張 欣，申 樂，黃宇光

中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)院麻醉科，北京 100730

神經(jīng)病理性疼痛是一種軀體感覺神經(jīng)系統(tǒng)損傷或者疾病引起的疼痛。糖尿病、帶狀皰疹病毒、腫瘤和獲得性免疫缺陷綜合征等都可以導(dǎo)致外周神經(jīng)發(fā)生損傷，當(dāng)損傷持續(xù)存在較長(zhǎng)時(shí)間后，就會(huì)產(chǎn)生痛覺異常或者痛覺過(guò)敏的現(xiàn)象。中國(guó)成年人的糖尿病患病率為10.4%[1]，病程較長(zhǎng)的患者容易發(fā)生糖尿病神經(jīng)病理性疼痛(diabetic neuropathic pain，DNP)，給患者和社會(huì)帶來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。他汀類藥物是一種選擇性的3-羥基- 3-甲基戊二酸單酰輔酶A(3-hydroxy- 3-methylglutaryl coenzyme A，HMG-CoA)還原酶抑制劑，主要用于高膽固醇血癥及心血管疾病的治療。大量研究顯示，他汀類藥物除了傳統(tǒng)的降低膽固醇的作用之外，還具有抗炎[2- 3]、抗氧化[4]、神經(jīng)保護(hù)[5]和鈣離子通道調(diào)節(jié)[6]等生物學(xué)作用。近來(lái)研究人員在脊神經(jīng)結(jié)扎(spinal nerve ligation，SNL)、坐骨神經(jīng)壓傷和慢性壓迫性損傷(chronic constrictive injury，CCI)動(dòng)物模型中[7- 9]發(fā)現(xiàn)，他汀類藥物能夠在一定程度上緩解神經(jīng)病理性疼痛的癥狀。

研究顯示，晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(receptor for advanced glycation end products，RAGE)/蛋白激酶B(protein kinase B，AKT)通路在糖尿病肌病[10]、巨噬細(xì)胞浸潤(rùn)[11]和糖尿病腎損傷[12]的病理生理過(guò)程中發(fā)揮重要作用，脊髓中RAGE的上調(diào)和激活參與了bortezomib導(dǎo)致的疼痛中樞敏化[13]。Liu等[14]研究發(fā)現(xiàn)，大鼠脊髓背角AKT的磷酸化水平在CCI模型中顯著升高。多項(xiàng)研究顯示，RAGE的高表達(dá)和AKT的磷酸化與疼痛的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[15- 18]。絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinases，MAPKs)主要由細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase，ERK)、p38 蛋白和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)組成，MAPKs在脊髓中的激活是DNP發(fā)生和維持的重要機(jī)制之一[19]，也是DNP相關(guān)研究的經(jīng)典指標(biāo)。氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，ox-LDL)在糖尿病患者體內(nèi)顯著升高，并且和糖尿病視網(wǎng)膜病變、頸動(dòng)脈內(nèi)膜和中膜的厚度以及冠狀動(dòng)脈的鈣化高度相關(guān)[20- 22]。ox-LDL可以作用于內(nèi)皮細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，導(dǎo)致炎癥因子的釋放[23- 24]。ox-LDL的形成和高血糖環(huán)境導(dǎo)致的氧化應(yīng)激高度相關(guān)，且ox-LDL的升高常伴隨白細(xì)胞介素(interleukin，IL)- 1β的升高[25]。

本研究檢測(cè)了大鼠脊髓背角中RAGE/AKT通路的變化情況，觀察了辛伐他汀是否可通過(guò)抑制脊髓背角中MAPKs的激活來(lái)緩解DNP的癥狀，并選用ox-LDL和IL- 1β來(lái)驗(yàn)證辛伐他汀的全身性抗炎抗氧化作用，探討了辛伐他汀對(duì)糖尿病大鼠神經(jīng)病理性疼痛及全身性炎癥的影響及其機(jī)制。

