白 晶 劉海順 萬(wàn)鴻飛 劉向祎*

原發(fā)性肝細(xì)胞癌(hepatocellular carcinoma，HCC)是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，發(fā)病率和病死率均居世界惡性腫瘤的前列[1-2]。我國(guó)HCC病死率占惡性腫瘤的18.8%，其5年生存率僅為5%～9%[3-4]。乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)和丙型肝炎病毒(hepatitis C virus，HCV)感染是HCC的主要因素，我國(guó)以HBV感染引起的HBV相關(guān)性肝癌最為常見(jiàn)，約有40%的HBV感染患者會(huì)發(fā)展成為肝硬化和HCC，原發(fā)性肝癌中乙型肝炎相關(guān)肝癌占90%[5-6]。臨床中早發(fā)現(xiàn)、早診斷及早治療是有效控制乙型肝炎相關(guān)HCC的關(guān)鍵，但影像和病理檢查所需費(fèi)用很高，不能對(duì)高危人群進(jìn)行很好的監(jiān)測(cè)，因此高靈敏度和特異度的腫瘤標(biāo)志物對(duì)識(shí)別HCC非常必要，迫切需要更精確、更有效的生物標(biāo)志物。

甲胎蛋白(alpha-fetoprotein，AFP)對(duì)HCC診斷的其靈敏度為40%～65%，當(dāng)肝癌病灶很小，AFP檢測(cè)的假陰性率較高[7]。脫-γ-羧基凝血酶原(des-γcarboxy-prothrombin，DCP)又稱維生素K缺乏或拮抗誘導(dǎo)的異常蛋白(protein induced by vitamin K absence or antagonist-Ⅱ，PIVKA-Ⅱ)， HCC合成的無(wú)凝血活性的異常凝血酶原，是判斷HCC進(jìn)展程度與預(yù)后的重要指標(biāo)。AFP、DCP作為常規(guī)血清腫瘤標(biāo)志物，經(jīng)常出現(xiàn)假陽(yáng)性，并且缺乏足夠的敏感性及特異性[8]。高爾基體蛋白73(Golgi protein 73，GP73)是肝臟膽管上皮細(xì)胞表達(dá)的特異性膜蛋白，在HBV和HCV感染相關(guān)的HCC患者血清中濃度顯著升高，但GP73診斷HCC的效能以及GP73在良、惡性肝病中的表達(dá)高低存在爭(zhēng)議，GP73對(duì)HCC的診斷價(jià)值并不優(yōu)于AFP[9]?；诖耍狙芯客ㄟ^(guò)檢測(cè)AFP、GP73及DCP在HBV相關(guān)性HCC患者血清中的表達(dá)水平，探討聯(lián)合檢測(cè)上述指標(biāo)在HBV相關(guān)性HCC中的診斷價(jià)值，為HBV相關(guān)性HCC的篩查與診斷提供參考依據(jù)。

本研究創(chuàng)新性在于通過(guò)運(yùn)用支持向量機(jī)(support vector machine，SVM)數(shù)學(xué)模型，建立HBV相關(guān)性HCC篩查診斷模型，以提高分類的正確率，為HBV相關(guān)性HCC的早期診斷提供新的方法和依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年3月至2018年1月就診于首都醫(yī)科大學(xué)附屬北京同仁醫(yī)院的177例HBV患者，其中男性93例，女性84例；年齡19～70歲，平均年齡(50.6±11.7)歲。根據(jù)患者疾病情況將其分為HBV相關(guān)性HCC組(57例)、HBV相關(guān)性肝硬化組(52例)及慢性乙型肝炎組(68例)；同期選擇74名健康體檢者將其納入健康對(duì)照組，其中男性35名，女性39名；年齡20～65歲，平均年齡(45.22±10.09)歲。分別檢測(cè)4組受試者的血清DCP、AFP及GP73水平。4組基本資料的比較無(wú)差異，具有可比性。所有受試者簽署知情同意書。

1.2 納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

1.2.1 納入標(biāo)準(zhǔn)

(1)HBV相關(guān)性HCC組:①符合國(guó)家原衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)醫(yī)改醫(yī)管局《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范》[10](2017年版)，經(jīng)臨床表現(xiàn)、病理結(jié)果、影像學(xué)等其他相關(guān)檢查綜合診斷為原發(fā)性肝癌者；②存在慢性HBV感染者；③均未行手術(shù)、射頻消融、介入、放化療等抗腫瘤行為者。

