張健萍，王仕英

（阿壩師范學(xué)院，四川阿壩州623002）

蘋果（Maluspumila）是水果的一種，屬于薔薇科蘋果亞科蘋果屬植物，其樹為落葉喬木。糖心蘋果的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值較高，含有豐富的維生素C，對(duì)預(yù)防心臟病、心肌梗塞等心血管疾病有一定好處。但由于蘋果有一定的季節(jié)性呼吸躍變周期現(xiàn)象，貯藏期較短，常會(huì)造成水分和營(yíng)養(yǎng)的大量流失，最后果實(shí)腐爛變質(zhì)，嚴(yán)重時(shí)可產(chǎn)生高達(dá)20%～30%采后損失率。因此，如何延長(zhǎng)果實(shí)采后的供應(yīng)期、保持其特有的良好品質(zhì)，成為了廣大果農(nóng)及科學(xué)研究者們十分關(guān)注的問題[1]。

鳳仙透骨草是鳳仙花科鳳仙花屬植物鳳仙花（Impatiens balsaminaL.）的干燥莖段，屬于一種傳統(tǒng)的中草藥植物，夏秋間植株新陳代謝旺盛時(shí)割取地上部分莖段，除去花果及葉，洗凈曬干即得[2]。鳳仙透骨草具有較為廣泛的抑菌作用，尤其是對(duì)酵母菌、霉菌有較強(qiáng)的抑制作用[3]。本實(shí)驗(yàn)以茂縣糖心蘋果為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，以透骨草提取液為殺菌劑，以殼聚糖為成膜劑，配制成一種復(fù)合涂膜保鮮劑，旨在為天然中草藥提取物在保鮮果蔬過程中的運(yùn)用提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 實(shí)驗(yàn)材料

茂縣糖心蘋果，產(chǎn)于四川省阿壩藏族羌族自治州茂縣，所購(gòu)買的糖心蘋果七八成熟且無任何的保鮮處理，挑選的大小基本一致、無病斑，且無機(jī)械損傷。

1.1.2 試劑

風(fēng)仙透骨草，安徽省亳州市宇誠(chéng)中藥材銷售有限公司；羧甲基殼聚糖，河北百優(yōu)生物科技有限公司；蒽酮、蔗糖、三氯乙酸（TCA）、硫代巴比妥酸（TBA）、愈創(chuàng)木酚、過氧化氫、高錳酸鉀、甲硫氨酸（MET）、氮藍(lán)四唑（NBT）、乙二胺四乙酸鈉、核黃素、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氫氧化鈉、蔗糖酯、丙酸鈣、檸檬酸、甘油、2，6-二氯靛酚（AR）等均為化學(xué)純?cè)噭?/p>

1.1.3 儀器與設(shè)備

紫外分光光度計(jì)、離心機(jī)、恒溫水浴鍋、電子分析天平、恒溫培養(yǎng)箱。

1.2 復(fù)合涂膜劑的配制方法

1.2.1 透骨草提取液的制備

鳳仙透骨草提取液的制備參照曾榮[3]的方法。將鳳仙透骨草50℃烘干，其莖段粉碎（過40目篩）后保存使用；再加入體積分?jǐn)?shù)為95%乙醇10倍比例提取，超聲循環(huán)（頻率為40kHz，溫度 50℃）提取1h，過濾；濾渣中加入95%乙醇5倍，超聲循環(huán)（頻率為40kHz，溫度 50℃）提取2h，過濾，將2次濾液合并，于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀45℃下濃縮制成透骨草乙醇原液（1 g/mL），置于 4℃貯藏。

1.2.2 復(fù)合涂膜的制備

鳳仙透骨草復(fù)合涂膜劑的制備參照陳楚英[4]的方法。經(jīng)過前期的單因素實(shí)驗(yàn)和正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了復(fù)合涂膜的配方，鳳仙透骨草復(fù)合涂膜劑配方:1.5%CMC、80mg/mL風(fēng)仙透骨草、700 mg/L檸檬酸、1.0%丙酸鈣、0.5%甘油、0.5%蔗糖酯。