材料和方法

材料辛伐他汀(中國(guó)上海TCI公司)，鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)(美國(guó)Sigma公司)，血糖儀(中國(guó)三諾生物股份有限公司)，電子von-Frey(美國(guó)IITC公司)，BME- 410A熱痛刺激儀(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所)，RIPA裂解液、蛋白酶抑制劑(中國(guó)康為世紀(jì)公司)，磷酸酶抑制劑、苯甲基磺酰氟(phenylmethanesulfonyl fluoride，PMSF)、上樣緩沖液、增強(qiáng)型顯影液(中國(guó)北京普利萊公司)，聚偏二氟乙烯(polyvinylidene difluoride，PVDF)膜(美國(guó)Millipore公司)，anti-p-AKT抗體、anti-AKT抗體、anti-p-ERK抗體、anti-ERK抗體、anti-p-p38抗體、anti-p38 抗體、anti-p-JNK抗體、anti-JNK抗體、抗兔二抗(美國(guó)CST公司)，anti-RAGE抗體(中國(guó)北京博奧森公司)，anti-β-actin(中國(guó)北京中衫金橋公司)，抗鼠二抗(美國(guó)Abcam公司)，天能化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)(中國(guó)上海天能公司)，ox-LDL酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)試劑盒(中國(guó)武漢新啟迪公司)，IL- 1β ELISA試劑盒(中國(guó)上海江萊生物公司)。

糖尿病動(dòng)物模型的建立雄性SD大鼠24只，體質(zhì)量(235 ± 15)g，購(gòu)自北京維通利華公司[許可證號(hào)：SCXK(京)2016- 0006]。動(dòng)物房溫度為(23 ± 1)℃，照明方案為12 h照明- 12 h黑暗。所有動(dòng)物被飼養(yǎng)在糖尿病專用籠位中，由專門的飼養(yǎng)員每天更換墊料和添加食物、飲水。采用隨機(jī)數(shù)表法將大鼠隨機(jī)分為正常+介質(zhì)(NV)組、糖尿病+介質(zhì)(DV)組和糖尿病+辛伐他汀(DS)組3組，每組8只。大鼠在建模前禁食12 h。將STZ溶解于檸檬酸緩沖液中，配置成1% STZ溶液，置于冰上，0.5 h內(nèi)使用完畢。DV組和DS組每只大鼠按照60 mg/kg的劑量接受STZ溶液腹腔注射，NV組接受相應(yīng)體積檸檬酸緩沖液腹腔注射。STZ注射3 d后從各組大鼠尾靜脈采血測(cè)血糖，血糖值>16.7 mmol/L視為建模成功，一次性建模成功率約為94%。DS組每天按照15 mg/kg的劑量接受辛伐他汀腹腔注射(劑量的選擇依據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)[26])，NV組和DV組每天接受相應(yīng)體積的溶劑腹腔注射。具體流程見圖1。研究方案通過(guò)了北京協(xié)和醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物福利倫理委員會(huì)的審核。

行為學(xué)檢測(cè)

機(jī)械痛閾：采用電子Von-Frey檢測(cè)大鼠的機(jī)械性刺激縮足閾值(paw withdrawal mechanical threshold，PWMT)。該設(shè)備由手持的壓力傳感器和1根直徑為200 μm的鎢絲組成。測(cè)試前，研究者將每只大鼠單獨(dú)放置于金屬網(wǎng)底的塑料隔間內(nèi)，使其在安靜環(huán)境中適應(yīng)30 min。測(cè)試時(shí)，用金屬探頭垂直于足底緩慢加壓，直到出現(xiàn)縮足反應(yīng)，記錄儀器顯示的讀數(shù)。每足測(cè)量3次，取平均值。

BG：血糖；BM：體質(zhì)量；PWMT：機(jī)械性刺激縮足閾值；PWTL：熱刺激縮足反射潛伏期；STZ：鏈脲佐菌素；Veh：介質(zhì)；Sim：辛伐他汀；ip：腹腔注射；SDH：脊髓背角；BS：血清

BG：blood glucose；BM：body mass；PWMT：paw withdrawal mechanical threshold；PWTL：paw withdrawal thermal latency；STZ：streptozotocin；Veh：vehicle；Sim：simvastatin；ip：intraperitoneal injection；SDH：spinal dorsal horn；BS：blood serum

