姚興海

[摘 要]隨著人們生活水平的提高，綠色通道高速公路的普及，交通越來越便利，冷鮮肉尤其是托盤薄膜包裝冷鮮肉的消費日趨上升和普及。冷鮮肉的品質(zhì)安全問題逐漸成為人們關(guān)注的焦點。目前，國內(nèi)的研究主要集中在冷鮮肉初始菌相分析、保鮮劑優(yōu)選、優(yōu)勢腐敗菌確定、復(fù)合保鮮技術(shù)應(yīng)用、包裝方式改進(jìn)等方面。國外對冷鮮肉的腐敗研究起步比較早，發(fā)展較快。保鮮劑的選擇多源于多酚類物質(zhì)、葡萄籽提取物和氧化物酶體系等天然保鮮劑。氣調(diào)包裝在達(dá)到抑制微生物生長的同時，還要綜合考慮肉制品色澤等感官品質(zhì)等指標(biāo)。除了研究微生物生長的基本變化規(guī)律之外，還要綜合研究肉類腐敗過程中微生物之間的交互作用，并從微生物相關(guān)的代謝機理方面深入探討導(dǎo)致肉制品腐敗的原因。

[關(guān)鍵詞] 冷鮮肉;微生物;腐敗

[中圖分類號]TS251.6 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼]A

冷鮮肉在分割、加工、運輸和零售過程中由于營養(yǎng)豐富、水分活度高極易遭受周圍環(huán)境微生物的污染，冷鮮肉腐敗變質(zhì)就是微生物增殖代謝作用的結(jié)果;微生物的大量繁殖是引起冷鮮肉腐敗的最直接原因，冷鮮肉的腐敗除了使蛋白質(zhì)和脂肪等營養(yǎng)物質(zhì)發(fā)生一系列變化外，其色澤由鮮紅、暗紅變成暗褐甚至墨綠，失去光澤，表面發(fā)粘，產(chǎn)生腐敗變質(zhì)的臭氣，甚至長霉，腐敗的肉品完全失去了加工和食用價值。目前我國對冷鮮肉的衛(wèi)生指標(biāo)，通常認(rèn)為冷鮮肉的細(xì)菌總數(shù)達(dá)到106 cfu/g時為警戒線，而達(dá)到107 cfu/g時冷鮮肉外觀有明顯的腐敗現(xiàn)象，而達(dá)到108 cfu/g時外表有粘液形成，不能食用。

1 冷鮮肉中的主要致腐微生物

一般健康禽類冷鮮肉的內(nèi)部組織中并無腐敗菌存在，它對微生物的入侵有一定的防御機制。屠宰過程使得其自身的防御受到破壞，而且肌肉組織具有豐富的營養(yǎng)以及高的水分活度，肉與外界環(huán)境接觸也增大了微生物污染的可能性;皮毛、排泄物、淋巴結(jié)、創(chuàng)傷口，以及屠宰加工過程中的加工設(shè)備、冷藏溫度、運輸條件等環(huán)境因素都會導(dǎo)致冷鮮肉品的微生物污染。一直處于冷鮮肉中的微生物一般分為病原菌和腐敗菌，前者一般源于禽畜肉本身，如禽肉中的空腸彎曲桿菌（Campylobacter jejuni），而后者一般來自于周圍環(huán)境。冷鮮肉中常見的腐敗菌有：假單胞菌屬（Pseudomonas spp.），莫拉氏菌屬（Moraxella），不動桿菌屬（Acinetobacter），氣單胞菌屬（Aeromonas）和兼性厭氧的腸桿菌科（Enterobacteriaceae），以及革蘭氏陽性的葡萄球菌屬（Staphylococcus），乳桿菌屬（Lactobacillus）和熱死環(huán)絲菌（Brochothrix thermosphacta）等。此外肉品中也有少量芽孢桿菌、霉菌和酵母菌，但其致腐能力較低。

