劉艷秋,林 寧,李紅林,解長銀,孫 健,王志偉

(1.淮安市第一人民醫(yī)院分院檢驗(yàn)科，江蘇淮安 223002;2.南京醫(yī)科大學(xué)附屬淮安第一醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇淮安 223300)

糖尿病腎病(DN)是2型糖尿病(T2DM)最常見的并發(fā)癥之一，其發(fā)病機(jī)制很復(fù)雜，聯(lián)合有效的治療措施可以延緩DN進(jìn)展為終末期腎衰竭的進(jìn)程，但腎臟的病理變化一旦形成，其發(fā)展很難停止和逆轉(zhuǎn)[1]。長期高血糖可引起機(jī)體的慢性炎性反應(yīng),造成血管內(nèi)皮細(xì)胞功能與結(jié)構(gòu)受損,導(dǎo)致血液呈高凝狀態(tài)，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的形成，促進(jìn)心腦血管疾病的發(fā)生、發(fā)展[2]。目前炎癥學(xué)說在糖尿病及其并發(fā)癥發(fā)生、發(fā)展的討論越來越廣泛。選擇素在糖尿病及其并發(fā)癥如動(dòng)脈粥樣硬化、微血管損傷、血栓形成的病理生理過程中起著重要作用。P-選擇素是啟動(dòng)早期炎性反應(yīng)的重要因子，也是維持慢性炎癥狀態(tài)的重要因素，可表達(dá)于血小板和內(nèi)皮細(xì)胞上，與中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞結(jié)合介導(dǎo)白細(xì)胞的黏附、滾動(dòng)、聚集及活化并釋放炎癥遞質(zhì)。已有多種證據(jù)表明在原發(fā)與繼發(fā)性腎小球疾病中，P-選擇素在腎小球系膜區(qū)、內(nèi)皮細(xì)胞及腎小管上皮細(xì)胞高表達(dá)，參與了腎小球及腎小管間質(zhì)的炎性反應(yīng)[3]。循環(huán)中的血清可溶性E-選擇素(sE-selectin)是其脫落而形成的異構(gòu)體。近年來，sE-selectin在動(dòng)脈粥樣硬化、血栓、微血管并發(fā)癥及胰島素抵抗中的地位日益受到關(guān)注[4]。

有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)糖尿病微血管病變患者血清sE-selectin的水平比正常對(duì)照組顯著增高，sE-selectin與糖尿病微血管并發(fā)癥相關(guān)[5]。近年文獻(xiàn)報(bào)道血清可溶性P-選擇素(sP-selectin)、sE-selectin與糖尿病患者胰島素抵抗關(guān)系緊密，通過檢測二者對(duì)早期糖尿病進(jìn)行診斷，及早進(jìn)行治療，防止病情出現(xiàn)惡化，值得在臨床上應(yīng)用推廣[6]。本文對(duì)T2DM及DN患者血清sP-selectin、sE-selectin水平進(jìn)行檢測并分析其相關(guān)因素，現(xiàn)將研究報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2014年1月至2018年5月至在淮安市第一人民醫(yī)院分院就診的患者，其中2 型糖尿病組(T2DM組)診斷采用2010年中國糖尿病協(xié)會(huì)公布的糖尿病防治指南的診斷標(biāo)準(zhǔn)，共62例，其中男32例，女30例，年齡38～80歲，平均(55.25±9.16)歲?？崭寡?FPG)≥7.0 mmol/L和(或)餐后2 h血糖(2hPG)≥11.1 mmol/L。糖尿病腎病組(DN組)診斷參照2007年《糖尿病腎病診斷、辨證分型及療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)》[7]，共59例，其中男29例，女30例，年齡37～70歲,平均(58.11±10.93)歲。DN組疾病史上均先有糖尿病，后出現(xiàn)間歇性或持續(xù)性蛋白尿(24 h 尿蛋白定量>3 g，任意尿微量清蛋白>37 μg/min)或有腎功能異常，同時(shí)排除由其他疾病引起的腎損傷。選取同期在本院體檢的健康者61例為健康對(duì)照組，其中男30例，女31例，年齡35～76歲，平均(56.44±12.02)歲。排除各種肝腎功能疾病、腫瘤、心功能不全 、風(fēng)濕病、甲狀腺功能異常、自身免疫性疾病等。

