馬 赫 孟祥南** 龐舒予 李維虎 張 鵬 范海延，2***

（1.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)生物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，遼寧 沈陽 110866；2.沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)設(shè)施園藝省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，遼寧 沈陽 110866）

番茄灰霉病是由灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）侵染引起的一種真菌性病害，可使番茄減產(chǎn)20%～40%，嚴(yán)重時(shí)可達(dá)70%[1]。目前番茄灰霉病的防治方法以噴施化學(xué)農(nóng)藥為主，但存在污染環(huán)境、病原菌易產(chǎn)生抗藥性等缺點(diǎn)[2]。探尋新型、環(huán)保、高效的植物病害防治技術(shù)成為當(dāng)今農(nóng)業(yè)生產(chǎn)亟待解決的問題。植物免疫誘抗劑是近年來被研發(fā)出用于防治植物病害的一類特殊化合物，具有高效、無污染等特點(diǎn)[3]。在番茄灰霉病防治中能發(fā)揮有效作用的誘抗劑多為寡糖類、蛋白類以及微生物類[4]。

凈都煞是利用海藻中的天然氨基酸、生物碘與殼聚糖復(fù)配而成的新型植物誘抗劑，具有抗病原菌、促生長以及無公害等特點(diǎn)。凈都煞能提高植物的免疫力，防治枯萎病、霜霉病、炭疽病和褐斑病等效果顯著，但其防治番茄灰霉病的效果未見報(bào)道。為驗(yàn)證凈都煞誘導(dǎo)番茄植株抗灰霉病的效果，我們開展了相關(guān)試驗(yàn)，以期為番茄灰霉病的綠色防控提供一項(xiàng)新的技術(shù)，現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果總結(jié)如下。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試植物誘抗劑凈都煞由青島海大生物集團(tuán)有限公司研發(fā)，供試番茄品種為遼園多麗，番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）由沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院學(xué)院趙秀香提供。

1.2 試驗(yàn)方法

先進(jìn)行番茄灰葡萄孢菌孢子懸浮液的制備。將培養(yǎng)基上的真菌孢子“掃入”無菌水中，溶液用紗布過濾后稀釋至1×104個(gè)/mL用于接種。

1.2.1 不同濃度凈都煞誘導(dǎo)番茄植株抗灰霉病的效果研究

將凈都煞配制成濃度為0.5 mL/L、1.0 mL/L和1.5 mL/L的水溶液，在番茄幼苗期（2片真葉）噴植株葉片，噴施量以葉面濕潤但溶液不下滴為準(zhǔn)，每隔7 d噴1次，共噴3次。最后一次誘導(dǎo)完成后24 h接種灰霉病菌孢子懸浮液，接種量以葉片表面懸浮液不下滴為準(zhǔn)。清水（ck）處理噴施蒸餾水后接種灰霉病菌，待對照發(fā)病均勻時(shí)統(tǒng)計(jì)病情指數(shù)。所有處理3次重復(fù)，每次重復(fù)均為60株。

1.2.2 凈都煞不同誘導(dǎo)次數(shù)對番茄灰霉病抗性的影響

采用上述試驗(yàn)已確定的凈都煞最佳誘導(dǎo)濃度（加0.01%Tween80表面活性劑），在番茄2片真葉期噴植株葉片，誘導(dǎo)間隔期為7 d，分別噴霧誘導(dǎo)3次、2次及1次，誘導(dǎo)和接種方法同上。

1.2.3 凈都煞不同誘導(dǎo)間隔期對番茄灰霉病抗性的影響

采用上述試驗(yàn)已確定的凈都煞最佳施用濃度（加0.01%Tween80表面活性劑）以及最適誘導(dǎo)次數(shù)，噴番茄葉片，設(shè)置誘導(dǎo)間隔期分別為2 d、5 d和7 d，誘導(dǎo)和接種方法同上。

1.2.4 凈都煞誘導(dǎo)持續(xù)期對番茄灰霉病抗性的影響

采用上述試驗(yàn)已確定的凈都煞的最佳施用濃度（加0.01%Tween80表面活性劑）、最適誘導(dǎo)次數(shù)以及最佳誘導(dǎo)間隔期，分別于最后一次誘導(dǎo)后的1 d、3 d和5 d接種番茄灰霉病菌，誘導(dǎo)和接種方法同上。

