張靜

摘 要：隨著人們生活水平的提高，對(duì)日常的衣食住行的質(zhì)量要求也越來(lái)越高，尤其是對(duì)于食物方面。在食物的食用方面，蔬菜瓜果是最普遍的，但是，目前我國(guó)的蔬菜瓜果的種植還是主要依賴(lài)于農(nóng)藥使用，而人們一般比價(jià)排斥用農(nóng)藥種植的蔬菜，原因有二：一是農(nóng)藥種植口味差;二是農(nóng)藥種植的果實(shí)殘留多?；诖朔N現(xiàn)狀，本文就用高效液相色譜法檢測(cè)蔬菜中啶蟲(chóng)脒的農(nóng)藥殘留問(wèn)題進(jìn)行簡(jiǎn)單闡述。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜法;檢測(cè);殺蟲(chóng)劑;農(nóng)藥殘留

一、高效液相色譜法基本原理及啶蟲(chóng)脒的性質(zhì)

1.高效液相色譜法。高效液相色譜法是農(nóng)藥檢測(cè)常用的檢測(cè)方法之一，相比其他檢測(cè)方法，它具有色譜較為靈敏、反應(yīng)快速、分辨率高、重復(fù)性好的特點(diǎn)。首先，顧名思義，該方法檢測(cè)的就是液體相，兩相之間是互不相容的，會(huì)出現(xiàn)一個(gè)明顯的界面，當(dāng)開(kāi)始試驗(yàn)的時(shí)候，由于分離檢測(cè)極性強(qiáng)，所以當(dāng)溶質(zhì)開(kāi)始測(cè)試的時(shí)候會(huì)相互分配，當(dāng)即將達(dá)到平衡的時(shí)候，就可以很明顯的發(fā)現(xiàn)所測(cè)成分的各種表觀性質(zhì)。下文主要是講述該方法在農(nóng)藥中檢測(cè)啶蟲(chóng)脒中的應(yīng)用。另外，高效液相色譜主要分類(lèi)有：高效凝膠色譜、高效離子交換液相色譜、反相高效液相色譜、疏水性高效液相色譜、高效親和液相色譜以及高效聚焦液相色譜等類(lèi)型。用不同類(lèi)型的高效液相色譜分離或分析各種農(nóng)作物農(nóng)藥的原理基本上與相對(duì)應(yīng)的普通液相層析的原理是相似的。

2.啶蟲(chóng)脒。啶蟲(chóng)脒屬中等的毒性農(nóng)藥，原來(lái)是對(duì)害蟲(chóng)以胃毒和觸殺，對(duì)植物內(nèi)部組織滲透性強(qiáng)，所以耐雨水沖刷，殘效期長(zhǎng)，對(duì)于害蟲(chóng)的防止有良好效果。目前，大部分的作用是用來(lái)果黃蚜的防止，屢試不爽。主要使用方法是：根據(jù)蟲(chóng)害發(fā)生的密集期，當(dāng)溫度提高之后，然后進(jìn)行噴灑，有良好的治療和防止效果。但是在使用的時(shí)候，要注意不要在桑園附近噴灑，氣霧會(huì)對(duì)于桑園產(chǎn)生不利影響，在使用過(guò)程中，不要與堿性農(nóng)藥混用，這樣會(huì)減小藥效。

二、實(shí)驗(yàn)部分

1.儀器、試劑和材料。美國(guó)Waters液相色譜儀;德國(guó)eppendrf5810離心機(jī);德國(guó)IKA勻漿機(jī);渦旋混合器;美國(guó)N-EVAP112氮吹儀;電子天平;食品搗碎機(jī)。色譜純乙腈;分析純中性氧化鋁：（100～200目，500℃灼燒4h，貯于密封容器中備用）;分析純弗羅里硅土（60～100目，500℃灼燒4h，貯于密封容器中備用）;色譜純硅藻土;啶蟲(chóng)脒等九種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，分別用乙腈溶劑配制成濃度為1000μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液;使用前用乙腈稀釋成適用濃度的混合標(biāo)準(zhǔn)工作液（混標(biāo)）。表2列出了1種農(nóng)藥的基本信息。

2.液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜條件。色譜柱：BEHC18色譜柱，21cm×50mm（i.d.）×1.7μm，或性能相當(dāng)者;進(jìn)樣量：10μL;電離方式：+EI;離子源溫度：120℃;錐孔反吹氣流量：50L/h;去溶劑氣：氮?dú)?，純度?9.999%，流速700L/h，溫度380℃;流動(dòng)相：乙腈和0.1%甲酸;梯度洗脫見(jiàn)表2，測(cè)定方式：多反應(yīng)監(jiān)測(cè)。

3.樣品前處理。稱(chēng)量0.5g樣品于研缽中，加入1g硅藻土混勻后，再加入1.5g中性氧化鋁或硅膠，充分研磨，裝入帶有篩板和濾紙的6mL固相萃取柱中，用2mL乙腈洗滌研缽，轉(zhuǎn)入柱中，再用10mL乙腈洗脫，收集洗脫液于10mL試管中，經(jīng)氮吹儀吹至近干后，用乙腈定容到1.0mL，用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀檢測(cè)。

三、結(jié)果與討論

1.洗脫劑體積的確定。為了確定所用乙腈的洗脫體積，本研究分別試驗(yàn)了9種農(nóng)藥的洗脫曲線及其相應(yīng)回收率，洗脫曲線基本相似，以噻螨酮的洗脫曲線為例。結(jié)果顯示，當(dāng)淋洗體積為10mL時(shí)，可洗脫完全，故洗脫體積選擇10mL。