假單胞菌屬是一種致腐能力比較強的好氧性嗜冷革蘭氏陰性菌。低溫高濕的環(huán)境利于假單胞菌將葡萄糖轉(zhuǎn)化為葡糖酸鹽或2-酮葡糖酸。有氧低溫貯藏條件中其數(shù)量與細(xì)菌總數(shù)非常接近。該菌能優(yōu)先利用肉品中的葡萄糖，當(dāng)細(xì)菌總數(shù)達(dá)到108 cfu/g 時，葡萄糖的供應(yīng)將不能滿足其生長需求，假單胞菌開始利用氨基酸作為生長基質(zhì)，生成具有異味的酸、酯、含硫化合物等。腐敗臭味即大多來自假單胞菌屬;假單胞菌屬中的熒光假單胞菌（Pseudomonas fluorescens）和莓實假單胞菌（Pseudomonas fragi）是最重要的肉制品腐敗菌。冷鮮肉初始菌相中的優(yōu)勢腐敗菌多為熒光假單胞菌，莓實假單胞菌因其具有較短的延滯期以及較快的生長速率而成為貯藏過程中的優(yōu)勢腐敗菌。

腸桿菌屬于兼性厭氧型細(xì)菌，但有氧條件更適宜其生長。該菌在有氧條件下可利用葡萄糖作為反應(yīng)底物，發(fā)酵葡萄糖時不會產(chǎn)生難聞的氣味，只有葡萄糖耗盡，某些氨基酸被分解才產(chǎn)生不良?xì)馕?。因而?dāng)環(huán)境條件適宜時，腸桿菌具有較強的致腐能力。

熱死環(huán)絲菌通常也被認(rèn)為是冷藏溫度下引起真空包裝肉及肉制品腐敗的主要微生物。據(jù)報道，熱死環(huán)絲菌還是引起托盤包裝冷鮮禽肉腐敗的重要微生物。熱死環(huán)絲菌可利用葡萄糖作為生長底物，在有氧的條件下生成乙酸和乙偶姻，產(chǎn)生異味，同時還能分解纈氨酸和亮氨酸，產(chǎn)生異戊酸和異丁酸;在無氧條件下，熱死環(huán)絲菌分解代謝的最終產(chǎn)物主要是乳酸及少量其他揮發(fā)性酸等酸性物質(zhì)。在有氧的環(huán)境下，假單胞菌由于生長迅速，對生長底物的競爭優(yōu)勢以及其代謝產(chǎn)物作用而成為優(yōu)勢菌;而在無氧環(huán)境中，假單胞菌生長完全受到抑制，熱死環(huán)絲菌可能成為主要腐敗菌。

乳酸菌屬隨菌齡增長和培養(yǎng)基酸度的增加由革蘭氏陽性變?yōu)殛幮?。特征性的糖分解作用，葡萄糖發(fā)酵時pH降低一個或幾個單位。5%～10%的二氧化碳常促進(jìn)它在固體培養(yǎng)基表面上的生長。生長溫度范圍為5℃～53℃，最適生長溫度一般為30℃～40℃。耐酸，最適pH通常是5.5～5.8或更低。在中性或者開始是堿性的pH環(huán)境中時，延滯期可能延長，或者總的生長量減少。乳酸菌在初期只占污染微生物總量的很小的部分。但是若在低氧的條件下，乳酸菌很快會成為優(yōu)勢菌，它利用葡萄糖產(chǎn)生乳酸，在一定程度上抑制了其他細(xì)菌的生長繁殖。當(dāng)碳水化合物耗盡后，乳酸菌利用氨基酸，產(chǎn)生揮發(fā)性脂肪酸，使得肉制品出現(xiàn)干酪味臭氣。

莫拉氏菌/不動桿菌這類微生物主要利用氨基酸作為生長基質(zhì)，但其在降解氨基酸時，并不產(chǎn)生有異味的副產(chǎn)物，因而致腐能力較低。但是當(dāng)這類微生物成為腐敗菌相的主要組成部分時，它們會增強假單胞菌和熱死環(huán)絲菌的致腐能力。這是由于莫拉氏菌 /不動桿菌競爭了環(huán)境中的氧，在缺氧狀態(tài)下，即使有葡萄糖存在，假單胞菌和熱死環(huán)絲菌仍會分解氨基酸。

