黃守敏 胡向奇
(安慶職業(yè)技術(shù)學(xué)院, 安徽 安慶 246003)
在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中,為了防治植物病蟲(chóng)害,保證和提高農(nóng)作物產(chǎn)量,經(jīng)常需要用到農(nóng)藥。過(guò)度使用化學(xué)農(nóng)藥,對(duì)農(nóng)作物、土地、水源等會(huì)造成不良影響。利用植物資源開(kāi)發(fā)的植物性農(nóng)藥(俗稱(chēng)“中草藥農(nóng)藥”)能在自然界降解,一般不會(huì)污染環(huán)境及農(nóng)產(chǎn)品,對(duì)人和牲畜相對(duì)安全。因此,研究開(kāi)發(fā)植物性農(nóng)藥意義重大。
可以用于配制農(nóng)藥的植物種類(lèi)很多。本次研究,通過(guò)室內(nèi)實(shí)驗(yàn),主要測(cè)試分析了草木犀(Melilotus officinalis)、竹葉花椒(Zanthoxylum armatum)、水蘇(Stachys japonica)、馬蹄金(Dichondra repens)、衛(wèi)矛(Euonymus alatus)、小竊衣(Torilis japonica)、刻葉紫堇(Corydalis incisa)、齒果酸模(Rumex dentatus)等8種植物的粗提物,對(duì)小菜蛾(Plutella xylostella)、柑橘紅蜘蛛(Panonychus citri)、桃蚜(Myzus persicae)、玉米象(Sitophilus zeamais)等4種植物害蟲(chóng)的毒殺及驅(qū)避效果。
實(shí)驗(yàn)用儀器主要有:Gzx-9076 MBE型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱,BIC-300智能人工氣候培養(yǎng)箱,GZP-250 s光照培養(yǎng)箱,F(xiàn)W135中草藥粉碎機(jī),IKA?RV10旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,BSM420.3電子天平。
實(shí)驗(yàn)用試劑:濃度為95%的乙醇。
供試生物:小菜蛾,采自安慶市郊區(qū)菜地,放入智能人工氣候箱里飼養(yǎng)。對(duì)成蟲(chóng)給予10%的蜂蜜水作為補(bǔ)充營(yíng)養(yǎng),對(duì)幼蟲(chóng)每天給予適量新鮮的甘藍(lán)葉片,飼養(yǎng)2~3代后用于供試。柑橘紅蜘蛛、桃蚜、玉米象均采自安慶市周邊,分別飼養(yǎng)2~3代后用于供試。飼養(yǎng)箱的溫度設(shè)置為25 ℃,濕度維持在60%以上;光周期為12 h光照12 h黑暗。
試驗(yàn)所用草木犀、竹葉花椒、水蘇、馬蹄金、衛(wèi)矛、小竊衣、刻葉紫堇、齒果酸模等8種植物,采自安徽省西南地區(qū)。供試部分為這幾種植物的葉片。
1.2.1 粗提物的制備
將供試的新鮮植物葉片洗凈烘干,用粉碎機(jī)粉碎,然后過(guò)40目篩。取一定量的植物葉片干粉放入玻璃容器中,加入2倍體積的無(wú)水乙醇,在室溫避光條件下浸泡4 d,然后過(guò)濾。去除殘?jiān)蟮玫降臑V液,在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中蒸餾(50 ℃,100 rmin),獲得植物粗提物浸膏。待浸膏干燥后用電子天平稱(chēng)重,并避光保存于4 ℃的冰箱中備用[1-2]。