圖1實(shí)驗(yàn)流程圖

Fig1Flow chart of the experiment

熱痛閾：采用BME- 410A熱痛刺激儀檢測(cè)大鼠的熱刺激縮足反射潛伏期(paw withdrawal thermal latency，PWTL)。測(cè)試前，將每只大鼠單獨(dú)放置于2 mm厚玻璃底的塑料籠內(nèi)，使其在安靜的環(huán)境中適應(yīng)30 min。測(cè)試時(shí)，用熱痛刺激儀分別照射大鼠左右后足底部，大鼠產(chǎn)生縮足或者舔足反應(yīng)時(shí)停止照射，記錄儀器顯示的時(shí)間。每足測(cè)量3次，取平均值。

Western blot檢測(cè)采用戊巴比妥鈉(60 mg/kg)腹腔注射麻醉大鼠，取血后迅速取出L3- 5段脊髓背角，放入凍存管中用液氮冷卻，置于-80 ℃冰箱保存。每組用于Western blot檢測(cè)的大鼠為5只。每10 mg組織加入100 μl包含蛋白酶抑制劑、磷酸酶抑制劑和PMSF的RIPA裂解液，用超聲充分勻漿裂解后在4 ℃條件下12 000 g/min離心15 min，取上清，加入5×上樣緩沖液后用沸水煮蛋白10 min。上樣后用10% SDS-PAGE分離蛋白，分離開的蛋白電轉(zhuǎn)到PVDF膜上。非磷酸化指標(biāo)的PVDF膜用5%脫脂奶粉在室溫封閉1 h，磷酸化指標(biāo)的PVDF膜用5% BSA封閉1 h，然后用相應(yīng)的一抗在4 ℃條件下孵育過(guò)夜。再用相應(yīng)的二抗在室溫條件下孵育PVDF膜1 h。將PVDF膜用增強(qiáng)型顯影液浸潤(rùn)，用天能化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)成像。采用Image J圖像分析軟件對(duì)各條帶進(jìn)行分析。

ELISA檢測(cè)采用ELISA試劑盒檢測(cè)血清中ox-LDL和IL- 1β的濃度，具體參照廠家提供的產(chǎn)品說(shuō)明進(jìn)行。每組大鼠為8只。血清在建模后第28天取得。

統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用GraphPad Prism 6.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差表示；Western blot和ELISA檢測(cè)結(jié)果采用單因素方差分析，組間比較采用Dunnett多重比較法；血糖、體質(zhì)量和行為學(xué)數(shù)據(jù)采用重復(fù)測(cè)量數(shù)據(jù)兩因素方差分析，組間比較采用Tukey多重比較法；Western blot檢測(cè)條帶統(tǒng)計(jì)分析時(shí)，將3組數(shù)據(jù)用NV組的平均值進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化；P< 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

辛伐他汀對(duì)糖尿病大鼠血糖、體質(zhì)量和痛閾的影響建模后第7、14、21、28天，DV組的血糖水平分別為(24.0 ± 3.1)、(23.7 ± 2.5)、(24.2 ± 2.1)、(26.2 ± 1.1)mmol/L，均明顯高于NV組的(6.8 ± 0.9)(q=25.584，P=0.000)、(7.0 ± 1.2)(q=24.840，P=0.000)、(6.1 ± 1.7)(q=26.979，P=0.000)、(6.5 ± 1.8)mmol/L(q=29.194，P=0.000)，與DS組的(24.2 ± 3.2)(q=0.279，P=0.979)、(24.7 ± 2.2)(q=1.451，P=0.562)、(24.3 ± 2.1)(q=0.130，P=0.995)、(24.7 ± 1.7)mmol/L(q=2.196，P=0.271)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

建模后第7、14、21、28天，DV組體質(zhì)量分別為(253.0 ± 16.8)、(260.6 ± 25.8)、(264.6 ± 33.4)、(263.0 ± 43.9)g，均明顯低于NV組的(304.2 ± 17.2)(q=5.545，P=0.000)、(336.6 ± 19.6)(q=8.241，P=0.000)、(358.8 ± 11.4)(q=10.225，P=0.000)、(376.3 ± 11.8)g(q=12.284，P=0.000)，與DS組的(259.0 ± 19.3)(q=0.648，P=0.891)、(279.7±29.5)(q=2.077，P=0.310)、(280.8 ± 38.4)(q=1.766，P=0.427)、(285.1 ± 48.4)g(q=2.398，P=0.212)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

