劉慧平 牛 艷

乳腺癌是一種婦科常見(jiàn)腫瘤，近些年在我國(guó)的發(fā)病率顯著上升，且發(fā)病年齡也呈現(xiàn)年輕化趨勢(shì)[1-2]。目前的研究結(jié)果顯示，乳腺癌的發(fā)病原因眾多，病情發(fā)展為階段性，臨床上通常將組織學(xué)分級(jí)、病理學(xué)分級(jí)、腫瘤轉(zhuǎn)移情況和腫瘤體積等作為病情和預(yù)后的判斷依據(jù)[3-4]。表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)通路是影響腫瘤的重要通路，包括HER-1、HER-2、HER-3和HER-4等成員[5]。HER-2是由原癌基因HER-2/neu編碼的一種分子量為185 KD的跨膜糖蛋白p185，HER-2基因表達(dá)與細(xì)胞分化、轉(zhuǎn)移、遷移等密切相關(guān)[6-7]。研究表明，25%～30%的浸潤(rùn)性乳腺癌患者有HER-2基因擴(kuò)增或蛋白過(guò)表達(dá)，檢測(cè)HER-2表達(dá)能為乳腺癌患者的預(yù)后判定提供依據(jù)[8]。在乳腺癌的影像學(xué)診斷中，鉬靶X線操作技術(shù)簡(jiǎn)單，但是在臨床診斷中對(duì)患者有一定的損傷[9]。MRI具有無(wú)電離輻射、可進(jìn)行功能成像、軟組織對(duì)比性良好等特點(diǎn)，但是檢查費(fèi)用比較貴，很難進(jìn)行普及[10]。超聲檢查具有無(wú)創(chuàng)傷、簡(jiǎn)便快速等優(yōu)點(diǎn)，其中彩色多普勒超聲完善了傳統(tǒng)超聲指標(biāo)不足的缺點(diǎn)，從全新的視角為腫瘤的評(píng)價(jià)提供了更多的信息[11]。本文具體探討了乳腺癌HER-2基因表達(dá)與彩色超聲表現(xiàn)的關(guān)聯(lián)性，先將研究結(jié)果做如下報(bào)告。

1 資料與方法

1.1 一般資料

采用回顧性、總結(jié)研究方法，選擇2013年8月到2018年1月在我院就診的140例乳腺腫塊患者為研究對(duì)象，納入標(biāo)準(zhǔn)：女性患者，首次診治，年齡20～80歲，臨床資料完整、詳細(xì)。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并嚴(yán)重心肝腎異?；颊?；處于哺乳期與懷孕期的女性。140例中經(jīng)病理診斷為乳腺癌80例(惡性組)，包括浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌48例，浸潤(rùn)性小葉癌32例；良性乳腺腫塊60例(良性組)，包括乳腺纖維腺瘤25例，乳腺腺病20例，乳腺導(dǎo)管內(nèi)乳頭狀瘤15例。本研究得到醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)。

惡性組患者年齡24～78歲，平均年齡(45.22±5.13)歲；平均體重指數(shù)為(23.45±2.19)kg/m2；平均病程為(7.29±1.28)年；絕經(jīng)狀態(tài)：未絕經(jīng)16例，絕經(jīng)64例；臨床分期：Ⅰ期34例，Ⅱ期30例，Ⅲ期16例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移40例；組織學(xué)分化類型：高分化30例，中分化30例，低分化20例。

良性組患者年齡25～76歲，平均年齡(45.14±3.89)歲；平均體重指數(shù)為(22.65±1.83)kg/m2；平均病程為(4.11±1.82)年；絕經(jīng)狀態(tài)：未絕經(jīng)18例，絕經(jīng)42例。

1.2 超聲檢查

超聲檢查：采用GE Logiq E9超聲診斷儀，配有ML6-15線陣探頭?；颊呷⊙雠P位，充分暴露雙側(cè)乳腺及腋窩，于乳腺部位進(jìn)行橫向、縱向、扇形掃查。在彩色多普勒超聲診斷中，囑患者吸氣后屏氣，獲得多普勒血流頻譜，觀察腫瘤內(nèi)及其周邊的血流分布情況，顯示胸外側(cè)動(dòng)脈，測(cè)定記錄血流峰值速度、阻力指數(shù)。