1.2方法 使用OLYMPUS(AU680)型自動(dòng)生化分析儀測定FPG、尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、 肌酐(Cr)、胱抑素(CysC)、三酰甘油(TG)、膽固醇(CHO)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、 低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平。穩(wěn)態(tài)模型評(píng)價(jià)胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)=FPG×FINS/22.5。血清空腹胰島素(FINS)水平采用深圳新產(chǎn)業(yè)MAGLUMI2000plus全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光儀檢測。血清sP-selectin、sE-selectin水平使用酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)法測定,其檢測試劑盒購自美國Rapidbio(RB)公司提供，sP-selectin使用批號(hào)為20180519001c,sE-selectin使用批號(hào)為20180503004c，采用Rayto-6000型酶標(biāo)儀，嚴(yán)格按說明書操作步驟，做好空白對(duì)照，每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品均加樣雙孔，取平均值計(jì)算，做好質(zhì)量控制工作。

2 結(jié) 果

2.1各組臨床指標(biāo)的比較 3組間性別、年齡、DBP、CHO、LDL-C比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；T2DM組FPG、TG、FINS、sP-selectin、sE-selectin水平顯著高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；DN組SBP、FPG、、UA、BUN、Cr、CysC、TG、HDL-C、FINS、HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin均高于健康對(duì)照組(P<0.05)；DN組SBP、FPG、UA、BUN、Cr、CysC、HDL-C、FINS、HOMA-IR、sP-selectin高于T2DM組(P<0.05)。見表1、2和圖1～3。

表1 各組臨床指標(biāo)的比較

注：與健康對(duì)照組比較，aP<0.05；與T2DM組比較，bP<0.05

表2 各組HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin水平的比較

注：與健康對(duì)照組比較，aP<0.05；與T2DM組比較，bP<0.05

注：與健康對(duì)照組比較，*P<0.05，與T2DM組比較，▲P<0.05

圖1三組HOMA-IR比較

注：與健康對(duì)照組比較，*P<0.05，與T2DM組比較，▲P<0.05

圖2三組sP-selectin水平比較

注：與健康對(duì)照組比較，*P<0.05

圖3三組sE-selectin水平比較

2.2sP-selectin、sE-selectin與臨床資料的相關(guān)性 血清sP-selectin、sE-selectin與SBP、DBP、年齡、TG、CHO、LDL-C均無相關(guān)性(P>0.05)，血清sE-selectin與HDL-C呈負(fù)相關(guān)(P<0.05)，而血清sP-selectin、sE-selectin與FPG、FINS、UA、BUN、Cr、CysC呈正相關(guān)(P<0.05)。見表3。

續(xù)表3 sP-selectin、sE-selectin與臨床資料的相關(guān)性

2.3HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin的相關(guān)性分析 HOMA-IR與sP-selectin、sE-selectin呈高度正相關(guān)(P<0.000 1),sP-selectin、sE-selectin呈高度正相關(guān)(P<0.000 1)。見表4，圖4。

表4 HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin的相關(guān)性分析表

注：A為HOMA-IR與sP-selectin的相關(guān)性；B為HOMA-IR與sE-selectin的相關(guān)性；C為sP-selectin與sE-selectin的相關(guān)性

圖4 HOMA-IR、sP-selectin、sE-selectin的相關(guān)性分析

3 討 論

DN在糖尿病人群中，其發(fā)生率為20%～40%[8]，是糖尿病最常見的微血管并發(fā)癥之一。高糖能刺激血小板膜上高表達(dá)sP-selectin，促使血小板聚集活化，介導(dǎo)血小板與內(nèi)皮細(xì)胞白細(xì)胞的黏附及微血管內(nèi)血栓形成[9]。大量的研究表明[10-13],sP-selectin和 P-選擇素糖蛋白-1(PSGL-1)配體在動(dòng)脈粥樣硬化和血栓的形成等血管因素中起著重要作用。當(dāng)血管內(nèi)皮細(xì)胞受損傷時(shí),細(xì)胞表達(dá)sP-selectin明顯增多,sP-selectin與配體結(jié)合時(shí)能增強(qiáng)單核細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞與血小板的黏附能力[14]。有關(guān)文獻(xiàn)顯示[15]，sP-selectin的表達(dá)受許多細(xì)胞調(diào)節(jié)因子的作用，靜止的時(shí)候，內(nèi)皮細(xì)胞上sP-selectin的含量微乎其微,可當(dāng)受到炎性反應(yīng)因子作用后，sP-selectin的表達(dá)明顯增加。高水平的sP-selectin刺激血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)黏附分子從而引起平滑肌細(xì)胞增殖：同時(shí)sP-selectin可損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)炎癥細(xì)胞對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的黏附,sP-selectin參與了胰島素抵抗,在內(nèi)皮功能紊亂等起一定作用，參與了T2DM及其血管并發(fā)癥的發(fā)生、發(fā)展[16]。本研究顯示DN組患者血清sP-selectin表達(dá)水平均高于單純T2DM組和健康對(duì)照組，單純性T2DM血清sP-selectin表達(dá)水平高于健康對(duì)照組。