(2)HBV相關(guān)性肝硬化組:符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)《慢性乙型肝炎防治指南》[11](2015年更新版)，臨床表現(xiàn)、生化、組織病理學(xué)檢查或肝臟超聲等影像學(xué)檢查綜合診斷為肝硬化者。

(3)慢性乙型肝炎組:符合中華醫(yī)學(xué)會(huì)肝病學(xué)分會(huì)2015年更新版《慢性乙型肝炎防治指南》[11](2015年更新版)，慢性乙型肝炎診斷標(biāo)準(zhǔn)，但肝組織病理學(xué)檢查或癥狀、體征、化驗(yàn)及影像學(xué)檢查無(wú)肝硬化證據(jù)者。

(4)健康對(duì)照組:年齡≥18周歲，體檢未發(fā)現(xiàn)明顯疾病者。

1.2.2 排除標(biāo)準(zhǔn)

排除標(biāo)準(zhǔn):①曾服用維生素K制劑或維生素K拮抗劑如雙香豆素、華法林等藥物者；②合并其他臟器原發(fā)惡性腫瘤者或轉(zhuǎn)移性肝癌者；③存在HCV等其他肝炎病毒感染、酒精性肝病、非酒精性脂肪肝、自身免疫性肝病、藥物性肝損害、遺傳代謝性疾病、肝血吸蟲病等其他原因引起的肝臟損害者；④妊娠期或哺乳期婦女等情況。

1.3 樣本采集

所有受試者于清晨空腹禁水狀態(tài)下用一次性采血器抽取肘靜脈血約3～5 m1，置入帶分離膠的真空采血管，室溫靜止30 min，以3500 r／min離心15 min，分離血清用于腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)；取上清至2 ml的Eppendorf管中，置入-80 ℃保存?zhèn)溆?，樣本注意避免污染和反?fù)凍融。

1.4 儀器與試劑

采用Cobas e601型電化學(xué)發(fā)光分析儀(瑞士羅氏公司)；肝癌血清學(xué)標(biāo)志物AFP、DCP和GP73均采用電化學(xué)發(fā)光方法檢測(cè)，AFP采用羅氏試劑，DCP、GP73采用北京熱景生物技術(shù)有限公司試劑。

1.5 SVM模型的建立

鑒于ROC曲線對(duì)HBV相關(guān)性HCC組、乙型肝炎組和HBV相關(guān)性肝硬化組分類的正確率不是很高，本研究采用SVM數(shù)學(xué)模型進(jìn)行有效的分類，選取較為常用的徑向基核函數(shù)其計(jì)算為公式1:

式中γ為核參數(shù)，在尋求最優(yōu)超平面時(shí)會(huì)用到懲罰參數(shù)C，2個(gè)參數(shù)均為待優(yōu)化參數(shù)，決定了模型的效能及泛化能力[12]。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。符合正態(tài)分布的計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x-±s)表示，非正態(tài)分布的計(jì)量資料用中位數(shù)(M)和四分位數(shù)間距(Q25，Q75)表示，計(jì)數(shù)資料用率(%)表示。多個(gè)樣本均數(shù)的比較先進(jìn)行正態(tài)性及方差齊性檢驗(yàn)，對(duì)于符合上述條件者，采用方差分析進(jìn)行比較，反之采用多個(gè)獨(dú)立樣本的非參數(shù)檢驗(yàn)(Kruskal-Wallis H test)比較，組間兩兩比較采用兩獨(dú)立樣本非參數(shù)檢驗(yàn)(Mann-Whitney U test)；繪制受試者工作特征 (receiver operator characteristic，ROC)曲線，確定最佳臨界值，采用Z檢驗(yàn)比較各指標(biāo)ROC曲線下面積(area under the curve，AUC)的差異，按α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血清DCP、GP73和AFP水平的比較

將各指標(biāo)數(shù)據(jù)取對(duì)數(shù)，通過(guò)Shapiro-Wilk正態(tài)檢驗(yàn)，DCP與AFP不滿足正態(tài)分布，故對(duì)于DCP、GP73及AFP的含量，各組間采用Kruskal-Wallis H檢驗(yàn)(H=104.27，H=79.45，H=45.681；P＜0.001)，兩兩組間采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)；而GP73的檢測(cè)數(shù)據(jù)滿足正態(tài)分布，組間采用t檢驗(yàn)，見(jiàn)表1。