2 冷鮮肉的初始微生物構(gòu)成

冷鮮肉初始微生物總數(shù)及主要構(gòu)成直接影響其腐敗速率;不同的屠宰工藝、處理方式均會影響冷鮮肉初始微生物數(shù)量及主要微生物的構(gòu)成，初始微生物總數(shù)一般在103～104 個/g左右。假單胞菌、乳酸菌、熱死環(huán)絲菌和腸桿菌是各類冷鮮肉初始微生物構(gòu)成中的主要細(xì)菌;假單胞菌和熱死環(huán)絲菌的微生物總數(shù)占優(yōu)，是各類冷鮮肉初始微生物構(gòu)成中的優(yōu)勢細(xì)菌，二者所占的比例因冷鮮肉種類的不同而有所差異;腸桿菌次之，其菌落數(shù)量因冷鮮肉的種類和污染情況不同而存在較大差異;乳酸菌因冷鮮肉種類的不同，其初始數(shù)量有所不同，冷鮮畜肉中數(shù)量較多，禽肉中數(shù)量較低;葡萄球菌、微球菌、霉菌和酵母菌等其他菌的數(shù)量較少，甚至不被檢出。

3 冷鮮肉貯藏過程中的腐敗菌

冷鮮肉制品表面因屠宰、切割、運輸?shù)拳h(huán)節(jié)而污染的微生物在冷鮮肉低溫貯藏過程中隨著貯藏時間的延長，其微生物構(gòu)成會發(fā)生較明顯的變化，其中的一種或幾種微生物將逐漸成為冷鮮肉中的優(yōu)勢腐敗菌，而其他菌會處于較低數(shù)量，甚至消亡;通常判定優(yōu)勢腐敗菌有兩個標(biāo)準(zhǔn)，一是通過分析貯藏過程中的微生物構(gòu)成的變化，確定一種或幾種菌數(shù)量與細(xì)菌總數(shù)的數(shù)量關(guān)系;二是鑒定這一種或幾種菌所產(chǎn)生異味的定性能力和產(chǎn)生腐敗代謝物的定量能力。

研究表明，冷鮮肉貯藏過程中的優(yōu)勢腐敗菌因包裝形式的不同而存在明顯差異，有氧貯藏過程中（通常為托盤包裝）的優(yōu)勢腐敗菌為假單胞菌，真空包裝條件下的優(yōu)勢腐敗菌為乳酸菌。此外，也有部分關(guān)于假單胞菌和熱死環(huán)絲菌是有氧貯藏條件下的優(yōu)勢腐敗菌、熱死環(huán)絲菌是真空包裝條件下的優(yōu)勢腐敗菌的研究報道。

邵偉等對低溫（5 ℃、10 ℃、15 ℃）貯藏過程中的托盤包裝冷鮮肉進(jìn)行微生物數(shù)量分析，發(fā)現(xiàn)假單胞菌數(shù)與細(xì)菌總數(shù)非常接近，數(shù)量上占有絕對優(yōu)勢。Jorge A. Lasta等對有氧條件下（5±1℃）貯藏的冷鮮牛肉皮下脂肪層進(jìn)行細(xì)菌數(shù)量測定和葡萄糖濃度、氨基酸濃度、乳酸濃度等生化檢測，確定假單胞菌為優(yōu)勢腐敗菌。這一結(jié)論與Carmen Pin等選用細(xì)菌數(shù)量和最大比生長速率作為衡量指標(biāo)確定假單胞菌為冷鮮肉有氧條件下優(yōu)勢腐敗菌的結(jié)論一致。

張德權(quán)等以真空包裝的冷鮮羊肉為研究對象，發(fā)現(xiàn)隨著貯藏時間的延長，乳酸菌在與假單胞菌和熱死環(huán)絲菌初始菌數(shù)相當(dāng)?shù)那闆r下，其數(shù)量快速增加而成為絕對優(yōu)勢菌群。Rita M. Sakala等通過監(jiān)測貯藏過程中真空包裝冷鮮牛肉的菌相變化，發(fā)現(xiàn)乳酸菌的強抑制作用使熱死環(huán)絲菌的數(shù)量顯著下降，而成為優(yōu)勢腐敗菌。

近年來，現(xiàn)代生物分子檢測技術(shù)廣泛應(yīng)用于微生物菌種的鑒定方面。M.Y.Li等應(yīng)用PCR-DGGE技術(shù)對冷鮮豬肉儲藏過程中的主要微生物進(jìn)行檢測，從分子水平上確立了假單胞菌、乳酸菌、熱死環(huán)絲菌的優(yōu)勢腐敗菌地位，這與應(yīng)用傳統(tǒng)微生物鑒定方法得出的結(jié)論一致。

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