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        心肌梗死大鼠趨化因子CXC配體5表達及辣椒素的心臟保護作用

        2019-07-01 03:52:34曹翔李晶于海濤于海波薛晴
        中國老年學(xué)雜志 2019年12期
        關(guān)鍵詞:血清模型

        曹翔 李晶 于海濤 于海波 薛晴

        (佳木斯大學(xué) 1第一附屬醫(yī)院,黑龍江 佳木斯 154002;2基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;3基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院2016級臨床醫(yī)學(xué)7班)

        由各種原因形成冠狀動脈內(nèi)閉塞而致心肌持久嚴(yán)重的缺血缺氧,造成心肌細(xì)胞壞死、凋亡,從而表現(xiàn)為心肌梗死(MI)。而壞死后的心肌細(xì)胞通常會釋放多種細(xì)胞因子,同時伴隨炎細(xì)胞浸潤和趨化等現(xiàn)象。也可以說,MI進展的關(guān)鍵決定因素之一就是炎癥反應(yīng)。而實質(zhì)為蛋白質(zhì)的趨化因子在炎癥反應(yīng)發(fā)生時可誘導(dǎo)炎細(xì)胞浸潤、定向遷移和活化,促進血管新生。本研究觀察MI建模成功后大鼠血清及心肌趨化因子CXC配體(CXCL)5表達變化并分析辣椒素的心肌細(xì)胞保護作用。

        1 材料與方法

        1.1實驗動物與飼養(yǎng)環(huán)境 經(jīng)佳木斯大學(xué)倫理委員會批準(zhǔn),30只健康雄性成年 Sprague-Dawlay 大鼠來自哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心〔SYXK(黑) 2015-001〕,依隨機數(shù)字原則分為假手術(shù)組、模型組、辣椒素組各10只,均給予相同喂養(yǎng)時間,普通飲食,飲水自由,實驗室溫度維持在26℃左右并通風(fēng)良好。

        1.2儀器和主要試劑 成都泰盟公司生產(chǎn)的小動物呼吸機及BL-420F生物機能實驗系統(tǒng);哈藥集團生產(chǎn)的注射用青霉素;天津市大茂化學(xué)試劑廠的水合氯醛;美國ADL公司生產(chǎn)的CXCL5 試劑盒;辣椒素購自武漢紅禾杉生物科技有限公司;全自動生化分析儀等。

        1.3動物分組與模型制備 假手術(shù)組:手術(shù)線只穿過左冠狀動脈前降支,不結(jié)扎,行生理鹽水灌胃;模型組:結(jié)扎前降支,生理鹽水灌胃;辣椒素組:穿線并結(jié)扎左冠狀動脈前降支后用辣椒素灌胃,濃度10 mg/L,劑量0.4 ml。每組灌胃4 w,按照0.1 ml/kg計算用量。具體造模操作步驟:經(jīng)腹腔用水合氯醛(4%)麻醉,按照0.5 ml/100 g劑量,剪毛備好皮后固定(仰臥位)于手術(shù)臺上,同時連接引導(dǎo)電極描記心電圖曲線,開胸前的準(zhǔn)備工作是經(jīng)口氣管插管,并與小動物呼吸機相連,調(diào)節(jié)好潮氣量和呼吸頻率??蓮?、5 肋間隙(左側(cè))打開胸腔暴露心臟,結(jié)扎前要破壞心包膜,防止心包積液發(fā)生,后結(jié)扎前降支(左冠狀動脈),可見心尖顏色由鮮紅轉(zhuǎn)為白色,心電圖變化是ST段抬高明顯〔1〕。見圖1。

        圖1 模型組心電圖示ST段顯著抬高

        1.4描記心電圖 用成都泰盟公司的BL-420F生物機能實驗系統(tǒng)進行,麻醉穩(wěn)定后固定好,大鼠四肢用1 ml注射器針頭插入,后連接相應(yīng)顏色電極(右上肢-白色;左下肢-紅色;右下肢-黑色)。

        1.5血清及心肌CXCL5表達 每組均收集血清和心肌組織,酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測CXCL5表達變化,依據(jù)試劑盒說明嚴(yán)格進行操作。

        1.6統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS15.0軟件進行單因素方差分析。

        2 結(jié) 果

        模型組CXCL5水平較假手術(shù)組明顯增加;而辣椒素組較模型組顯著降低(P<0.05),見表1。

        表1 各組血清及心肌CXCL5水平

        與假手術(shù)組比較:1)P<0.05;與辣椒素組比較:2)P<0.05

        3 討 論

        MI發(fā)病主要機制是血管內(nèi)皮損傷及功能失常,而血栓形成或心肌細(xì)胞壞死多是由于炎細(xì)胞及因子的釋放刺激血管壁,加速了斑塊的不穩(wěn)定及管壁硬化〔2~4〕。而趨化因子可以激活和募集梗死組織中中性粒細(xì)胞〔5〕。在炎癥反應(yīng)級聯(lián)激活放大過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用的是趨化因子介導(dǎo)炎癥細(xì)胞激活、浸潤與細(xì)胞表面的受體結(jié)合發(fā)揮作用〔6,7〕。其中,CXCL5在細(xì)胞凋亡、生長、發(fā)育等過程中發(fā)揮重要作用,有學(xué)者研究證實,CXCL5不僅具有粒細(xì)胞趨化,還可以促進血管生成,促進和誘導(dǎo)炎癥反應(yīng)的發(fā)生〔8〕。本研究結(jié)果說明MI發(fā)生和病情進展與CXCL5高表達密切相關(guān)。分析可能與CXCL5促進炎癥反應(yīng)有關(guān)。在心電導(dǎo)聯(lián)中ST段抬高是由于心室去極后,健康心肌和受損心肌間存在電位差,有電荷移動而形成的,并且抬高的幅度決定了缺血程度。本研究結(jié)果符合缺血心肌受損心電圖的表現(xiàn)。作為生物堿的辣椒素是辣椒中主要成分之一〔9〕,其具有強抗氧化作用,在鎮(zhèn)痛〔10〕、止痛〔11〕、止癢、癌癥預(yù)防〔12〕、關(guān)節(jié)炎〔13〕、戒毒、減肥等疾病中發(fā)揮了特殊作用。本研究結(jié)果表明,辣椒素作用于瞬時感受器電位離子通道蛋白(TRPV)1受體這個靶點,在高溫條件下抑制膽固醇生成有害有毒物質(zhì)及加快分解和排泄方式減少毒物堆積,促進血液循環(huán)。辣椒素還具有心臟保護作用,如增加血流量和心肌收縮能力。辣椒素可作為新型心肌細(xì)胞保護藥物。綜上,血清和心肌中CXCL5濃度變化與MI病情進展密切相關(guān),可作為臨床診斷和病程評估的重要依據(jù)。辣椒素有望成為全新的改善心功能藥物。

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