(1)血清DCP水平:健康對(duì)照組與乙型肝炎組、HBV相關(guān)性肝硬化組及HBV相關(guān)性HCC組的DCP含量差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=174.5，U=245，U=304.5；P＜0.05)；乙型肝炎組與HBV相關(guān)性HCC組的DCP含量差異顯著，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=210.5，P＜0.05)；HBV相關(guān)性肝硬化組與HBV相關(guān)性HCC組的DCP含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=255，P＞0.399)。

(2)血清GP73水平:健康對(duì)照組與HBV相關(guān)性肝硬化組、HBV相關(guān)性組HCC的GP73比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-14.579，t=-12.007；P＜0.05)；乙型肝炎組與HBV相關(guān)性肝硬化組、HBV相關(guān)性HCC組GP73含量有顯著性差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-6.847，t=-6.524；P＜0.001)；HBV相關(guān)性肝硬化組與HBV相關(guān)性HCC組的GP73含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=0.776，P＞0.05)。

(3)血清AFP水平；健康對(duì)照組與HBV相關(guān)性肝硬化組、HBV相關(guān)性HCC組的AFP含量有顯著性差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=189.5，U=345；P＜0.05)；乙型肝炎組與HBV相關(guān)性肝硬化組、HBV相關(guān)性HCC組的AFP含量有顯著性差異，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=163，U=177；P＜0.05)；HBV相關(guān)性肝硬化組與HBV相關(guān)性HCC組的AFP含量差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=273， P＞0.629)。

2.2 血清DCP、GP73及AFP聯(lián)合檢測(cè)對(duì)HBV相關(guān)性HCC診斷價(jià)值

(1)HBV相關(guān)性HCC組與健康對(duì)照組組血清DCP、GP73及AFP含量的ROC曲線以及各項(xiàng)指標(biāo)的曲線下面積(AUC)和95%置信區(qū)間見(jiàn)圖1。

圖1顯示:①AUCDCP=0.848，95%CI(0.741～0.955)，最佳臨界值為6.705 ng/ml，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為77.8%、97.3%、91.3%和92.3%；②AUCGP73=0.984，95%CI(0.965～1.000)，最佳臨界值為92.6 ng/ml，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為92.6%、95.9%、89.3%和97.3%；③AUCAFP=0.827，95%CI(0.728～0.927)，以20 ng/ml為標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為66.7%、89.2%、69.2%和88%。對(duì)3項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行Logistic回歸分析獲得聯(lián)合預(yù)測(cè)因子，繪制3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷的ROC曲線，得出AUCDCP+GP73+AFP=0.997，95%CI(0.4930～1.000)，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為98.9%、98.6%、96.4%和98.6%。3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷要好于單獨(dú)診斷，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=11.2，P＜0.001)。

表1 血清DCP、AFP及GP73檢測(cè)結(jié)果(M Q25,Q75)

圖1 HBV相關(guān)性HCC組與健康對(duì)照組DCP、GP73及AFP含量的ROC曲線

(2)HBV相關(guān)性HCC組與HBV相關(guān)性肝硬化組血清DCP、GP73及AFP含量分別繪制3項(xiàng)指標(biāo)診斷HBV相關(guān)性肝癌的ROC曲線，得出各項(xiàng)指標(biāo)的AUC及95%置信區(qū)間，見(jiàn)圖2。

圖2 HBV相關(guān)性HCC組與HBV相關(guān)性肝硬化組DCP、GP73及AFP含量的ROC曲線

圖2 顯示:①AUCDCP=0.57，95%CI(0.403～0.739)，最佳臨界值為11.219 ng/ml，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為70.4%、59.1%、67.9%和61.9%；②AUCGP73=0.459，95%CI(0.294～0.623)，最佳臨界值為168.208 ng/ml，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為51.9%、59.1%、60.9%和50%；③AUCAFP=0.540，95%CI(0.374～0.707)，以20 ng/ml為標(biāo)準(zhǔn)時(shí)，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為48.1%、77.3%、72.2%和54.8%。對(duì)3項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行Logistic回歸分析獲得聯(lián)合預(yù)測(cè)因子，繪制3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷的ROC曲線，得出AUCDCP+GP73+AFP=0.650，95%CI(0.493～0.807)，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為66.7%、68.2%、72%和62.5%，3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷要好于單獨(dú)診斷，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=9.8，P＜0.001)。但聯(lián)合診斷仍不能很好地區(qū)分HBV相關(guān)性HCC與HBV相關(guān)性肝硬化。