1000 mL復(fù)合膜劑配制過程:將15gCMC放入蒸餾水中浸泡8h，待溶解后，依次加入檸檬酸、提取液、蔗糖酯、丙酸鈣及甘油，適量蒸餾水稀釋溶液，定容至1000mL，放置一段時(shí)間，透骨草提取液復(fù)合膜保鮮劑制作完成。其中甘油、檸檬酸、CMC、提取液、丙酸鈣及蔗糖酯的質(zhì)量濃度分別為5g/L、0.7g/L、15g/L、80g/L、10g/L、5g/L。CMC處理組其組分配比及濃度與復(fù)合涂膜保持一致，不加提取液且在室溫下配制。

1.3 蘋果的處理方法

將當(dāng)天采收的果實(shí)運(yùn)送到實(shí)驗(yàn)室后進(jìn)行如下處理:蘋果選果→用二氧化氯清洗表面→晾干→用清水清洗→晾干→塑料袋單果包裝→放入培養(yǎng)箱。

本次試驗(yàn)每個(gè)處理選取16 個(gè)果實(shí)，每個(gè)處理重復(fù)3次，另外用20個(gè)果實(shí)編號(hào)進(jìn)行失重率的測(cè)定。每組分別進(jìn)行如下處理，（1）殼聚糖涂膜:使用柔軟的毛刷均勻的涂在果實(shí)的表面，然后自然風(fēng)干；（2）復(fù)合涂膜:用另一毛刷將配制好的復(fù)合涂膜液均勻的涂膜在果實(shí)表面，自然晾干；（3）空白對(duì)照:不作任何處理。所有果實(shí)置于溫度13～25℃，相對(duì)濕度為85%～90%，間隔一周對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定。

1.4 各項(xiàng)指標(biāo)測(cè)定方法

1.4.1 失重率

對(duì)待儲(chǔ)藏的蘋果質(zhì)量（a）與儲(chǔ)藏一段時(shí)間后的質(zhì)量（b）進(jìn)行測(cè)定，失重率計(jì)算公式為:

失重率（%）=（a-b）/a×100%

1.4.2 總糖含量

采用蒽酮比色法[5]測(cè)定果實(shí)中總的含糖量。

1.4.3 丙二醛含量

采用硫代巴比妥酸法[6]測(cè)定。

1.4.4 超氧化歧化酶

采用氮蘭四唑法[7]測(cè)定。

1.4.5 過氧化物酶

采用愈創(chuàng)木酚法[8]測(cè)定。

1.4.6 過氧化氫酶

參照KarM等[9]的方法。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

本次試驗(yàn)所有數(shù)據(jù)都為3次測(cè)定的平均值，主要采用SPSS數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，并采用 Microsoft Word 2010 作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 復(fù)合涂膜液的處理對(duì)失重率的影響

在茂縣糖心蘋果儲(chǔ)存的過程中，水分的大量減少是造成蘋果質(zhì)量損失的重要原因。水分減少不僅會(huì)降低果實(shí)的飽滿程度，而且對(duì)口感的新鮮度也有影響，一般果實(shí)失重超過5%，就會(huì)產(chǎn)生萎蔫癥狀。從圖1可以看出，對(duì)照組的失重率變化最大，隨著儲(chǔ)藏時(shí)間的延長(zhǎng)，失重率逐漸增加，但是在涂抹了復(fù)合劑和殼聚糖之后，失重率的增加速度減緩，這說明了復(fù)合涂膜液能夠有效降低水分蒸發(fā)速率，對(duì)蘋果的保質(zhì)期有延長(zhǎng)的作用。在儲(chǔ)藏第28天時(shí)，涂膜了殼聚糖和復(fù)合劑的失重率分別為5.44%和4.37%，由此可見，復(fù)合涂膜液較殼聚糖相比，更能顯著減緩水分揮發(fā)。

圖1 不同處理對(duì)蘋果失重率的影響

2.2 復(fù)合涂膜液的處理對(duì)總含糖量的影響

如圖2所示，蘋果的總含糖量趨勢(shì)是在儲(chǔ)藏前期上升，在儲(chǔ)藏后期下降，這是由于果實(shí)不斷成熟所造成的。復(fù)合劑和殼聚糖在第7天時(shí)總含糖量達(dá)到最大值，之后逐漸緩慢降低，降低的速率較慢，直至第28天達(dá)到最小值。對(duì)照組在第14天總含糖量達(dá)到最大，之后快速降低，降低的速率較快。由圖2可知，涂膜了殼聚糖和復(fù)合劑的果實(shí)含糖量降低速率比空白對(duì)照組的果實(shí)含糖量降低速率要慢，這說明了涂膜處理可以有效的減緩果實(shí)含糖量的下降速率，并在后期逐漸趨于穩(wěn)定，保持較高的總含糖量[10]。