病情指數(shù)和相對防治效果按照李少波[5]的方法計(jì)算。應(yīng)用SPSS 17.0軟件中ANOVA方法對試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度凈都煞對番茄抗灰霉病效果的影響

不同濃度凈都煞對番茄抗灰霉病效果的影響見表1。

表1 各處理番茄抗灰霉病的效果

由表1可知，隨著凈都煞溶液濃度的增大，番茄灰霉病的防治效果呈先上升后下降的趨勢，濃度為1.0 mL/L時(shí)防治效果最好（55.51%）。

2.2 凈都煞不同誘導(dǎo)次數(shù)對番茄植株抗灰霉病效果的影響

用1.0 mL/L凈都煞溶液噴施番茄葉片，每隔7 d噴1次。凈都煞不同誘導(dǎo)次數(shù)對番茄植株抗灰霉病效果的影響見表2。

表2 各處理番茄抗灰霉病的效果

由表2可知，用凈都煞溶液噴施誘導(dǎo)2次，番茄抗灰霉病的效果最好，達(dá)56.14%，誘導(dǎo)1次和3次的灰霉病防效稍差。

2.3 不同凈都煞誘導(dǎo)間隔期對番茄抗灰霉病效果的影響

不同凈都煞誘導(dǎo)間隔期對番茄抗灰霉病效果的影響見表3。

表3 各處理番茄抗灰霉病的效果

由表3可知，在番茄苗期噴施2次1.0 mL/L凈都煞，隨著誘導(dǎo)間隔期的延長，番茄抗灰霉病的效果呈先上升后下降的趨勢。間隔期為5 d時(shí)，番茄抗灰霉病的效果最佳（61.82%）。

2.4 不同凈都煞誘導(dǎo)持續(xù)期對番茄抗灰霉病效果的影響

用1.0 mL/L凈都煞溶液噴番茄葉片，每隔5 d噴施誘導(dǎo)1次，共誘導(dǎo)2次，分別于最后一次誘導(dǎo)后1 d、3 d和5 d接種灰葡萄孢菌。不同凈都煞誘導(dǎo)持續(xù)期對番茄抗灰霉病效果的影響見表4。

表4 各處理番茄抗灰霉病的效果

由表4可知，隨著誘導(dǎo)持續(xù)期的延長，凈都煞對灰霉病的誘抗效果有減弱趨勢。

3 小結(jié)

凈都煞是由天然氨基酸、生物碘與殼聚糖復(fù)配而成的植物誘抗劑，其中殼聚糖在番茄灰霉病防治中起主要作用。前人研究發(fā)現(xiàn)，50～250 mg/L殼聚糖對番茄灰霉病的防效為10.39%～33.23%[6]，而本試驗(yàn)結(jié)果表明，1.0 mL/L凈都煞溶液對番茄灰霉病的相對防效高達(dá)61.82%。可見，與單一成分的殼聚糖相比，天然氨基酸、生物碘與殼聚糖的復(fù)配溶液顯著提高了番茄植株的抗病性。

施用不同濃度的凈都煞對番茄灰霉病產(chǎn)生了不同的誘抗效果，濃度為1.0 mL/L的凈都煞對灰霉病的防效最佳。同樣，不同施用間隔期、不同施用次數(shù)以及不同施用持續(xù)期對灰霉病的防效也會(huì)產(chǎn)生不同的效果。建議在番茄灰霉病發(fā)病前開始誘導(dǎo)，施用間隔期3 d、連續(xù)施用2次，能有效防治番茄灰霉病害。

植物免疫誘抗劑具有無污染、無公害、藥效穩(wěn)定以及預(yù)防性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，是當(dāng)前生物防治植物病害的發(fā)展方向[3，7]。如何將植物免疫誘抗劑應(yīng)用于生產(chǎn)實(shí)踐，解析其誘抗機(jī)理，需今后深入研究。