(3)HBV相關(guān)性HCC組與乙型肝炎組血清DCP、GP73及AFP含量分別繪制3項(xiàng)指標(biāo)診斷HBV相關(guān)性肝癌的ROC曲線，得出各項(xiàng)指標(biāo)的AUC及95%置信區(qū)間，見(jiàn)圖3。

圖3 HBV相關(guān)性HCC 組與乙型肝炎組DCP、GP73及AFP含量的ROC曲線

圖3 顯示:①AUCDCP=0.711，95%CI(0.556～0.867)，最佳臨界值為13.952 ng/ml，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為66.7%、88.9%、68.1%和72.7%；②AUCGP73=0.919，95%CI(0.846～0.992)，最佳臨界值為84.792ng/ml，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為92.6%、81.5%、83.3%和91.7%；③AUCAFP=0.757，95%CI(0.625～0.890)，最佳臨界值為0.575 ng/ml，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為88.9%、64.3%、68.6%和84.2%。對(duì)3項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行Logistic回歸分析獲得聯(lián)合預(yù)測(cè)因子，繪制3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷的ROC曲線，得出AUCDCP+GP73+AFP=0.919，95%CI(0.846～0.992)，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為97.5%、74.1%、79.4%和98.6%，3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷要好于單獨(dú)診斷，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=16.2，P＜0.001)。

(4)HBV相關(guān)性HCC組與乙型肝炎組+HBV相關(guān)性肝硬化組患者血清DCP、GP73及AFP含量分別繪制3項(xiàng)指標(biāo)診斷HBV相關(guān)性肝癌的ROC曲線，得出各項(xiàng)指標(biāo)的AUC及95%置信區(qū)間，見(jiàn)圖4。

表2 SVM模型建立及效果評(píng)價(jià)(%)

圖4 HBV相關(guān)性HCC 組與乙型肝炎組+HBV相關(guān)性肝硬化組DCP、GP73及AFP含量的ROC曲線

圖4 顯示:①AUCDCP=0.648，95%CI(0.502～0.794)，最佳臨界值為13.951 ng/ml，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為66.7%、75.5%、60%和80.4%；②AUCGP73=0.712，95%CI(0.598～0.827)，最佳臨界值為84.792 ng/ml，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為92.6%、46.9%、49%和92%；③AUCAFP=0.660， 95%CI(0.535～0.785)，最佳臨界值為0.383 ng/ml，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為98.5%、46.5%、42.9%和99.7%。對(duì)3項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行Logistic回歸分析獲得聯(lián)合預(yù)測(cè)因子，繪制3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷的ROC曲線，得出AUCDCP+GP73+AFP=0.728，95%CI(0.615～0.814)， 其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為98.2%、52.8%、47.4%和97.6%；3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合診斷要好于單獨(dú)診斷，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(U=17.2，P＜0.001)；但單獨(dú)和聯(lián)合診斷其特異性和陽(yáng)性預(yù)測(cè)率均不高。

2.3 SVM模型效果評(píng)價(jià)

采用網(wǎng)格搜尋結(jié)合5折交叉驗(yàn)證的方法確定SVM數(shù)學(xué)模型γ和C的2個(gè)參數(shù)。SVM在對(duì)于HBV相關(guān)性HCC組與HBV相關(guān)性肝硬化組、乙型肝炎組和健康對(duì)照組具有較好的診斷效果，在診斷中HBV相關(guān)性HCC組與健康對(duì)照組的特異度和敏感度均達(dá)到了100%；診斷HBV相關(guān)性HCC與HBV相關(guān)性肝硬化時(shí)，特異度和靈敏度達(dá)到了90.91%和96.3%(見(jiàn)表2)。