建模后第7、14、21、28天，DV組的PWMT值分別為(10.4 ± 1.4)、(8.6 ± 0.8)、(7.1 ± 1.6)、(7.8 ± 0.8)g，NV組分別為(11.7 ± 1.1)、(12.0 ± 0.9)、(11.6 ± 1.5)、(11.7 ± 1.5)g，其中DV組第14(q=8.482，P=0.000)、21(q=11.309，P=0.000)、28(q=9.801，P=0.000)天的PWMT值明顯低于NV組；DS組分別為(11.2 ± 0.7)、(9.9 ± 0.5)、(9.4 ± 1.4)、(9.7 ± 0.9)g，其中第21(q=5.780，P=0.000)、28(q=4.775，P=0.003)天的PWMT值明顯高于DV組。

建模后第7、14、21、28天，DV組的PWTL值分別為(8.6 ± 1.2)、(8.1 ± 1.6)、(8.0 ± 0.7)、(7.6 ± 1.2)s，NV組分別為(8.7 ± 1.1)、(8.7 ± 1.0)、(8.3 ± 0.8)、(8.6 ± 0.7)s，DS組分別為(9.2 ± 1.3)、(8.8 ± 0.7)、(8.4 ± 0.7)、(8.7 ± 1.3)s，各組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均 > 0.05)。

辛伐他汀對(duì)糖尿病大鼠脊髓背角中RAGE/AKT的影響DV組大鼠脊髓背角中RAGE的表達(dá)量明顯高于NV組(q=6.299，P=0.000)，DS組明顯低于DV組(q=2.891，P=0.025)；DV組大鼠脊髓背角中AKT磷酸化水平明顯高于NV組(q=8.915，P=0.000)，DS組明顯低于DV組(q=4.103，P=0.003)(圖2)。

辛伐他汀對(duì)糖尿病大鼠脊髓背角中MAPKs的影響DV組大鼠脊髓背角中ERK(q=8.313，P=0.000)、p38蛋白(q=2.965，P=0.022)和JNK(q=7.459，P=0.000)的磷酸化水平明顯高于NV組；DS組脊髓背角中JNK的磷酸化水平明顯低于DV組(q=3.866，P=0.004)，ERK(q=1.987，P=0.122)和p38蛋白的磷酸化水平(q=1.260，P=0.375)與DV組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(圖3)。

辛伐他汀對(duì)糖尿病大鼠血清ox-LDL和IL- 1β的影響DV組大鼠的血清ox-LDL和IL- 1β水平分別為(41.86 ± 13.40)ng/ml和(108.16 ± 25.88)pg/ml，均明顯高于NV組的(24.66 ± 7.87)ng/ml(q=3.606，P=0.003)和(49.32 ± 28.35)pg/ml(q=5.079，P=0.000)；也明顯高于DS組的(18.81 ± 5.62)ng/ml(q=4.833，P=0.000)和(32.73 ± 11.73)pg/ml(q=6.510，P=0.000)。

討 論

目前已知他汀類藥物在糖尿病動(dòng)物模型中可以改善神經(jīng)組織的血流灌注和微循環(huán)[27- 28]，通過(guò)抑制RhoA/ROCK通路、上調(diào)NO表達(dá)[29]，緩解糖尿病導(dǎo)致的神經(jīng)病變。本研究觀察了辛伐他汀對(duì)DNP大鼠脊髓背角中與疼痛相關(guān)的分子蛋白R(shí)AGE/AKT和MAPKs的影響，證明辛伐他汀可能通過(guò)抑制脊髓背角中RAGE/AKT通路和JNK的磷酸化來(lái)緩解DNP。