1.2.2 粗提物的毒力測(cè)定
(1) 測(cè)試水蘇、竹葉花椒和草木犀提取物對(duì)柑橘紅蜘蛛的毒殺作用。將這3種植物粗提物浸膏用清水稀釋?zhuān)謩e配成5種不同濃度(質(zhì)量濃度)的稀釋液。水蘇浸膏稀釋液的5種濃度為3.5、1.75、0.875、0.438、0.219 gmL;竹葉花椒浸膏稀釋液的 5種濃度為2、1、0.5、0.25、0.125gmL;草木犀浸膏稀釋液的5種濃度為1、0.5、0.25、0.125、0.0625 gmL。設(shè)清水對(duì)照。將新鮮柑橘葉片洗凈晾干,與供試的柑橘紅蜘蛛一起,放入提取物的不同濃度稀釋液中浸漬5 s,然后將試蟲(chóng)與葉片一起放入培養(yǎng)皿。在培養(yǎng)24、48、72 h后,檢查死亡蟲(chóng)數(shù)[1-3]。每種濃度的稀釋液測(cè)試均進(jìn)行3次,每個(gè)培養(yǎng)皿中均放入10只試蟲(chóng)。
(2) 測(cè)試水蘇、草木犀、竹葉花椒、馬蹄金、衛(wèi)矛和小竊衣提取物對(duì)桃蚜的毒殺作用。將這6種植物的提取物,分別用清水稀釋?zhuān)涑?種濃度的稀釋液。其中,竹葉花椒、馬蹄金、衛(wèi)矛和小竊衣提取物稀釋液的5種濃度為1、0.5、0.25、0.125、0.0625 gmL;水蘇和草木犀提取物稀釋液的5種濃度為10、5、2.5、1.25、0.625 gmL。設(shè)清水對(duì)照。新鮮桃葉洗凈晾干,與供試的桃蚜一起,分別放入不同濃度的稀釋液中浸漬5 s,然后連蟲(chóng)帶葉放入培養(yǎng)皿。在培養(yǎng)24、48、72 h后,檢查死亡蟲(chóng)數(shù)[1-3]。每種濃度的稀釋液測(cè)試均進(jìn)行3次,每個(gè)培養(yǎng)皿中均放入10只試蟲(chóng)。
(3) 測(cè)試竹葉花椒、草木犀、小竊衣、刻葉紫堇和齒果酸模提取物對(duì)小菜蛾的毒殺作用。采用小葉碟添加法。將這5種植物提取物,分別用清水稀釋?zhuān)髋涑?個(gè)梯次濃度(10、5、2.5、1.25、0.625 gmL)的稀釋液。設(shè)清水對(duì)照。分別測(cè)試5種植物粗提物對(duì)小菜蛾3齡幼蟲(chóng)的毒殺活性。采集新鮮的甘藍(lán)葉片,剪成小葉(1cm×1cm),放入供試植物提取液中浸漬2~3 s,取出自然晾干,放入塑料培養(yǎng)盒(H=7.5 cm,D=5 cm)中,接入已饑餓4 h的試蟲(chóng)。待處理24、48、72 h后檢查結(jié)果,并計(jì)算LC50和毒力回歸方程[2,4-5]。每種濃度的稀釋液測(cè)試均進(jìn)行3次,每個(gè)培養(yǎng)盒中均放入10只3齡小菜蛾。
(4) 測(cè)試水蘇、草木犀、小竊衣、刻葉紫堇和齒果酸模提取物對(duì)玉米象成蟲(chóng)的驅(qū)避作用。將水蘇提取物用清水稀釋?zhuān)涑?.8、3.4、1.7、0.85、0.425 gmL等5個(gè)濃度梯次的稀釋液;草木犀、小竊衣、刻葉紫堇、齒果酸模等4種植物提取物,均稀釋配成1、0.5、0.25、0.125、0.0625 gmL等5個(gè)濃度梯次的稀釋液。將10 g已消毒的無(wú)蟲(chóng)整粒小麥放入直徑為 6 cm的培養(yǎng)皿中,按每皿0.5 mL的用量滴入不同濃度的植物提取液并用手搖勻,再將上述培養(yǎng)皿放入同一塑料盒中。每個(gè)塑料盒中均放入15日齡左右的玉米象成蟲(chóng)20只,蓋好盒子,用深藍(lán)色布遮光,讓試蟲(chóng)在黑暗條件下自然分散。待接蟲(chóng)24、48、72 h后,檢查成蟲(chóng)分布情況,然后計(jì)算驅(qū)避率[6]。每種濃度的稀釋液測(cè)試均進(jìn)行3次。設(shè)清水對(duì)照。
