許曉清， 張水蘭， 闞麗娟， 湯花梅， 李育敏， 莫紅梅， 張秀明， 熊丹

深圳市羅湖區(qū)人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科(廣東深圳 518001)

人乳頭瘤病毒(HPV)是一種嗜上皮性DNA病毒，可引起人皮膚、黏膜不同程度的增生性病變[1]。文獻(xiàn)報(bào)道HPV 感染率與宮頸病變嚴(yán)重程度呈顯著正相關(guān)HPV[2-3]。宮頸病變是宮頸癌發(fā)展的一個(gè)時(shí)期，在此時(shí)期進(jìn)行早期干預(yù)可降低宮頸癌進(jìn)展的概率[4]。根據(jù)導(dǎo)致宮頸癌的危險(xiǎn)度，HPV分為高危型和低危型。高危型HPV與宮頸上皮內(nèi)瘤、宮頸癌密切相關(guān)，而低危型HPV主要引起尖銳濕疣等良性病變[1]。Lefevere等[5]研究發(fā)現(xiàn)，宮頸癌與生活水平、衛(wèi)生條件以及受教育程度相關(guān)聯(lián)，而HPV檢測是宮頸癌篩查的重要手段之一。不同HPV亞型有不同致病能力，多重HPV感染是加重宮頸病變的重要因素。因此，明確一個(gè)地區(qū)HPV流行的主要基因型，對本地區(qū)宮頸癌及其他女性生殖道疾病的防治和治療有重要意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2016年1月至2017年1月期間在本院就醫(yī)并行宮頸HPV篩查的女性患者，共8 071例，年齡16～77歲，平均(34.00±9.75)歲。按不同年齡分為<20歲，20～34歲、35～49歲、≥50歲共4個(gè)年齡段。

1.2 儀器與試劑 杭州晶格科學(xué)儀器有限公司提供PCR擴(kuò)增儀Hema 960。深圳港龍生物技術(shù)有限公司提供人乳頭瘤病毒(HPV)分型試劑盒(基因芯片法)以及檢測閱讀系統(tǒng)(HPV-GenoCam-9600)。

1.3 方法 采用基因芯片法，利用微量點(diǎn)樣技術(shù)，嚴(yán)格按說明書操作，將26種HPV型(包括HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、6、11、40、42、43、44、53、54、55、57、66、67、73)特異性探針點(diǎn)樣于基因芯片基質(zhì)上，制成基因芯片；經(jīng)過對樣本中的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增、雜交和顯色，通過HPV分型基因芯片檢測閱讀系統(tǒng)自動采集圖像并分析和報(bào)告檢測結(jié)果。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用Excel錄入數(shù)據(jù)，運(yùn)用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件，采用2檢驗(yàn)R*2列聯(lián)表的方法比較4個(gè)年齡段人群感染率的差異。亞型單獨(dú)或與其他亞型共同出現(xiàn)的感染率稱為該亞型感染率或多重感染重復(fù)計(jì)算。以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。任意兩組HPV感染情況的比較，采用Bonferroni法進(jìn)行校正，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV感染總體情況及亞型結(jié)果 在8 071例HPV就診女性當(dāng)中，有1 467例感染HPV，感染率為18.18%，其中單一亞型感染有1 086例，感染率為13.46%；多重感染有381例，感染率為4.72%。26種亞型除HPV57型沒有被檢測出外，其余亞型均能檢測。感染率居前5位的有高危型HPV16(2.96%)、HPV52(2.17%)、HPV58(2.14%)、HPV51(1.52%)以及低危型HPV6(1.26%)。

2.2 不同年齡段HPV感染及亞型分析 <20歲組HPV感染率為45.83%，感染亞型居前5位的是HPV6、HPV16、HPV58、HPV51、HPV18；20～34歲組HPV感染率為20.46%，感染亞型居前5位的是HPV16、HPV58、HPV52、HPV6、HPV51；35～49歲組感染率為14.98%，感染亞型居前5位的是HPV16、HPV52、HPV58、HPV68、HPV51；≥50歲組感染率為17.59%，感染亞型居前5位的是HPV58、HPV52、HPV16、HPV54、HPV53。HPV總感染率在20歲以下最高，形成第1個(gè)高峰，隨之逐漸降低，在35～49歲達(dá)最低，在50歲以上有所抬高(圖1)。≥50歲組與20～34歲組和35～49歲組間的HPV總感染率、高危型及低危型的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),其余兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

2.3 高危及低危HPV感染情況 高危亞型感染患者共1 442例，感染率為17.87%，其中單一感染865例，多重感染586例；低危亞型感染401例，感染率為4.97%，其中單一感染221例，多重感染180例；高低亞型混合感染145例，感染率為1.80%，在20～34歲組感染例數(shù)最多。見表2。

4個(gè)年齡組中，高危亞型感染率最高的是<20歲組(26.39%)，其余3組感染率分別為14.40%、12.29%、13.68%，呈單一峰分布(圖2)?！?0歲與20～34歲、35～49歲間的高危HPV感染率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)之外，其余兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表3。低危亞型感染率最高的是<20歲組(9.72%)，其余3組感染率無明顯變化(圖3)，≥50歲與20～34歲、35～49歲間的低危HPV感染率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，其余兩兩比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見表4。