2.儀器分析方法的優(yōu)化。9種農(nóng)藥多屬于難以氣化物質(zhì)，根據(jù)9種農(nóng)藥的這一性質(zhì)，我們選擇了液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用作為檢測(cè)和確證的方法，如圖4所示。

3.檢測(cè)下限和線性關(guān)系。研究過(guò)程中，廣泛查找了美國(guó)、歐盟、日本等發(fā)達(dá)國(guó)家和地區(qū)對(duì)于9種農(nóng)藥在蔬菜、水果、肉和魚(yú)類(lèi)食品中的殘留限量，并依據(jù)限量?jī)?yōu)化方法條件，使所得到的方法能夠滿足國(guó)內(nèi)外殘留限量的要求。方法檢測(cè)下限是依據(jù)10種樣品基質(zhì)中9種農(nóng)藥在LC-MS/MS性噪比（S/N≥10）而定的。在本方法所確定的檢測(cè)條件下，分別對(duì)9種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)物在一定濃度范圍內(nèi)制備5個(gè)不同濃度水平的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，以相對(duì)濃度與相對(duì)峰面積作曲線，濃度范圍為0.01～1.00μg/mL時(shí)，呈良好線性關(guān)系。方法檢出限、標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)以及添加的濃度為0.01mg/kg，0.02mg/kg和0.051mg/kg的回收率范圍列于表1。

4.樣品測(cè)定。根據(jù)食品中水分、脂肪、糖等成分的含量不同進(jìn)行了科學(xué)、細(xì)致、合理的分類(lèi)，分別在植物源性食品和動(dòng)物源性食品中，選取了10種代表性樣品（白菜、土豆、玉米、紫甘藍(lán)、梨、鯉魚(yú)、雞胸、香菇、菠菜、大蔥）作為研究對(duì)象，采用本文方法對(duì)樣品進(jìn)行9種農(nóng)藥的添加回收實(shí)驗(yàn)，平行測(cè)定7次。

四、含啶蟲(chóng)脒農(nóng)藥殘留的檢測(cè)實(shí)例

兩種檢測(cè)方法中，各有局限性，酶抑制法目前之能實(shí)在蔬菜中檢測(cè)一些酯類(lèi)的農(nóng)藥，高效液相色譜法在當(dāng)今的農(nóng)藥檢測(cè)方面占有很大的比重，尤其是在啶蟲(chóng)脒的檢測(cè)中，下文就使用該方法去檢測(cè)幾類(lèi)蔬菜的實(shí)例去進(jìn)一步探討未來(lái)的色譜法檢測(cè)農(nóng)藥殘留的一些注意事項(xiàng)和經(jīng)驗(yàn)。

1.茶葉中的啶蟲(chóng)脒測(cè)定。因?yàn)椴枞~由于種類(lèi)比較多，而且產(chǎn)地不同，所以農(nóng)藥殘留在茶葉上對(duì)于茶葉的品質(zhì)有很大的影響，因此，就需要用高效液相色譜法來(lái)檢測(cè)。第一步：先將茶葉中的試樣提取出來(lái)，主要方式有震蕩提取法，索式提取法等。然后進(jìn)行凈化，排除實(shí)驗(yàn)中的干擾物質(zhì)，如果還是不能滿足實(shí)驗(yàn)要求，就需要再進(jìn)行濃縮，啶蟲(chóng)脒作為一種堿性殺蟲(chóng)劑，作用速度較快，因此在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中要設(shè)定好合適的色譜條件，嚴(yán)格按照高效液相色譜法的相關(guān)操作流程，在最后的萃取過(guò)程中，要進(jìn)行數(shù)據(jù)積分處理，利用PCA投影法進(jìn)行初步探測(cè)。要想獲得更為理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)論，需要在實(shí)驗(yàn)的數(shù)據(jù)處理分析，色譜處理?xiàng)l件上創(chuàng)新。

2.啶蟲(chóng)脒在普通蔬菜中的殘留測(cè)定。蔬菜是生活中不可或缺的東西，所以對(duì)蔬菜中的含量進(jìn)行研究是十分必要的，主要實(shí)驗(yàn)步驟是：嚴(yán)格設(shè)置色譜分析條件、純樣本的制備、凈化?；厥?。然后分析其方法線性關(guān)系來(lái)確定回收率，再用最低檢出量計(jì)算最低檢出質(zhì)量分?jǐn)?shù)，利用高效液相色譜法測(cè)定蔬菜中的啶蟲(chóng)脒既簡(jiǎn)單有快捷，而且計(jì)量比較準(zhǔn)確，還可以進(jìn)行定量分析。

3.啶蟲(chóng)脒在西紅柿中的殘留測(cè)定。由于啶蟲(chóng)脒的組織滲透性較強(qiáng)，所以在種植西紅柿瓜的時(shí)候一般不采用含有該成分的農(nóng)藥，但是從理論上檢測(cè)西紅柿中的啶蟲(chóng)脒含量也是可以的，在實(shí)驗(yàn)的過(guò)程中，如果要考慮西紅柿汁對(duì)于實(shí)驗(yàn)的影響，可能要多一道工序就是二次取樣。五、結(jié)語(yǔ)。啶蟲(chóng)脒在農(nóng)藥中的使用已經(jīng)非常普遍，為了保證人們食用的安全，再一步提高生活質(zhì)量和健康水平。針對(duì)這種情況以及目前我國(guó)使用農(nóng)藥的泛濫，當(dāng)下迫在眉睫的就是完善農(nóng)藥檢測(cè)的相關(guān)法規(guī)和條例，然后國(guó)家要有相關(guān)的政策支持地方或者企業(yè)去研究檢測(cè)的手段和技術(shù)問(wèn)題。

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