本研究選用的模型為經(jīng)典的STZ腹腔注射誘導(dǎo)的糖尿病模型。因?yàn)樵谔悄虿顟B(tài)下，感覺神經(jīng)的改變要早于運(yùn)動(dòng)神經(jīng)的變化，且本研究的觀察期為28 d，所以本研究主要關(guān)注了機(jī)械痛閾和熱痛閾的變化。在熱痛閾檢測(cè)過(guò)程中，我們保持了大鼠充分安靜、玻璃干燥以及恒溫，固定熱輻射燈泡的功率，以減少客觀因素對(duì)熱痛閾檢測(cè)的影響，結(jié)果未在觀測(cè)時(shí)間點(diǎn)發(fā)現(xiàn)糖尿病大鼠的熱痛閾有顯著的下降，與Daugherty等[30]和龔亞紅[31]的熱痛閾檢測(cè)結(jié)果類似。研究顯示，利用STZ建立1型糖尿病模型的給藥劑量范圍大概是50～72 mg/kg[32- 34]，本研究的給藥劑量為60 mg/kg，因此可以排除STZ建模劑量不同導(dǎo)致的熱痛閾下降無(wú)法檢出。熱痛閾的檢測(cè)方法主要有熱水浸尾實(shí)驗(yàn)[32-33]和熱痛刺激儀法[34]，但研究中未說(shuō)明熱痛刺激儀的具體型號(hào)，因此我們推測(cè)，可能是因?yàn)闊嵬撮摍z測(cè)方法的不同或者檢測(cè)設(shè)備的不同導(dǎo)致本研究未檢出糖尿病大鼠熱痛閾的下降。

RAGE：晚期糖基化終末產(chǎn)物受體；AKT：蛋白激酶B；NV：正常+介質(zhì)；DV：糖尿病+介質(zhì)；DS：糖尿病+辛伐他汀

RAGE：receptor for advanced glycation end products；AKT：protein kinase B；NV：normal+vehicle；DV：diabetic+vehicle；DS：diabetic+simvastatin

圖2大鼠脊髓背角中RAGE/AKT通路的變化

Fig2Changes of RAGE/AKT pathway in the spinal dorsal horn of rats

ERK：細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶；JNK：c-Jun氨基末端激酶；MAPKs：絲裂原活化蛋白激酶

ERK：extracellular signal-regulated kinase；JNK：c-Jun N-terminal kinase；MAPKs：mitogen-activated protein kinases

圖3MAPKs在大鼠脊髓背角中的變化

Fig3Changes of MAPKs in the spinal dorsal horn of rats

Bhalla等[26]采用7.5、15和30 mg/(kg·d)的劑量治療長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛，結(jié)果顯示，15 mg/(kg·d)是緩解疼痛的最優(yōu)劑量且對(duì)正常大鼠的機(jī)械痛閾以及血清膽固醇無(wú)明顯影響，30 mg/(kg·d)的劑量不能有效緩解疼痛并且降低了正常大鼠機(jī)械痛閾和血清膽固醇濃度。因此本研究選用的辛伐他汀劑量為15 mg/(kg·d)，并且沒有設(shè)置正常大鼠腹腔注射辛伐他汀組。

RAGE/AKT通路在糖尿病并發(fā)癥研究中出現(xiàn)較多。糖尿病動(dòng)物的血糖升高，長(zhǎng)期的高血糖會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)的蛋白質(zhì)發(fā)生糖基化，形成晚期糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycation end products，AGEs)，AGEs都是RAGE的配體，與RAGE結(jié)合后會(huì)引起下游信號(hào)通路的變化。Chiu等[10]研究發(fā)現(xiàn)，AGEs可以作用于RAGE，通過(guò)AMPK磷酸化來(lái)介導(dǎo)AKT的去磷酸化，進(jìn)而導(dǎo)致小鼠糖尿病肌萎縮癥的發(fā)生。在糖尿病導(dǎo)致的腎損傷研究中，AGEs可以作用于RAGE引發(fā)AKT 磷酸化，導(dǎo)致促炎和促纖維化因子的釋放，進(jìn)而引發(fā)腎小管間質(zhì)性損傷[12]。可見在不同病理生理過(guò)程中，RAGE與配體結(jié)合后AKT的變化是不一樣的。

