情況，以萃取壓力24 MPa，萃取溫度36 ℃，夾帶劑無(wú)水乙醇用量155 mL（液固比為1.55:1 mL/g）進(jìn)行萃取，重復(fù)3次，得到小球藻精油得率為5.68±0.06 g/100 g藻粉，預(yù)測(cè)值與實(shí)際值無(wú)顯著差異，表明預(yù)測(cè)結(jié)果實(shí)際可行。

2.2.2 小球藻葉黃素濃度響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)與結(jié)果分析

運(yùn)用Design-Expert 8.0.5軟件進(jìn)行響應(yīng)面數(shù)據(jù)分析，小球藻精油萃取工藝葉黃素濃度的響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)的結(jié)果見表5。

各因素經(jīng)過(guò)回歸擬合后，建立的數(shù)學(xué)模型為：Y=6.92-0.042A-0.18B-0.12C+0.13D+0.12AB-0.13AC-0.38AD-0.03BC+0.016BD+0.27CD-0.36A2-0.12B2-0.26C2-0.29D2。其中，Y為葉黃素濃度（mg/g小球藻精油），A為萃取壓力（MPa），B為萃取溫度（℃），C為萃取時(shí)間（h），D為夾帶劑無(wú)水乙醇用量（mL）。

由表6方差分析可知，整體模型的“Prob＞F”＜0.000 1，表明該二次方程模型高度顯著。失擬項(xiàng)不顯著，說(shuō)明該模型擬合良好。單因素A（萃取壓力）、B（萃取溫度）、C（萃取時(shí)間）和D（夾帶劑無(wú)水乙醇用量）均有高度顯著的影響；AB、AC、AD、BC和CD之間的交互作用影響均顯著，而BD之間的交互作用影響不顯著（見表6）。根據(jù)回歸方程一次項(xiàng)系數(shù)絕對(duì)值的大小可得到四個(gè)因素對(duì)葉黃素濃度影響大小順序?yàn)锽＞D＞C＞A，即萃取溫度＞夾帶劑用量＞萃取時(shí)間＞萃取壓力。

表5 葉黃素濃度的響應(yīng)面分析試驗(yàn)結(jié)果

表6 葉黃素濃度的回歸分析結(jié)果

圖3（a）為在萃取2.5 h和夾帶劑無(wú)水乙醇為150 mL（液固比1.5:1（mL·g））時(shí)，萃取壓力與溫度對(duì)小球藻精油中葉黃素濃度影響作用的響應(yīng)面曲線。從圖中可知，在較低的壓力水平下，葉黃素濃度隨著壓力的上升而增大并到達(dá)最高點(diǎn)，這是由于隨著壓力的增大，CO2流體的密度增大從而導(dǎo)至大量的葉黃素隨著小球藻油一起溶出，葉黃素濃度增加[16]；在較高的壓力水平下，葉黃素濃度隨著壓力的增加而降低，從前面的分析可知，在較高的壓力水平下，小球藻油的得率也是隨著壓力的增加而降低，所以這也可能是由于在高壓低溫狀態(tài)下，物料被壓緊密度增大而且在低溫下物料出現(xiàn)凝固現(xiàn)象，導(dǎo)致了傳質(zhì)速度的下降，而且葉黃素傳質(zhì)速度下降的速率更快；或者在高壓狀態(tài)下，出現(xiàn)了溶質(zhì)與溶劑間的互相排擠的現(xiàn)象[15]。至于溫度對(duì)葉黃素濃度的影響，在低溫階段，葉黃素濃度很快到達(dá)最高點(diǎn)，而低溫度水平階段小球藻油的得率會(huì)隨著溫度的提高而上升，說(shuō)明了在低溫的初始階段葉黃素以比小球藻精油更快的速度傳質(zhì)，隨后速率變慢；在高溫水平下，葉黃素濃度隨著溫度的提升而下降，與小球藻精油的溶出趨勢(shì)相近。