3 討論

HBV感染是我國(guó)肝癌發(fā)生發(fā)展的重要原因，肝癌的5年生存率為40%，早期行肝癌切除術(shù)可將生存率提升至60～70%[13]。病理學(xué)活檢是診斷肝癌的金標(biāo)準(zhǔn)，但因其為侵入性檢查，存在穿刺的難度及風(fēng)險(xiǎn)。影像學(xué)檢查對(duì)小肝細(xì)胞癌的檢出能力有限。血清學(xué)生物標(biāo)志物具有無(wú)創(chuàng)性、簡(jiǎn)便性、客觀性等特點(diǎn)，多用于肝癌的早期篩查與診斷以及肝癌的監(jiān)測(cè)管理。

AFP是應(yīng)用最為廣泛的HCC血清學(xué)指標(biāo)，每6個(gè)月進(jìn)行血清AFP的檢測(cè)和腹部超聲的檢查已普遍成為肝癌高危人群的篩查辦法[14]。由于AFP在肝癌的篩查和診斷中存在靈敏度和特異度低的問(wèn)題，近年歐洲肝臟研究學(xué)會(huì)和美國(guó)肝病研究學(xué)會(huì)在其更新的診療指南中不再將AFP作為肝癌的篩查與診斷標(biāo)準(zhǔn)[15-16]。本研究發(fā)現(xiàn)，HBV相關(guān)性HCC組患者血清AFP水平顯著高于健康對(duì)照組，最佳臨界值為6.705 ng/ml，此時(shí)的AUC=0.827，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為66.7%、89.2%、69.2%和88%，與文獻(xiàn)報(bào)道的研究結(jié)果相近[17]。本研究中AFP診斷靈敏度僅為66.7%，近40%的HCC患者可能被漏診，因此仍需警惕AFP陰性的高危人群發(fā)生HCC的風(fēng)險(xiǎn)。HBV相關(guān)性肝硬化組患者血清AFP也可以升高，與HBV相關(guān)性HCC組之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與納入樣本病例疾病程度有關(guān)，AFP的血清水平在不同病因引起的HCC中是否存在差異還需進(jìn)一步探討。

DCP其對(duì)HCC的診斷價(jià)值已受到了國(guó)際上的肯定，日本已將血清DCP的檢測(cè)納入肝癌高危人群的篩查管理項(xiàng)目[18]。本研究發(fā)現(xiàn)，HBV相關(guān)性HCC組患者血清DCP水平高于健康對(duì)照組，且差異顯著，當(dāng)最佳臨界值為6.705 nɡ/ml時(shí)，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為77.8%、97.3%、91.3%和92.3%，血清DCP診斷HBV相關(guān)性HCC的特異度較高，有助于HBV相關(guān)性HCC的篩查。同時(shí)，血清DCP的陰性預(yù)測(cè)值較高，對(duì)HCC的排除具有一定的臨床價(jià)值，與文獻(xiàn)相關(guān)報(bào)道一致[19]。

GP73在正常肝組織中，且主要在膽管上皮細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，在HBV和HCV感染相關(guān)的HCC患者血清中濃度顯著升高。本研究發(fā)現(xiàn)，HBV相關(guān)性HCC患者血清GP73水平高于健康對(duì)照組，且差異顯著，當(dāng)最佳臨界值為84.310 ng/ml時(shí)，其靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為92.6%、95.9%、89.3%和97.3%。而HBV相關(guān)性肝硬化組與HBV相關(guān)性HCC組相比靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為51.%、59.1%、60.9%和50%，與Mao等[20]報(bào)道一致，提示血清GP73檢測(cè)難以鑒別肝硬化和肝癌，但血清GP73可在一定程度上作為反映肝纖維化嚴(yán)重程度的有效血清學(xué)診斷指標(biāo)。

本研究通過(guò)繪制ROC曲線，得出血清DCP、GP73及AFP的3項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)的AUC，發(fā)現(xiàn)HBV相關(guān)性HCC與健康對(duì)照組、慢性乙型肝炎組比較AUC均為0.7～0.9，表明3項(xiàng)指標(biāo)對(duì)鑒別HBV相關(guān)性HCC組與健康對(duì)照組和慢性乙型肝炎組的診斷均有一定的準(zhǔn)確性。但3項(xiàng)指標(biāo)對(duì)鑒別HBV相關(guān)性HCC與肝硬化的診斷效能不高，考慮臨床中HBV相關(guān)性HCC可同時(shí)伴有肝硬化的存在。

