肖 琎，董李學(xué)，張 鑫，周 鑫，李愛軍，鄭百芹

(1.唐山市食品藥品綜合檢驗檢測中心，河北唐山 063000；2.河北省農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測技術(shù)創(chuàng)新中心，河北唐山 063000)

犢牛斷奶前的干物質(zhì)采食量和日增重對犢牛生長發(fā)育、瘤胃發(fā)育和終生產(chǎn)奶量密切相關(guān)（Soberon等，2012）。犢牛哺乳期間，單純依靠采食牛乳不僅不能滿足生長發(fā)育的營養(yǎng)需要，而且不利于瘤胃發(fā)育，可能引起瘤胃角質(zhì)化不全，進(jìn)而影響瘤胃上皮細(xì)胞對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收（吳志強(qiáng)，2016）。開食料可以給犢牛提供充分的營養(yǎng)物質(zhì)，促進(jìn)生長發(fā)育和瘤胃發(fā)育（張乃峰等，2010）。近年來研究表明，犢牛開食料中補(bǔ)充優(yōu)質(zhì)的干草可以增加犢牛干物質(zhì)采食量和日增重，促進(jìn)瘤胃發(fā)育和瘤胃微生物區(qū)系的建立，促進(jìn)犢牛生長，然而關(guān)于犢牛開食料中苜蓿干草添加量的研究相對較少且無定論（Coverdale等，2014；Castells等，2012；Hill等，2010）。因此，本試驗旨在研究比較開食料中添加不同水平的苜蓿干草對犢牛生長發(fā)育、營養(yǎng)物質(zhì)消化率和瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響，為開食料中苜蓿干草的適宜添加量提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗時間與地點(diǎn) 于2018年3月至2018年6月在某奶牛場進(jìn)行本次試驗。

1.2 試驗動物與飼養(yǎng)管理 試驗選擇45頭剛出生的中國荷斯坦母犢牛，于出生后1 h內(nèi)灌服4 L初乳，6 h后再次灌服4 L初乳。犢牛出生后第2天，每天飼喂兩次常乳，每次2 L。犢牛出生后第3天，將犢牛轉(zhuǎn)移到犢牛島，單籠飼養(yǎng)。犢牛3～10日齡，每天飼喂兩次常乳，每次2 L；犢牛11～50日齡，每天飼喂兩次常乳，每次3 L；犢牛51～60日齡，每天飼喂一次常乳，每次2 L；在61～80日齡停止飼喂常乳，僅飼喂開食料。犢牛7日齡開始飼喂開食料，犢牛14日齡，開食料中開始添加苜蓿干草。犢牛自由采食開食料和自由飲水。

1.3 試驗設(shè)計 將45頭剛出生的中國荷斯坦母犢牛按照體重進(jìn)行分組，采用完全隨機(jī)區(qū)組設(shè)計，將犢牛分配到3個處理組中，每組15頭犢牛。對照組犢牛開食料中不添加苜蓿干草，試驗組Ⅰ犢牛開食料中添加10%苜蓿干草（干物質(zhì)基礎(chǔ)），試驗組Ⅱ犢牛開食料中添加20%苜蓿干草（干物質(zhì)基礎(chǔ)）。

表1 開食料原料組成及營養(yǎng)水平（干物質(zhì)基礎(chǔ)）

1.4 試驗日糧 犢牛開食料的原料組成及營養(yǎng)水平見表1所示。苜蓿干草進(jìn)行切割處理，平均長度為3.5 mm，苜蓿干草長度分布如下：長度＞ 18 mm，1.5±0.4%；長度 8～18 mm，（25.0±2.5）% ； 長 度 1.18 ～ 8 mm，（36.2±1.2）%，長度＜ 1.18 mm，（37.3±0.5）%。

1.5 樣品采集與試驗指標(biāo)測定

1.5.1 干物質(zhì)采食量與犢牛體重測定 每天記錄犢牛開食料的采食量（稱量投料量和第二天早晨飼喂前的剩料量進(jìn)行計算）。分別于犢牛出生（1日齡）、斷奶（60日齡）和試驗結(jié)束（80日齡），在早晨飼喂?fàn)倥Ｇ?，稱量犢牛體重。結(jié)合牛乳的干物質(zhì)含量和開食料的干物質(zhì)含量，計算日均干物質(zhì)采食量和飼喂效率（增重/試驗天數(shù)）。

1.5.2 開食料樣品采集與營養(yǎng)成分測定 每隔10 d收集一次開食料樣品，放于-20℃冰箱保存，待試驗結(jié)束后將所有的開食料樣品解凍均勻混合，于65℃條件下烘48 h后制成風(fēng)干樣品，粉碎后過1 mm篩，按照四分法取樣，保存待測。營養(yǎng)成分測定指標(biāo)包括干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、鈣、總磷（AOAC，1990）和中性洗滌纖維（Van Soest，1991）。