圖3（b）為在40 ℃和無(wú)水乙醇用量為150 mL（液固比1.5:1）時(shí)，壓力與萃取時(shí)間對(duì)小球藻精油中葉黃素濃度影響作用的響應(yīng)面曲線。壓力對(duì)葉黃素濃度的影響已在圖3中說(shuō)明，而在萃取時(shí)間上，葉黃素濃度隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而增加，在萃取約3 h后，葉黃素濃度隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而降低。這主要是因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間的萃取，會(huì)有大量其他組分溶出使得葉黃素濃度降低[16]。

圖3（c）為在40 ℃和萃取2.5 h時(shí)，壓力與無(wú)水乙醇用量對(duì)小球藻精油中葉黃素濃度影響作用的響應(yīng)面曲線。壓力對(duì)葉黃素濃度的影響已在圖3中說(shuō)明。在較低壓力水平下，葉黃素濃度隨著無(wú)水乙醇用量的增加而大幅提高，到達(dá)最高點(diǎn)后開始回落，在相同階段，小球藻精油的得率也隨著無(wú)水乙醇用量的增加而提高，但是增幅緩慢，所以在該階段中與其它組分相比，葉黃素以較大的傳質(zhì)速度溶出，使得濃度大幅提高；而在較高的壓力水平下，葉黃素濃度在較低的無(wú)水乙醇用量下變化不大，但是隨著無(wú)水乙醇用量的進(jìn)一步提高，葉黃素濃度急劇下降，這是因?yàn)樵谙嗤A段下，小球藻精油的得率快速增大并達(dá)到最高點(diǎn)，即相對(duì)較多的其他組分溶出，最終使得葉黃素濃度下降[16]。

根據(jù)所建立的數(shù)學(xué)模型進(jìn)行參數(shù)最佳化分析，得到小球藻油中葉黃素濃度最高所需的參數(shù)條件為：壓力15.76 MPa，萃取溫度30 ℃，萃取時(shí)間2.77 h，無(wú)水乙醇用量198.94 mL（液固比約1.99:1（mL·g））。此時(shí)葉黃素濃度為7.09（mg/g小球藻精油）。根據(jù)實(shí)際的應(yīng)用情況，以壓力16 MPa，萃取溫度30 ℃，萃取時(shí)間2.8 h，夾帶劑無(wú)水乙醇用量199 mL（液固比1.99:1（mL·g））進(jìn)行萃取，重復(fù)3次，得到葉黃素濃度為7.13±0.10（mg/g小球藻精油），預(yù)測(cè)值與實(shí)際值無(wú)顯著差異，表明預(yù)測(cè)結(jié)果實(shí)際可行。

圖3 萃取壓力與萃取溫度、萃取壓力與萃取時(shí)間、萃取壓力與夾帶劑用量對(duì)葉黃素濃度的交互作用的響應(yīng)面圖

3 結(jié)論

1) 單因素試驗(yàn)分析結(jié)果：通過(guò)對(duì)單因素萃取壓力、萃取溫度、萃取時(shí)間以及無(wú)水乙醇用量的顯著性檢驗(yàn)，除萃取時(shí)間以外，其它三因素均對(duì)小球藻精油得率有顯著性的影響；四個(gè)因素均對(duì)葉黃素濃度有顯著性影響，根據(jù)各因素的最大影響范圍確定了對(duì)響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)的水平范圍，分別為壓力15～25 MPa，溫度30～40 ℃，時(shí)間2～4 h，無(wú)水乙醇用量100～200 mL。

2) 通過(guò)對(duì)小球藻精油得率的三因素三水平響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)分析，小球藻精油的最佳萃取工藝為：萃取壓力24 MPa，萃取溫度36 ℃，無(wú)水乙醇用量155 mL。此時(shí)得到小球藻精油得率為5.68±0.06（g/100 g藻粉）。

3) 通過(guò)對(duì)葉黃素濃度的四因素三水平響應(yīng)面設(shè)計(jì)試驗(yàn)分析，葉黃素的最佳萃取工藝為：萃取壓力16 MPa，萃取溫度30 ℃，萃取時(shí)間2.8 h，無(wú)水乙醇用量199 mL進(jìn)行萃取。此時(shí)，得到葉黃素濃度為7.13±0.10（mg/g小球藻精油）。