1.3 HER-2表達(dá)檢測(cè)

兔抗HER-2單克隆抗體、即用型快捷免疫組化試劑盒購(gòu)自福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司，其余生化試劑都購(gòu)自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司。2組患者手術(shù)切除的病灶組織標(biāo)本離體后立即用10%中性福爾馬林固定，制作成4 μm切片后進(jìn)行免疫組化分析。腫瘤切片免疫組化染色后，置于光學(xué)顯微鏡下觀察，并分析和處理。本實(shí)驗(yàn)的陽(yáng)性分析用雙盲法，每張切片圖片分別由兩位資深病理科醫(yī)師做出判斷。Her-2陽(yáng)性細(xì)胞染色結(jié)果顯示棕黃色均勻細(xì)顆粒主要分布在胞質(zhì)和細(xì)胞膜上，根據(jù)病變細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比以及著色深淺來(lái)判斷和進(jìn)行分級(jí)，HER-2蛋白(-)或(+)列入陰性范圍；(++)及其以上列入陽(yáng)性范圍。將已知Her-2陽(yáng)性腫瘤標(biāo)本作為陽(yáng)性對(duì)照，將PBS液代替探針混合液作為陰性對(duì)照。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

對(duì)所獲得的計(jì)量和計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)利用SPSS 18.00軟件進(jìn)行分析，以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差或構(gòu)成比表示，差異性檢驗(yàn)用t檢驗(yàn)或卡方χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用直線相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為α=0.05。

2 結(jié)果

2.1 HER-2表達(dá)情況對(duì)比

惡性組與良性組的HER-2表達(dá)陽(yáng)性率分別為60.0%(48/80)和10.0%(6/60)，惡性組顯著高于良性組(χ2=54.945，P<0.05)。

2.2 彩色超聲表現(xiàn)

惡性組的胸外側(cè)動(dòng)脈血流峰值速度和阻力指數(shù)高于良性組，對(duì)比差異都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 2組超聲動(dòng)脈血流情況對(duì)比

2.3 乳腺癌不同病理特征的HER-2表達(dá)、血流峰值速度及阻力指數(shù)差異分析

在80例乳腺癌患者中，HER-2表達(dá)情況、血流峰值速度、阻力指數(shù)在不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分化中的對(duì)比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表2。

2.4 乳腺癌HER-2表達(dá)與彩色超聲表現(xiàn)的關(guān)聯(lián)性

在80例乳腺癌患者中，直線相關(guān)分析顯示HER-2表達(dá)陽(yáng)性與胸外側(cè)動(dòng)脈血流峰值速度、阻力指數(shù)都有顯著正相關(guān)性(P<0.05)。見(jiàn)表3。

3 討論

乳腺癌一直居?jì)D科腫瘤的首位，利用目前的治療方法治療后的中晚期癌癥患者的5年生存率不高，治療效果仍舊不理想[12]。目前的腫瘤學(xué)研究結(jié)果顯示，除腫瘤細(xì)胞增殖外，信號(hào)傳導(dǎo)通路的變化也是惡性腫瘤生物發(fā)生和發(fā)展因素[13]。HER-2的表達(dá)觸發(fā)信號(hào)下游的蛋白磷酸化，進(jìn)而調(diào)節(jié)血管生成和細(xì)胞增殖。一些乳腺癌患者體內(nèi)HER-2蛋白表達(dá)顯著上調(diào)，從而促發(fā)下游信號(hào)通路，引起下游蛋白磷酸化，從而加快腫瘤的發(fā)生和發(fā)展[14]。

表2 乳腺癌不同病理特征的HER-2表達(dá)、血流峰值速度、阻力指數(shù)差異分析

表3 乳腺癌HER-2表達(dá)與彩色超聲表現(xiàn)的關(guān)聯(lián)性(n=20)

本研究顯示惡性組與良性組的HER-2表達(dá)陽(yáng)性率分別為60.0%和10.0%，惡性組顯著高于良性組(P<0.05)。HER-2能夠編碼一種跨膜酪氨酸激酶受體，調(diào)節(jié)細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化和增殖，通過(guò)與EGFR家族成員及其配體之間相互作用在細(xì)胞間傳遞信號(hào)[15]。相關(guān)研究表明，HER-2的過(guò)度表達(dá)可加快腫瘤新生血管生成、抑制細(xì)胞凋亡，提高腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲能力，延長(zhǎng)腫瘤細(xì)胞存活周期，破壞機(jī)體組織抗侵襲屏障等[16]。

