張 立，普布次仁，扎 西，平措班旦，旦增曲珍，馬金英，次仁曲珍

（西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所，西藏拉薩 850009）

近年來，因不了解草場最大載畜量，盲目追加養(yǎng)畜量草場超載，導(dǎo)致我國天然草地退化嚴(yán)重，草原生態(tài)系統(tǒng)不斷地惡化，草地沙化加劇。對于我國廣大牧區(qū)而言，通過測定家畜放牧采食量，根據(jù)草產(chǎn)量確定天然草地的最大載畜量，從而更好的合理利用草地資源非常重要。

達(dá)孜縣，位于西藏自治區(qū)中南部、拉薩河中游，距拉薩市70 km2。全縣總面積1373 km2，耕地面積4567 hm2。 地處北緯29°45′～30°30′，東經(jīng)90°20′～91°56′，全縣平均海拔 4100 m，河谷最低海拔 3730 m。該區(qū)屬于高原溫帶半干旱季風(fēng)氣候，空氣稀薄，氣溫低，日溫差大，冬春干燥且多風(fēng)，年無霜期130 d左右。全年日照時數(shù)3007.7 h，年平均氣溫7.5℃，年較差小、日較差大，是一個有利的氣候條件。年降水量444 mm，80%～90%集中在夏季，多夜雨；年平均相對濕度大于50%。草地類型以菊科植物為主，其次為禾本科、莎草科、毛莨科、豆科、玄參科、石竹科、薔薇科等。而且該地區(qū)草地存在“沙化、堿化、退化”及超載放牧等問題。

飽和烷烴法測定放牧家畜食性食量始于20世紀(jì)80年代末，該方法是利用植物表皮蠟質(zhì)層中普遍存在的飽和性碳?xì)浠衔锘蚍Q飽和鏈烷烴作為內(nèi)源標(biāo)記物來測定放牧家畜的食性食量[1-2]。通過投喂家畜人工合成的已知濃度的與奇數(shù)鏈烷相鄰的偶數(shù)鏈烷膠囊，利用兩者回收率相近的特點可以消除不完全回收的缺點，從而準(zhǔn)確地測定家畜采食量[3]。截止目前尚未看到相關(guān)專家學(xué)者關(guān)于達(dá)孜縣枯草期放牧綿羊的采食量的報道，本研究采用飽和烷烴法測定達(dá)孜縣枯草期放牧綿羊的采食量，旨在為該縣合理地利用草地資源提供參考依據(jù)，并為藏區(qū)內(nèi)其他草地的合理利用提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 試驗動物、時間與地點

選擇10只體重相近（40.00±4.00）kg、體況良好的3～4歲放牧能繁母綿羊作為試驗動物。試驗時間為2018年12月15-27日的枯草期。試驗地為西藏自治區(qū)農(nóng)牧科學(xué)院拉薩市畜獸醫(yī)研究牧所的曲尼帕綜合試驗基地的天然草場。

1.2 試驗方法與內(nèi)容

采用飽和烷烴法通過測定草樣中鏈烷烴含量與糞中鏈烷烴含量，計算出羊只每天干物質(zhì)采食量。

試驗羊全天放牧飼養(yǎng)，無補(bǔ)飼，出牧前和歸牧后設(shè)水槽自由飲水2次。從預(yù)飼期開始第1天起，每天分別于早晨出牧前30 min每只羊投喂飽和鏈烷烴C32藥丸1枚（釋放速率48 mg/d，由新疆塔里木大學(xué)提供），直至試驗結(jié)束。預(yù)飼期7 d，試驗期5 d。

1.3 樣品的處理

1.3.1 牧草樣本的采集與處理 在試驗地建立網(wǎng)圍欄禁牧。采用星點布局法在樣地內(nèi)確定測產(chǎn)樣方，樣地內(nèi)選擇5個樣方，面積為1m×1m，于2017年12月枯草期進(jìn)行草場采樣，以模仿家畜采食高度為留茬依據(jù)，將樣方里的牧草全部收割留茬2～3 cm。將收集的牧草裝在草樣袋中，稱重，混勻，在-20℃條件下保存。分析前，60℃烘干，粉碎過1mm篩，密封保存，以備測定。