RAGE和AKT與疼痛的發(fā)生密切相關(guān)。在大鼠腰椎間盤突出疼痛模型中，DRG中RAGE/STAT通路的激活在疼痛發(fā)生和發(fā)展中發(fā)揮重要作用[15]。在脊神經(jīng)結(jié)扎模型中，注射中和RAGE的抗體可以有效緩解疼痛，抑制NF-κB、TNF-α和IL- 1β上調(diào)[16]。Guo等[17]研究發(fā)現(xiàn)，在大鼠CCI模型中，痛閾下降伴隨著PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路的激活。Guan等[18]在骨癌痛模型中也發(fā)現(xiàn)了PI3Kγ/AKT的激活與大鼠痛閾的下降密切相關(guān)，給予PI3Kγ的抑制劑后，骨癌痛相關(guān)的行為學(xué)改變得到緩解并且p-AKT的升高在一定程度上被抑制，這說(shuō)明PI3Kγ/AKT的激活是骨癌痛發(fā)生發(fā)展的重要機(jī)制之一。本研究同時(shí)檢測(cè)了大鼠脊髓背角中RAGE的表達(dá)和AKT的磷酸化，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，辛伐他汀緩解機(jī)械痛的同時(shí)可以在一定程度上抑制糖尿病導(dǎo)致的RAGE/AKT激活，由此推測(cè)辛伐他汀抑制RAGE受體的表達(dá)，減少其配體與之結(jié)合進(jìn)而減少AKT的磷酸化可能是辛伐他汀緩解DNP的另一個(gè)機(jī)制。

MAPKs在神經(jīng)系統(tǒng)中的激活與各種疼痛的誘發(fā)以及維持都密切相關(guān)[35]，已經(jīng)成為疼痛研究中的經(jīng)典指標(biāo)。Daulhac等[19]發(fā)現(xiàn)，DNP大鼠脊髓中的ERK、p38及JNK發(fā)生了廣泛的激活，給予相應(yīng)的抑制劑之后，機(jī)械痛得到緩解，可見MAPKs激活是DNP發(fā)生和維持的重要機(jī)制之一。本研究發(fā)現(xiàn)，DNP大鼠脊髓背角中的MAPKs也發(fā)生了廣泛的激活，辛伐他汀可以提高糖尿病大鼠的機(jī)械痛閾并且抑制JNK的激活，但對(duì)ERK和p38的激活無(wú)明顯抑制作用。由此推測(cè)，抑制JNK激活也是辛伐他汀緩解DNP癥狀的機(jī)制之一。

高血糖可以導(dǎo)致氧化應(yīng)激反應(yīng)的發(fā)生[36]，LDL暴露于活性氧簇容易形成ox-LDL[37]。已有研究證明，ox-LDL可以作用于單核巨噬細(xì)胞，激活NLRP3炎性小體，導(dǎo)致IL- 1β的釋放[25]。本研究結(jié)果顯示，辛伐他汀可以顯著降低糖尿病大鼠血清中ox-LDL和IL- 1β的濃度，并推測(cè)辛伐他汀可能具有減輕糖尿病大鼠全身炎癥反應(yīng)的作用。本課題組的另一項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，1型糖尿病大鼠脊髓背角中的IL- 1β相對(duì)于正常組無(wú)明顯變化(數(shù)據(jù)未發(fā)表)，考慮可能是ox-LDL無(wú)法穿透血腦屏障所致。

本研究具有一定的局限性，一方面研究尚未闡明RAGE/AKT與JNK的具體作用關(guān)系，另一方面，取材的時(shí)間點(diǎn)均為第28天，脊髓背角中的蛋白和血清中的炎癥因子只對(duì)應(yīng)第28天的行為學(xué)，無(wú)法獲知這些指標(biāo)在觀測(cè)期的動(dòng)態(tài)變化。

綜上，本研究結(jié)果顯示，辛伐他汀可能通過(guò)抑制脊髓背角中RAGE/AKT通路的激活以及JNK的磷酸化緩解DNP的癥狀。此外，辛伐他汀也可以降低糖尿病大鼠血液中ox-LDL和IL- 1β的濃度，從而減輕DNP大鼠的全身性炎癥反應(yīng)。后續(xù)實(shí)驗(yàn)中可以做更深入的研究來(lái)闡明辛伐他汀緩解DNP和抗炎這兩個(gè)非降脂作用的具體機(jī)制。