我國(guó)近年來(lái)的乳腺癌發(fā)病率正以每年2.0%的速度遞增，嚴(yán)重威脅著女性身心健康。早期發(fā)現(xiàn)乳腺癌、早期治療有助于改善患者的預(yù)后。目前早期診斷與篩查乳腺癌的方法包括MRI、鉬靶、超聲等。超聲是診斷乳腺癌的常見(jiàn)影像學(xué)檢查方法，相關(guān)研究認(rèn)為乳腺癌的超聲聲像圖表現(xiàn)可見(jiàn)病灶直徑均大于3 cm，認(rèn)為乳腺腫塊的良惡性可能與病灶的直徑大小有關(guān)[17]。不過(guò)常規(guī)超聲的早期診斷率比較低，誤診率也比較高。彩色多普勒超聲具有高靈敏度、特異性和準(zhǔn)確率的特點(diǎn)，對(duì)乳腺胸外側(cè)動(dòng)脈進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，不僅能對(duì)其動(dòng)脈血流量的半定量測(cè)定，還可以顯示動(dòng)脈實(shí)質(zhì)、血管及血流動(dòng)力學(xué)等狀況[18]。本研究顯示惡性組的胸外側(cè)動(dòng)脈血流峰值速度和阻力指數(shù)高于良性組，主要原因是由于乳腺癌腫瘤的的快速增殖，使得胸外側(cè)動(dòng)脈變細(xì)、狹窄結(jié)締組織增加，導(dǎo)致胸外側(cè)動(dòng)脈血流速度減慢。

只有對(duì)HER-2表達(dá)狀態(tài)進(jìn)行科學(xué)準(zhǔn)確的分析，才能做到既有助于乳腺癌的有效診治，又能為患者的預(yù)后提供依據(jù)[19]。本研究顯示在80例乳腺癌患者中，HER-2表達(dá)情況在不同臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分化中的對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。HER-2同腫瘤細(xì)胞增殖或轉(zhuǎn)移直接相關(guān)，乳腺癌中HER-2的高表達(dá)可增強(qiáng)腫瘤的細(xì)胞的遷移能力。有研究通過(guò)分析認(rèn)為過(guò)表達(dá)HER-2可觸發(fā)多種轉(zhuǎn)移機(jī)制，進(jìn)而提高腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力，過(guò)表達(dá)HER-2可調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞鈣黏蛋白等黏附因子的表達(dá)，進(jìn)而提高腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力[20]。

典型的乳腺癌因其向周圍組織浸潤(rùn)，使得周邊呈毛刺樣生長(zhǎng)，縱橫比例大于1，部分內(nèi)部可見(jiàn)較豐富血流。典型的良性結(jié)節(jié)則具有邊界清晰，形狀規(guī)則，有包膜，后方回聲增強(qiáng)等特點(diǎn)。然而良惡性腫瘤內(nèi)部血流會(huì)出現(xiàn)一定的重疊，診斷特異性不高[21]。本研究直線相關(guān)分析顯示乳腺癌患者的HER-2表達(dá)陽(yáng)性與胸外側(cè)動(dòng)脈血流峰值速度、阻力指數(shù)都有顯著正相關(guān)性(P<0.05)。當(dāng)前也有研究表明30%以上的人類惡性腫瘤的上皮源性腫瘤都普遍過(guò)量表達(dá)HER-2，可見(jiàn)HER-2基因的過(guò)表達(dá)可能同腫瘤的發(fā)生發(fā)展直接相關(guān)[22]。HER-2表達(dá)通過(guò)調(diào)節(jié)上皮細(xì)胞鈣黏蛋白等黏附因子的表達(dá)來(lái)促進(jìn)遷移，也可啟動(dòng)多種轉(zhuǎn)移機(jī)制來(lái)加快腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移[23-24]。

總之，乳腺癌HER-2基因多呈高表達(dá)狀況，胸外側(cè)動(dòng)脈血流峰值速度、阻力指數(shù)也顯著增高，兩者存在顯著關(guān)聯(lián)性。