圖2 不同處理對(duì)蘋果總含糖量的影響

2.3 復(fù)合涂膜液的處理對(duì)丙二醛含量的影響

丙二醛（MDA）是膜脂過氧化反應(yīng)的最終分解產(chǎn)物，在植物受到傷害時(shí)，往往會(huì)產(chǎn)生膜脂過氧化反應(yīng)，所以MDA的含量高低可以反映植物遭受傷害的程度[11]。由圖3可知，不同處理的蘋果果實(shí)中丙二醛的含量隨著儲(chǔ)存時(shí)間的延長(zhǎng)而呈上升趨勢(shì)。在第7天到第14天的過程中，丙二醛的含量增長(zhǎng)速度加快，說明膜脂的過氧化程度加劇，蘋果果實(shí)在逐漸衰老。在儲(chǔ)藏到第21天時(shí)，經(jīng)過復(fù)合劑和殼聚糖涂抹的果實(shí)MDA含量的增加速度逐漸減緩，這說明鳳仙透骨草提取液復(fù)合膜保鮮劑能夠有效地延緩果實(shí)的成熟，對(duì)果實(shí)中MDA含量的積累也有抑制作用，從而提高果實(shí)的儲(chǔ)藏效果。

圖3 不同處理對(duì)蘋果果實(shí)丙二醛含量的影響

2.4 復(fù)合涂膜液的處理對(duì)過氧化物酶（POD）活性的影響

2.5 復(fù)合涂膜液的處理對(duì)過氧化氫酶（CAT）活性的影響

由圖5可知，經(jīng)不同處理后的蘋果果實(shí)CAT活性總體變化趨勢(shì)均表現(xiàn)為先上升后下降。7～21天期間，在第14天時(shí)CAT活性最高，且經(jīng)涂膜處理的蘋果果實(shí)CAT活性要高于對(duì)照組，在14～21天的過程中，未經(jīng)涂膜處理的果實(shí)CAT活性下降較快，而處理組卻能保持較高的CAT活性，說明了鳳仙透骨草提取液對(duì)果實(shí)的CAT酶活力的維持有一定的促進(jìn)作用。

圖4 不同處理對(duì)蘋果果實(shí)POD活性的影響

圖5 不同處理對(duì)蘋果果實(shí)CAT活性的影響

2.6 復(fù)合涂膜液的處理對(duì)超氧化物歧化酶（SOD）活性的影響

超氧化物歧化酶（SOD）在清除活性氧自由基過程中起重要作用，其活性高低在一定程度上能反映果實(shí)衰老的程度。

由圖6可知，果實(shí)在貯藏的過程中，SOD活性呈現(xiàn)下降的總體變化趨勢(shì)。在第7天時(shí)，經(jīng)過處理的蘋果果實(shí)SOD活性高于對(duì)照組，隨著果實(shí)保存時(shí)間的延長(zhǎng)，SOD活性不斷下降，但由鳳仙透骨草涂膜的蘋果果實(shí)SOD活性最終高于對(duì)照組，說明了鳳仙透骨草提取液對(duì)蘋果果實(shí)的SOD活力的降低有一定的抑制作用。

3 結(jié)論

鳳仙透骨草是鳳仙花的莖經(jīng)過炮制加工后的藥材，為透骨草類藥物中常用的一種。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，經(jīng)過鳳仙透骨草提取液涂膜的蘋果果實(shí)顯著好于對(duì)照組，說明鳳仙透骨草可在不同程度上提高蘋果果實(shí)的貯藏保鮮效果，延長(zhǎng)果實(shí)的貯藏保鮮時(shí)間。這種處理能夠有效地減少果實(shí)的失重率，保持較高的總含糖量，在一定程度上抑制果實(shí)丙二醛含量的上升，提高果皮POD、CAT、SOD活性，從而延緩果實(shí)的衰老。

圖6 不同處理對(duì)蘋果果實(shí)SOD活性的影響