圖1 各年齡段HPV總感染情況

圖2 各年齡段高危型HPV感染情況

圖3各年齡段低危型HPV感染情況

表1 不同年齡段高危型HPV感染分布情況 例

表2 不同年齡段低危型HPV感染分布情況 例

3 討論

深圳市羅湖區(qū)人民醫(yī)院是三級甲等醫(yī)院，毗鄰香港，地處羅湖商業(yè)鬧市區(qū)，就診人群除了戶籍常住居民，還有大量外來流動人口。本文結(jié)果顯示，醫(yī)院就診女性HPV感染率為18.18%，高于劉秀卿等[6]統(tǒng)計(jì)深圳市女性HPV感染率(12.88%)，與江衛(wèi)紅等[7]、朱巖等[8]深圳地區(qū)HPV總感染率18.35%、20.76%相接近，推測感染差異可能與收集病例和標(biāo)本例數(shù)有關(guān)。本文結(jié)果表明深圳地區(qū)女性HPV總感染率與廣東粵西地區(qū)(18.77%)[9]、佛山地區(qū)(20.696%)[10]結(jié)果相符，與毗鄰的海南地區(qū)(19.38%)[11]也比較相近，但卻遠(yuǎn)低于上海地區(qū)(33.652%)[12]、陜西地區(qū)(32.14%)[13]和湖北地區(qū)(27.86%)[14]。提示女性宮頸HPV感染具有地域差異，可能受到當(dāng)?shù)厥軝z人群以及經(jīng)濟(jì)衛(wèi)生條件影響，表明對某地區(qū)女性人群進(jìn)行HPV感染篩查和分型檢測，了解HPV感染情況和亞型的分布特點(diǎn)，對該地區(qū)宮頸癌的早期診斷和預(yù)防有重要的臨床意義。

表3 不同年齡段混合型、低危和高危型HPV感染情況 例

表4 各年齡段之間HPV感染率的比較

研究表明HPV感染與年齡有著密切關(guān)系[15]。Xue等[16]研究顯示，不同年齡段高危型HPV感染率呈U型曲線，<20歲和≥60歲HPV感染率較高。本研究中HPV感染率隨年齡變化呈近似“U”形分布，在<20歲是感染高峰期，排除本組數(shù)據(jù)收集過少原因外，可能是因?yàn)槟贻p女性宮頸發(fā)育不成熟，自身防御功能較差，導(dǎo)致感染概率增高。隨后，在20～34歲與35～49歲HPV感染率下降，推測是因?yàn)榕詫m頸發(fā)育成熟，且大部分HPV感染是一過性感染，大多可通過機(jī)體免疫應(yīng)答而被清除，少數(shù)HPV感染發(fā)展成持續(xù)性感染[16]。50歲以上女性HPV感染率逐漸上升，再形成另一個(gè)高峰期。主要是因?yàn)榻^經(jīng)期激素發(fā)生明顯波動，引起機(jī)體生理和免疫系統(tǒng)功能紊亂，對病毒的清除能力和抑制作用減弱，容易形成病毒的持續(xù)性感染或處于潛伏期的HPV被激活[17]。提示本院應(yīng)該加強(qiáng)<20歲和≥50歲女性HPV篩查力度，力求降低宮頸病變風(fēng)險(xiǎn)。

本研究結(jié)果表明，高危HPV16、HPV18、HPV33、HPV35、HPV39、HPV45、HPV51、HPV52、HPV53、HPV56、HPV58、HPV66、HPV67、HPV68均以<20歲組感染率最高，與李軍等[13]、王京偉等[14]報(bào)道的<20歲組HPV高危亞型感染率最低不同，可能與該年齡段標(biāo)本數(shù)量少有關(guān)。其余高危型HPV31、HPV59、HPV73感染發(fā)生率極低(<0.8%)。低危亞型HPV6、HPV11、HPV40、HPV43、HPV55也以<20歲組感染率最高，低危HPV54以20～34歲組感染率最高，低危HPV42、HPV44感染發(fā)生率極低(<0.42%)，而低危HPV57未被檢測出。各年齡段高危型HPV感染程度均比低危型HPV感染的嚴(yán)重。王洪珍等[18]報(bào)道，宮頸病變的嚴(yán)重程度與多重感染和HPV型別數(shù)目的多少無關(guān)，而是依賴于感染HPV亞型的致病能力。因此，本院應(yīng)重視各年齡段高危型HPV感染人群，特別是細(xì)胞學(xué)篩查無異常而HPV高危型HPV16、HPV18陽性的患者，應(yīng)立即進(jìn)行陰道鏡檢查。其余高危型HPV陽性，則定期重復(fù)進(jìn)行細(xì)胞學(xué)和HPV分型檢測。

綜上所述，深圳市羅湖區(qū)人民醫(yī)院就診女性HPV感染趨向低齡化，以單一亞型感染、高危型感染為主，感染最常見亞型為高危型HPV16、HPV52、HPV58和低危型HPV6。該院應(yīng)加大對育齡婦女預(yù)防HPV感染的健康教育和宣傳，加強(qiáng)對高風(fēng)險(xiǎn)感染人群(<20歲和≥50歲)進(jìn)行常見高危型HPV16、HPV52、HPV58、HPV51等的篩查和監(jiān)測，加強(qiáng)低齡組疫苗的應(yīng)用。目前關(guān)于HPV多重感染組合的規(guī)律尚未見明確報(bào)道，其臨床價(jià)值需進(jìn)一步研究探索。