1.3.2 糞樣的采集與處理 10只3～4歲健康母綿羊，每日采集2次糞樣，早晨出牧之前采集1次，放牧結(jié)束歸牧后采集第2次，將收集的糞樣混合均勻，按照排糞量1/10的比例取樣，-20℃封凍保存，以備測定分析。分析前，60℃烘干，粉碎過1 mm篩，密封保存。

1.4 鏈烷烴測定方法

參考Dove（2006）[4]提取樣品鏈烷烴，采用島津GC-9A氣相色譜儀測定，氣相色譜柱為SGEBP1柱型。規(guī)格是：30 m×0.53 mm，膜厚度為0.5μm；監(jiān)測器是：FID（氫火焰離子監(jiān)測器）；載氣為氮?dú)?，流?0 mL/min，純度為99.99%；燃?xì)鉃闅錃?，流速?5 mL/min，是由雙蒸水經(jīng)過氫氣發(fā)生器生成，純度為99.99%；助燃?xì)猓嚎諝?，?jīng)空氣壓縮機(jī)壓縮，流速為（350 mL/min）；微量進(jìn)樣器：規(guī)格：5 m；進(jìn)樣量：2 ul；溫度：inj（進(jìn)樣口）：280 ℃；檢測器：340 ℃；col（柱溫）：280 ℃。

1.5 放牧采食量計算公式

式中：DMI：為干物質(zhì)采食量 D32：為食入偶數(shù)鏈烷C32緩釋丸每日的釋放速率；計算中取D32=48.5；Fi：為糞中天然奇數(shù)鏈烷C31的濃度；Fj：為糞中偶數(shù)鏈烷C32的濃度；Hi：為牧草中天然奇數(shù)鏈烷C31的濃度；Hj：為牧草中偶數(shù)鏈烷C32的濃度。

1.6 統(tǒng)計分析

數(shù)據(jù)使用Excel進(jìn)行初步處理，牧草和糞中鏈烷烴平均含量用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析，多重比較采用Duncan’s法，以P＜0.05作為差異顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 牧草中鏈烷烴含量從表1可以看出，牧草中各鏈烷烴的含量差異很大，其中鏈烷烴C31的平均含量為332.79 mg/kg，鏈烷烴 C32的平均含量為14.46 mg/kg，牧草中 C31與 C32含量差異顯著（P＜0.05），且牧草中鏈烷烴C32的含量極少，說明利用飽和烷烴技術(shù)測定放牧綿羊的食性食量是可行的。牧草中鏈烷烴 C29和 C31最多；其次為 C27、C33和 C34；最少為C36，僅 1.52 mg/kg。

表1 牧草中鏈烷烴含量（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 1 Paraffin content in herbage（Air dry basis） （mg/kg）

2.2 羊糞中鏈烷烴含量從表2可以看出，羊糞中各鏈烷烴的含量差異很大，其中鏈烷烴C31的平均含量為526.72 mg/kg，鏈烷烴C32的平均含量為111.41 mg/kg，羊糞中 C31與 C32含量差異顯著（P＜0.05）。羊糞中鏈烷烴C29和C31最多；其次為C27、C32和C34；最少為 C36，僅1.51 mg/kg。

表2 羊糞中鏈烷烴含量（風(fēng)干基礎(chǔ)）Table 2 Paraffin content in sheep manure（Air dry basis） （mg/kg）

2.3 放牧羊干物質(zhì)采食量由公式可以計算出放牧羊每只每天干物質(zhì)采食量見表3。由表3可以看出，3～4歲放牧母綿羊每天干物質(zhì)采食量從0.7～1.04 kg，平均干物質(zhì)采食量為0.89 kg。干物質(zhì)采食量占羊只體重的百分比從1.75%～2.60%，平均占比2.23%。

