郜李彬 曹征宇 顧韻莉 周亞輝 （上海市浦東新區(qū)農(nóng)業(yè)技術(shù)推廣中心 201201）

東云（Echeveria agavoidesLemaire）是景天科擬石蓮花屬多肉植物，原產(chǎn)于墨西哥多州。東云具有形狀鋒利的葉片，其葉片形狀、排列方式與龍舌蘭屬植物相似，因此，成為了近年來逐漸流行的一類觀賞植物，具有極高的觀賞價(jià)值和收藏價(jià)值。目前，東云大多采用葉插繁殖和分株繁殖的兩種繁殖方式，但存在繁殖系數(shù)低、擴(kuò)繁速度慢等問題，而利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)[1]，可建立東云組織培養(yǎng)和快速擴(kuò)繁體系，對滿足其市場需求具有現(xiàn)實(shí)意義。本文擬以東云組培苗為試驗(yàn)材料，通過采用不同梯度的植物生長素NAA，并設(shè)定3個(gè)不同的培養(yǎng)溫度及3個(gè)不同的光照時(shí)間，對東云組培苗進(jìn)行生根試驗(yàn)及培養(yǎng)條件研究，以期明確東云的生根技術(shù)，達(dá)到快速繁殖的目的。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試材料為東云組培苗。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 接種操作

在超凈工作臺上將增殖所得的東云組培苗進(jìn)行切割，切去種苗殘葉、老葉和基部褐化、老化組織，按照2葉1心的標(biāo)準(zhǔn)把東云組培苗切割分離成單株，接入不同生根培養(yǎng)基中（加入3%的蔗糖和0.7%的瓊脂，pH 5.6～5.8），接種深度為0.5 cm，每瓶接種1株，放入培養(yǎng)室進(jìn)行生根培養(yǎng)，培養(yǎng)42 d后進(jìn)行觀察比較。

1.2.2 培養(yǎng)條件

采用3個(gè)不同梯度的培養(yǎng)溫度，分別為20、24、28 ℃；采用3個(gè)不同的光照時(shí)間，分別為6、12、18 h/d，光照強(qiáng)度均為2 000 Lux；東云生根培養(yǎng)基配方為：（1）1/2 MS 對照；（2）1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L；（3）1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L；（4）1/2 MS＋NAA 1.0 mg/L。每處理重復(fù)10次。

2 結(jié)果與分析

2.1 東云組培苗生根效果

經(jīng)過42 d的生根培養(yǎng)，每處理中隨機(jī)選取3瓶進(jìn)行生根率觀察統(tǒng)計(jì)，結(jié)果見表1。

表1 東云組培苗不同因素下平均生根率比較

由表1可知，在其他試驗(yàn)條件不變的情況下，培養(yǎng)基配方2（1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L）的東云組培苗平均生根率最高，達(dá)39.37%；其次為培養(yǎng)基配方3，其平均生根率為29.59%；培養(yǎng)基配方4的平均生根率為9.78%；而培養(yǎng)基配方1的東云組培苗均未長出根系。光照時(shí)間12 h/d的東云組培苗平均生根率最高，達(dá)26.75%，高于光照時(shí)間6 h/d和18 h/d處理。培養(yǎng)溫度為24 ℃的東云組培苗平均生根率最高，達(dá)32.33%，明顯高于其他兩個(gè)培養(yǎng)溫度處理。

為進(jìn)一步研究培養(yǎng)基配方、光照時(shí)間和培養(yǎng)溫度對東云組培苗平均生根率的作用，用SPSS17作出主體間效應(yīng)檢驗(yàn)。由表2可知，培養(yǎng)基配方、光照時(shí)間和培養(yǎng)溫度的P值均小于5%，說明這3個(gè)因素對東云組培苗的生根都起到作用；其中光照時(shí)間的P值大于培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基配方的P值（F值最?。f明不同培養(yǎng)基配方和不同培養(yǎng)溫度對東云組培苗平均生根率的影響大于光照時(shí)間。

表2 主體間效應(yīng)檢驗(yàn)

2.2 東云組培最佳生根培養(yǎng)基配方及培養(yǎng)條件篩選

選取生根率最高的10個(gè)處理進(jìn)行顯著性分析，分別為：（1）培養(yǎng)基配方2（1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L）、光照時(shí)間6 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃；（2）培養(yǎng)基配方2（1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L）、光照時(shí)間12 h/d、培養(yǎng)溫度20 ℃；（3）培養(yǎng)基配方2（1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L）、光照時(shí)間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃；（4）培養(yǎng)基配方2(1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L)、光照時(shí)間12 h/d、培養(yǎng)溫度28 ℃；（5）培養(yǎng)基配方2（1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L)、光照時(shí)間18 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃；（6）培養(yǎng)基配方3（1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L)、光照時(shí)間6 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃；（7）培養(yǎng)基配方3（1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L)、光照時(shí)間6 h/d、培養(yǎng)溫度28 ℃；（8）培養(yǎng)基配方3（1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L)、光照時(shí)間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃；（9）培養(yǎng)基配方3（1/2 MS＋NAA 0.5 mg/L)、光照時(shí)間18 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃；（10）培養(yǎng)基配方4（1/2 MS＋NAA 1.0 mg/L)、光照時(shí)間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃。

由表3可知，處理（3）[即培養(yǎng)基配方2（1/2 MS＋NAA 0.1 mg/L)、光照時(shí)間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃]的東云組培苗生根率最高，達(dá)100%，在5%和1%水平下均顯著高于其他處理；處理（6）的東云組培苗生根率達(dá)67.00%，生根效果較好；處理（2）、（7）、（9）的東云組培苗生根率均為55.67%；其余處理的東云組培苗生根率均小于50%，生根效果不佳。

表3 不同處理東云組培苗生根率新復(fù)極差比較

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，對東云組培苗生根影響最大的因素是培養(yǎng)基配方和培養(yǎng)溫度，其中培養(yǎng)基配方2和培養(yǎng)溫度為24 ℃的東云組培苗平均生根率分別為39.37%和32.33%，生根效果較好；光照時(shí)間對東云組培苗平均生根率也有一定影響，以光照時(shí)間為12 h/d時(shí)，東云組培苗的平均生根率最高，為26.75%。植物生長素NAA對東云組培苗的生根培養(yǎng)非常重要，不同濃度的NAA對東云組培苗生根的影響不同，在東云組培苗生根培養(yǎng)過程中，以濃度為0.1 mg/L的NAA、光照時(shí)間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃條件下培養(yǎng)42 d，東云組培苗生根率最高，達(dá)100%。經(jīng)綜合考慮，東云組培苗的最佳生根培養(yǎng)基配方為1/2 MS+NAA 0.1 mg/L，最佳培養(yǎng)條件為光照時(shí)間12 h/d、培養(yǎng)溫度24 ℃。