單項(xiàng)檢測(cè)血清學(xué)指標(biāo)仍存在敏感性低的缺陷，需要多項(xiàng)血清學(xué)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)來(lái)提高診斷率。本研究對(duì)3項(xiàng)指標(biāo)進(jìn)行聯(lián)合檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，血清DCP、GP73及AFP聯(lián)合檢測(cè)的靈敏度、特異度、陽(yáng)性預(yù)測(cè)值和陰性預(yù)測(cè)值分別為98.9%、98.6%、96.4%和98.6%，表明聯(lián)合檢測(cè)3項(xiàng)指標(biāo)極大提高了HBV相關(guān)性HCC診斷的敏感性，可提高HBV相關(guān)性HCC患者的檢出率，減少了漏診率，有助于HCC的早期診斷。聯(lián)合檢測(cè)的陰性預(yù)測(cè)值高達(dá)98.6%，對(duì)HCC的排除診斷有很大的參考價(jià)值。然而，不可忽略的是3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測(cè)靈敏度增高的同時(shí)，特異度也隨之下降，誤診率可能隨之增加，仍需結(jié)合患者一般情況、臨床癥狀、實(shí)驗(yàn)室檢查結(jié)果、病理或影像學(xué)資料進(jìn)行綜合判斷，爭(zhēng)取做到在提高檢出率的同時(shí)，最大限度地降低誤診率。

由于DCP、GP73及AFP3項(xiàng)指標(biāo)對(duì)鑒別HBV相關(guān)性HCC與肝硬化的診斷效能不高，本研究創(chuàng)新采用了SVM模型在對(duì)于HBV相關(guān)性HCC組與HBV相關(guān)性肝硬化組和乙型肝炎組均具有較好的診斷效果。SVM是一種基于統(tǒng)計(jì)學(xué)習(xí)理論和結(jié)構(gòu)風(fēng)險(xiǎn)最小化原則的學(xué)習(xí)方法，是一種多元統(tǒng)計(jì)分析方法，在多變量分析與識(shí)別等方面有著廣泛的應(yīng)用[21-23]。其基本原理是將原始測(cè)試數(shù)據(jù)映射至更高維的空間，再通過(guò)尋找合適的超平面解決相應(yīng)的分類問(wèn)題[24]。在更多變量的空間，通過(guò)使用核函數(shù)將原有的數(shù)據(jù)映射到高維空間，需要使用相應(yīng)的核函數(shù)完成。在建立該模型時(shí)，應(yīng)當(dāng)從原始數(shù)據(jù)集中選取適當(dāng)?shù)臄?shù)據(jù)作為訓(xùn)練集訓(xùn)練該模型，而后對(duì)其余的數(shù)據(jù)(測(cè)試集)進(jìn)行相關(guān)測(cè)試，得出相應(yīng)的診斷與預(yù)測(cè)結(jié)果。常用的劃分訓(xùn)練集與測(cè)試試集的方法有隨機(jī)法[25]和Kennard-stone(K-S)法[26]。隨機(jī)法選取的數(shù)據(jù)隨機(jī)性較大，所選樣品可能不具有代表性，模型預(yù)測(cè)結(jié)果不穩(wěn)定。KS法主要是根據(jù)數(shù)據(jù)間的歐氏距離來(lái)選取，選取的訓(xùn)練比較具有代表性。SVM模型在HBV相關(guān)性HCC組與健康對(duì)照組應(yīng)用時(shí)，特異度和敏感度均達(dá)到了98.6%；診斷HBV相關(guān)性HCC與HBV相關(guān)性肝硬化時(shí)，特異度和敏感度分別達(dá)到了90.91%和96.3%，這兩次SVM的診斷效果均優(yōu)于腫瘤標(biāo)志物的診斷效果。因此，SVM模型可以考慮用于不同階段肝病的診斷與識(shí)別。

本研究樣本量偏少，未來(lái)可進(jìn)行更大樣本數(shù)量的前瞻性研究，進(jìn)一步減少其他因素影響產(chǎn)生的偏倚。通過(guò)分析獲得的結(jié)論尚需要大樣本、多中心及長(zhǎng)時(shí)間的隨訪研究進(jìn)行證實(shí)。本研究建立的診斷模型為提高HCC早期診斷提供了思路和方法，但僅僅依靠上述模型對(duì)HCC進(jìn)行早期診斷顯然還不理想，結(jié)合相應(yīng)的影像學(xué)指標(biāo)或許可以進(jìn)一步提高早期肝癌的檢出率。