1.5.3 消化試驗 于試驗最后3 d采用全收糞法，通過直腸取糞收集糞便，進(jìn)行消化試驗。測定開食料和糞便中的酸不溶灰分作為內(nèi)源指示劑（Van Keulen和 Young，1977），測定營養(yǎng)物質(zhì)消化率。

1.5.4 瘤胃液采集與發(fā)酵參數(shù)測定 于犢牛斷奶（60日齡）和試驗結(jié)束（80日齡），在早晨犢牛采食開食料3 h后使用瘤胃插管法取瘤胃液，使用4層紗布過濾，立即測定瘤胃液pH。另取10 mL瘤胃液，加入25%偏磷酸3 mL，于-20℃保存待測。使用氣相色譜法測定瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸濃度和乙酸、丙酸、丁酸濃度。

2 試驗結(jié)果

2.1 不同水平苜蓿添加量對犢牛生長性能的影響 試驗結(jié)果見表2所示。由表2可以看出，各組犢牛出生體重和斷奶體重差異不顯著（P＞0.05）。試驗組Ⅱ和試驗組Ⅰ犢牛的結(jié)束體重分別比對照組高6.25%和2.95%（P＜0.05），試驗組Ⅱ犢牛的結(jié)束體重比試驗組Ⅰ高3.21%（P＜0.05）。開食料中苜蓿干草的添加量對犢牛斷奶前的平均日增重?zé)o顯著影響（P＞0.05），顯著提高了犢牛斷奶后和試驗全期的平均日增重（P＜0.05），以試驗組Ⅱ犢牛具有最大的平均日增重（P＜0.05）。開食料中添加不同含量的苜蓿干草對犢牛斷奶前的總干物質(zhì)采食量無顯著影響（P＞0.05），顯著提高了犢牛斷奶后和全試驗期的總干物質(zhì)采食量（P＜0.05）。試驗全期，試驗組Ⅱ和試驗組Ⅰ犢牛的總干物質(zhì)采食量分別比對照組高38.04%和28.26%（P＜0.05），試驗組Ⅱ犢牛的總干物質(zhì)采食量比試驗組Ⅰ高7.63%（P＜0.05）。犢牛開食料中添加不同水平的苜蓿干草對犢牛斷奶前、斷奶后和全試驗期的飼喂效率無顯著影響（P＞0.05）。

表2 不同水平苜蓿添加量對犢牛生長性能的影響

表4 不同水平苜蓿添加量對犢牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響

2.2 不同水平苜蓿添加量對犢牛日糧營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率的影響 試驗結(jié)果見表3所示。由表3可以看出，犢牛開食料中添加不同水平的苜蓿干草對犢牛日糧干物質(zhì)、有機(jī)物、粗蛋白質(zhì)和中性洗滌纖維的含量無顯著影響（P＞0.05）。

表3 不同水平苜蓿添加量對犢牛日糧營養(yǎng)物質(zhì)?????????????表觀消化率的影響???????????%

2.3 不同水平苜蓿添加量對犢牛瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響 試驗結(jié)果見表4所示。由表4可以看出，犢牛開食料中添加不同水平的苜蓿干草對斷奶犢牛和斷奶后犢牛的瘤胃液pH具有顯著影響（P＜0.05）。犢牛斷奶時，試驗組Ⅱ和試驗組Ⅰ犢牛瘤胃液pH分別比對照組高21.80%和9.40%（P＜0.05），試驗組Ⅱ犢牛瘤胃液pH比試驗組Ⅰ高11.34%（P＜0.05）。犢牛斷奶20 d后，試驗組Ⅱ和試驗組Ⅰ犢牛瘤胃液pH分別比對照組高20.81%和9.39%（P＜0.05），試驗組Ⅱ犢牛瘤胃液pH比試驗組Ⅰ高10.44%（P＜0.05）。犢牛開食料中添加不同水平的苜蓿干草對犢牛瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸濃度、乙酸濃度、丙酸濃度、丁酸濃度無顯著影響（P＞0.05）。犢牛斷奶時，開食料中添加不同水平的苜蓿干草有提高瘤胃液乙酸/丙酸的趨勢（P=0.08）；在犢牛斷奶20 d后，在開食料中添加不同水平的苜蓿干草顯著提高了犢牛瘤胃液乙酸/丙酸（P＜0.05）。試驗組Ⅱ犢牛和試驗組Ⅰ犢牛的瘤胃液乙酸/丙酸分別比對照組奶牛高12.35%和18.52%（P＜0.05），試驗組Ⅱ犢牛和試驗組Ⅰ犢牛的瘤胃液乙酸/丙酸無顯著差異（P＞0.05）。