運(yùn)用SPSS20.0軟件,求出毒力回歸方程、LC50值、相關(guān)系數(shù)(r)及95%置信區(qū)間。
水蘇、竹葉花椒和草木犀3種植物粗提物,對(duì)柑橘紅蜘蛛的毒力活性,室內(nèi)測(cè)試72 h后的情況如表1所示。這3種植物提取物對(duì)紅蜘蛛均表現(xiàn)出較好的毒殺活性。與竹葉花椒、草木犀相比,水蘇提取物對(duì)紅蜘蛛的毒殺效果更為明顯。
表1 水蘇等3種植物提取物對(duì)柑橘紅蜘蛛的毒力測(cè)定結(jié)果
水蘇、竹葉花椒、草木犀、馬蹄金、衛(wèi)矛和小竊衣等6種植物粗提物對(duì)蚜蟲(chóng)的毒力活性,室內(nèi)測(cè)試 72 h的結(jié)果如表2所示。這6種植物提取物對(duì)桃蚜均表現(xiàn)出較好的毒殺活性。其中,小竊衣提取物對(duì)蚜蟲(chóng)的毒殺效果更為明顯。
竹葉花椒、草木犀、小竊衣、刻葉紫堇、齒果酸模等5種植物粗提物對(duì)小菜蛾的毒力活性,室內(nèi)測(cè)試72 h的結(jié)果如表3所示。竹葉花椒、小竊衣提取物對(duì)小菜蛾表現(xiàn)出相似的毒殺活性,齒果酸模提取物對(duì)小菜蛾的毒殺效果更為明顯。
表2 小竊衣等6種植物提取物對(duì)桃蚜的毒力測(cè)定結(jié)果
表3 齒果酸模等5種植物提取物對(duì)小菜蛾的毒力測(cè)定結(jié)果
水蘇、竹葉花椒、草木犀、馬蹄金、衛(wèi)矛、小竊衣等6種植物粗提物對(duì)玉米象成蟲(chóng)的驅(qū)避作用,室內(nèi)測(cè)試的結(jié)果如表4所示。這6種植物提取物對(duì)玉米象成蟲(chóng)均表現(xiàn)出較好的驅(qū)避活性。其中,衛(wèi)矛提取物對(duì)玉米象成蟲(chóng)有明顯的驅(qū)避作用。
表4 衛(wèi)矛等6種植物提取物對(duì)玉米象的毒力測(cè)定結(jié)果
注:棲息蟲(chóng)數(shù)為3次重復(fù)的總棲息數(shù)。
隨著生活水平的提高,人們對(duì)農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性要求越來(lái)越嚴(yán)格,對(duì)農(nóng)藥的安全使用非常重視。與化學(xué)農(nóng)藥相比,植物性農(nóng)藥對(duì)環(huán)境友好、安全性較高,具有更廣闊的開(kāi)發(fā)前景。本次通過(guò)室內(nèi)實(shí)驗(yàn),測(cè)試了采自安徽省西南地區(qū)的8種植物的粗提物的殺蟲(chóng)活性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,草木犀、竹葉花椒、水蘇、馬蹄金、衛(wèi)矛、小竊衣、刻葉紫堇和齒果酸模的粗提物都具有一定的殺蟲(chóng)作用。比較而言,水蘇提取物對(duì)紅蜘蛛的毒殺效果較好,小竊衣提取物對(duì)蚜蟲(chóng)的毒殺效果較好,齒果酸模提取物對(duì)小菜蛾的毒殺效果較好,衛(wèi)矛提取物對(duì)玉米象成蟲(chóng)有比較明顯的驅(qū)避作用。