GOKULARISHNAM等[17]研究發(fā)現(xiàn)，隨著胰島素抵抗的患者胰島素水平增高，血漿sP-selectin水平也將隨之增高；WANG等[3]研究表明T2DM患者中sP-selectin的表達(dá)升高，且與DN的嚴(yán)重程度呈正相關(guān)。本文研究表明血清sP-selectin水平在健康對(duì)照組、T2DM組、DN組是逐漸升高的，因此推測sP-selectin也可以作為預(yù)測糖尿病及其并發(fā)腎病的危險(xiǎn)因子。

sE-selectin是黏附分子選擇素家族中重要成員之一，為I型單鏈糖蛋白，主要介導(dǎo)中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和某些淋巴細(xì)胞在內(nèi)皮細(xì)胞表面進(jìn)行最初的滯留和滾動(dòng)，隨后遷移到炎癥組織。sE-selectin具有組織特異性和細(xì)胞因子可誘導(dǎo)性，參與炎性反應(yīng)、介導(dǎo)起始黏附[18]。?AKAR 等[19]研究顯示糖尿病前期患者通過sE-selectin水平增加可診斷。sE-selectin與血糖水平相關(guān)。sE-selectin可能是內(nèi)皮細(xì)胞炎癥和功能障礙與血糖水平平行升高的良好標(biāo)志物，可預(yù)測未來心血管事件。ALJWAID 等[20]研究表明選擇素在糖尿病組顯著高于對(duì)照組。MATSUMOTO等[21]的研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病合并大血管、微血管病變組血清sE-selectin水平均明顯高于無血管病變組。TAILOR等[22]也發(fā)現(xiàn)DN或者糖尿病伴有視網(wǎng)膜病變的患者血清中sE-selectin水平明顯高于無糖尿病微血管并發(fā)癥的患者。國內(nèi)也有報(bào)道[23]sE-selectin是糖尿病視網(wǎng)膜病變患者形成的重要環(huán)節(jié),可反映糖尿病視網(wǎng)膜病變病情進(jìn)展,還與糖化血紅蛋白(HbA1C)、FPG 顯著相關(guān)。另外，SHESTAKOVA等[24]發(fā)現(xiàn)在不同階段1型DM患者中，有微量或大量蛋白尿患者的血清中sE-selectin水平明顯要比沒有這些病變患者的高，而且增加的水平與患者的性別、血清CHO及TG的水平呈明顯正相關(guān)。由此可見sE-selectin是DN發(fā)展的重要環(huán)節(jié)。本研究表明血清sE-selectin水平與HOMA-IR呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.643 8，P<0.001；提示血清sE-selectin參與胰島素抵抗,血清sE-selectin水平的增高是T2DM及血管病變發(fā)生發(fā)展的高危因素之一。

4 結(jié) 論

本研究T2DM組及DN組血清sP-selectin、sE-selectin水平均大于健康對(duì)照組,提示這2個(gè)指標(biāo)增高是T2DM及微血管病變發(fā)生發(fā)展的高危因素。血清sP-selectin、sE-selectin水平與HOMA-IR呈正相關(guān)，sP-selectin、sE-selectin可能通過胰島素抵抗促進(jìn)DN的發(fā)生和發(fā)展。通過檢測sP-selectin、sE-selectin水平可能對(duì)DN患者進(jìn)行病情評(píng)估和預(yù)后判斷具有重要臨床意義。sP-selectin、sE-selectin也有可能成為DN治療研究的新的靶點(diǎn)，其在DN中的檢測具有重要的臨床意義。