3 討論

3.1 不同水平苜蓿添加量對犢牛生長性能的影響 Hill等（2010）研究結(jié)果表明，斷奶犢牛開食料中添加干草降低了平均日增重。Coverdale等（2004）研究開食料類型和無芒雀麥干草添加量對犢牛生長性能的影響發(fā)現(xiàn)，在犢牛開食料中添加7.5%和15%的干草可以顯著提高犢牛斷奶前和斷奶后的體重，顯著提高犢牛斷奶后和全試驗期的平均日增重，顯著提高犢牛斷奶后的飼喂效率，而7.5%和15%干草添加組犢牛只有斷奶后平均日增重差異顯著，其他指標(biāo)差異不顯著，犢牛開食料中添加不同水平的干草對瘤胃液揮發(fā)性脂肪酸濃度無顯著影響。Beiranvand等（2014）、王立斌（2013）、Castells等（2012）、Khan等（2011）研究結(jié)果表明，犢牛開食料中添加苜蓿干草顯著增加了犢牛斷奶后的干物質(zhì)采食量和日增重。本試驗中，犢牛開食料中添加10%和20%的苜蓿干草顯著增加了犢牛體增重和干物質(zhì)采食量，而且與添加劑量呈線性相關(guān)，本試驗結(jié)果與EbnAli等（2016）的研究結(jié)果類似。EbnAli等（2016）研究發(fā)現(xiàn)，犢牛開食料中添加10%的苜蓿干草顯著增加斷奶前和斷奶后的干物質(zhì)采食量，而對平均日增重?zé)o顯著影響。而Nemati等（2016）的研究結(jié)果表明，犢牛開食料中添加12.5%和25%的苜蓿干草顯著提高犢牛的干物質(zhì)采食量，增加日增重。本試驗中，犢牛開食料中苜蓿干草添加到20%時，顯著增加犢牛的干物質(zhì)采食量和日增重，與Nemati等（2016）的結(jié)果類似。研究發(fā)現(xiàn)，開食料的不同類型、原料組成、干草來源和長度大小均會影響犢牛的生長性能（Mirzaei等，2015），這可能是影響犢牛開食料中干草添加劑量的因素。本試驗中，苜蓿干草的添加劑量達(dá)干物質(zhì)基礎(chǔ)的20%對犢牛的生長性能具有顯著的改善作用。

3.2 不同水平苜蓿添加量對犢牛日糧營養(yǎng)物質(zhì)消化率和瘤胃發(fā)酵參數(shù)的影響 EbnAli等（2016）研究指出，犢牛開食料中添加10%的苜蓿干草對日糧營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率無顯著影響。本試驗得到了類似的試驗結(jié)果，犢牛開食料中添加10%和20%的苜蓿干草均對犢牛日糧的營養(yǎng)物質(zhì)表觀消化率無顯著影響。這一結(jié)果對應(yīng)了犢牛開食料中添加苜蓿并不能提高犢牛的飼喂效率（Mirzaei等，2015；Terré 等，2013；Castells等，2012）。本試驗中，開食料中添加10%和20%的苜蓿干草顯著提高了犢牛斷奶時和斷奶后的瘤胃液pH，而且與添加劑量呈線性相關(guān)。這一結(jié)果與（Nemati等，2016；王立斌，2013；Castells等，2012；Khan等，2011）瘤胃液pH與瘤胃微生物對有機(jī)物的發(fā)酵速度有關(guān)。研究表明，犢牛早期采食粗飼料可以增加瘤胃微生物種類和數(shù)量。因此，犢牛開食料中添加苜?？赡芡ㄟ^改變瘤胃微生物區(qū)系調(diào)節(jié)瘤胃pH。此外，苜蓿干草與開食料相比，可以增加犢牛咀嚼時間和采食頻率，使進(jìn)入瘤胃的唾液增加，中和瘤胃液部分酸，提高瘤胃液pH。本試驗中，開食料中添加不同水平的苜蓿并沒有改變瘤胃液總揮發(fā)性脂肪酸濃度，這與Nemati等（2016）、Terré 等（2013） 和 Suárez等（2007）的研究結(jié)果一致。而王立斌（2013）研究發(fā)現(xiàn)，給犢牛飼喂苜蓿干草顯著提高了瘤胃液乙酸濃度。本試驗中，犢牛開食料中并沒有增加瘤胃液乙酸濃度，但顯著提高了乙酸/丙酸，這一結(jié)果與 Nemati等（2016）、Castells等（2012）和Yang等（2001）的研究結(jié)果類似。瘤胃液中乙酸發(fā)酵主要來源于粗飼料和纖維分解菌的分解作用，低pH抑制纖維分解菌活性和數(shù)量，降低乙酸與丙酸比例（Grant等，1990）。

在王立斌（2013）的試驗中，苜蓿干草單獨(dú)飼喂?fàn)倥?，而在本試驗中苜蓿干草是切短后與開食料混合，兩者對瘤胃pH的影響不同，可能會造成瘤胃纖維分解菌數(shù)量不同，進(jìn)而引起乙酸濃度差異。

4 結(jié)論

本試驗結(jié)果表明，在犢牛開食料中添加經(jīng)過切短的苜蓿干草可以顯著提高犢牛的生長性能，改善瘤胃發(fā)酵功能，苜蓿干草的添加量可以達(dá)到20%。