表3 放牧綿羊干物質(zhì)采食量Table 3 Drymatter intake of grazing sheep （mg/kg）

3 討 論

目前國內(nèi)外測定放牧羊采食量的方法主要有：模擬采食法、群牧差額法、糞氮指數(shù)法和飽和烷烴法等。雖然模擬采食法簡單易行，但其缺點是精確性差，而且在草地植物種類復(fù)雜多樣的情況下更加難以操作。群牧差額法簡單易行，但僅在草地植被分布比較均勻的情況下結(jié)果較理想，而且不能測定單個家畜的牧草采食量[5-6]。雖然糞氮指數(shù)法可以減少勞動力并避免影響家畜的正常采食行為，但是沒有找到一個適合所有家畜-植物遺傳型組合的通用回歸方程，限制了糞氮指數(shù)法的應(yīng)用[7]。飽和烷烴法是一種特殊的雙指示劑法，是將植物皮層中天然存在的奇數(shù)鏈烷作內(nèi)源指示劑，用商業(yè)上生產(chǎn)的偶數(shù)鏈烷作外源指示劑，二者結(jié)合使用的一種雙指示劑法。Mayes等[8]研究發(fā)現(xiàn)，利用回收率相似的人工合成的飽和偶數(shù)鏈烷烴和植物中自然存在的奇數(shù)鏈烷烴作為內(nèi)外源指示劑，就可以根據(jù)糞中兩者的比例來估測采食量，并可以消除不完全回收的特點，在測定采食量的同時也可以較準(zhǔn)確地測定日糧的消化率。劉忠軍（2001）[9]用 C31和 C35兩種烷烴作為內(nèi)源指示劑所測干物質(zhì)消化率與全收糞法測的結(jié)果無顯著差異，并且5種烷烴測定結(jié)果的平均數(shù)（80.5%）與全收糞法測定的結(jié)果（80.5%）完全相同。說明用兩種烷烴測定結(jié)果的平均數(shù)估測消化率更為準(zhǔn)確，這就為用全收糞法測定日糧消化率有困難的動物提供了可靠的手段。飽和烷烴法測定過程操作簡單，分析工作量小，降低了家畜個體差異的影響，結(jié)果準(zhǔn)確率高。

國內(nèi)利用該法測定放牧羊采食量的研究不多，李亞奎等[10]利用飽和烷烴法測定了內(nèi)蒙古自治區(qū)畜牧科學(xué)院綜合實驗示范中心放牧綿羊絕對采食量為（1.13±0.10）kg/d，較本試驗測得的干物質(zhì)采食量偏高，可能是因為本試驗的家畜為放牧母綿羊，而內(nèi)蒙古畜牧科學(xué)院所用的試驗羊只是公羯羊，公羊本身的采食量就高于母羊所致。婁玉杰等[11]利用飽和烷烴法研究在意大利放牧場晚秋季節(jié)放牧羊駝的干物質(zhì)采食量為1.17 kg/d，高于本試驗放牧綿羊的干物質(zhì)采食量0.89 kg/d，因為羊駝體重高于放牧綿羊，干物質(zhì)采食量自然較綿羊高所致。且意大利屬于地中海氣候，冬季溫和多雨，適宜牧草的生長，而12月西藏地區(qū)處于枯草期，牧草相對匱乏。奧德等[12]報道，處于正常采食狀態(tài)的放牧綿羊，其干物質(zhì)采食量占體重的百分比均在2%～4%之間。本試驗所得母羊枯草期平均每天干物質(zhì)采食量為0.89 kg/d，干物質(zhì)采食量占體重的2.23%，符合正常比例。隨著放牧強(qiáng)度的提高和天然草場的日益退化，冷季飼草供應(yīng)的矛盾已趨于激化，研究測定枯草期放牧綿羊采食量，制定合理的補(bǔ)飼方案，發(fā)展草地畜牧業(yè)，合理利用草地資源，為調(diào)整畜群結(jié)構(gòu)提供科學(xué)信息至關(guān)重要。

4 結(jié) 論

飽和烷烴法用于測定放牧綿羊的采食量具有較好的應(yīng)用價值，西藏達(dá)孜縣枯草期放牧綿羊的平均干物質(zhì)采食量為0.89 kg/d，干物質(zhì)采食量占體重的2.23%。通過本研究的結(jié)果，結(jié)合草地產(chǎn)草量可知道“最大載畜量”，為合理利用草地資源提供參考依據(jù)。