雷元元 涂明亮 劉 山 葛興農(nóng) 李海斌 周 宇 師 園

（陜西省延安市動物疫病預(yù)防控制中心，陜西延安 716000）

豬瘟俗稱“爛腸病”，是由豬瘟病毒所引起的一種豬的急性、熱性、高度傳染性的疫病[1-3]。該病毒核心直徑約28～30 nm，病毒直徑約40～50 nm，表面有囊膜，基因組長度12.4 kb左右，為單鏈RNA病毒，外殼為六角形，核衣殼呈十二面體對稱。豬瘟病毒僅有1個(gè)血清型，目前世界上將豬瘟病毒分為1群、2群、3群3個(gè)基因群，我國主要流行基因2群。

豬為該病在自然界中的唯一宿主，該病四季流行，所有品種各個(gè)生長時(shí)期的豬均可感染，該病主要以接觸傳染為主，胚胎期接觸病毒可導(dǎo)致先天性免疫耐受。春秋兩季由于防治力度較大，豬瘟流行溫和，病例不典型，死亡率較低。豬瘟的致死率高，造成的損失嚴(yán)重，因此采取疫苗接種的方式預(yù)防豬瘟是十分重要的[4-6]。

盡管我國早在20世紀(jì)50年代就研制成功了安全性和免疫原性良好的豬瘟兔化弱毒疫苗，并在預(yù)防豬瘟發(fā)生的過程中發(fā)揮了重要作用，但由于近年來豬瘟的流行和發(fā)病特點(diǎn)發(fā)生了較大的變化，其流行形式從頻發(fā)的大流行轉(zhuǎn)變?yōu)橹芷谛?、波浪形的地區(qū)性散發(fā)性流行，出現(xiàn)了所謂的非典型豬瘟、溫和型豬瘟和“無名高熱綜合征”等，在存在上述種種跡象的地區(qū)和豬場往往同時(shí)出現(xiàn)無法解釋的免疫失敗。

2007年，豬瘟被列入國家強(qiáng)制免疫計(jì)劃；2017年，豬瘟退出強(qiáng)制免疫計(jì)劃。但在陜西省，豬瘟仍在陜西省中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012-2020年）之列，說明豬瘟仍是影響當(dāng)?shù)仞B(yǎng)豬業(yè)的重要疫病。在陜西省延安市部分縣區(qū)豬瘟免疫達(dá)不到預(yù)期目標(biāo)，出現(xiàn)免疫失敗。為了查清免疫失敗的原因，篩選適合當(dāng)?shù)氐拿庖叻椒?，達(dá)到應(yīng)有的免疫效果，特開展此項(xiàng)目，為延安市豬瘟免疫提供參考。

1 材料

1.1 試驗(yàn)動物

200日齡左右的仔豬20頭（未免過豬瘟疫苗），來自5個(gè)圈舍，每個(gè)圈舍4頭，由延安市子長縣農(nóng)戶飼養(yǎng)。

1.2 疫苗

豬瘟活疫苗（兔源） （生產(chǎn)批號：20171209），由楊凌綠方生物工程有限公司生產(chǎn)。

1.3 檢測試劑盒

豬瘟間接血凝抗體檢測試劑盒（生產(chǎn)批號：20181022202），由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所生產(chǎn)。

2 方法 [7]

通過現(xiàn)場調(diào)查2018年春季延安市部分縣區(qū)免疫情況，查找操作等可能引起豬瘟免疫失敗的原因。將20頭青年豬隨機(jī)分為A、B、C三組，A組4頭，B、C組每組8頭（以母豬為主），分組后編號、采血，A組為空白對照，不進(jìn)行任何處置。B組由實(shí)驗(yàn)員進(jìn)行免疫，首免60天后，加強(qiáng)免疫；C組隨當(dāng)?shù)卮悍肋M(jìn)行免疫，首免60天后，加強(qiáng)免疫。免疫后10、20、30天采血，以后間隔20天采血，分離血清，參照豬瘟間接血凝抗體檢測試劑盒說明書中檢測方法測定血清抗體效價(jià)，每組抗體取平均值。選取母豬抗體合格的3窩仔豬，每隔7天采血，測定母源抗體消長規(guī)律。

3 結(jié)果與分析

由表1可知，A組作為空白對照組，未檢出陽性血清，試驗(yàn)有效；B組免疫10天后，即出現(xiàn)陽性豬群個(gè)體，1個(gè)月后陽性率達(dá)75%，加強(qiáng)免疫之后陽性率迅速上升，長期維持較高的陽性率；C組免疫10天后逐漸出現(xiàn)陽性個(gè)體，1個(gè)月后陽性率達(dá)63%，加強(qiáng)免疫后陽性率迅速上升并長期保持。比較B、C 2組實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，以相同的免疫劑量、注射方式，不同操作人員免疫結(jié)果出現(xiàn)了明顯的差異，B組首免后達(dá)到國家規(guī)定的70%的免疫抗體合格率，而C組首免后未達(dá)標(biāo)，直到加強(qiáng)免疫后2組免疫抗體陽性率才均達(dá)到100%。由以上分析結(jié)果可見，政府采購疫苗質(zhì)量能夠達(dá)到相關(guān)規(guī)定，但基層防疫工作人員操作過程可能存在不當(dāng)之處，最終導(dǎo)致免疫結(jié)果不合格。

表1 免疫后抗體變化規(guī)律

由表2可知，當(dāng)母豬抗體水平較高時(shí)，新生仔豬抗體陽性率能夠達(dá)到100%，隨著時(shí)間的推移，仔豬體內(nèi)母源抗體水平逐漸降低，4周后抗體水平呈直線下降，8周后完全消失。

表2 仔豬母源抗體消長規(guī)律

4 討論

通過上述實(shí)驗(yàn)并對2018年延安市個(gè)別縣區(qū)春季、秋季疫苗防疫現(xiàn)場調(diào)查、查閱資料分析總結(jié)后得出，豬瘟免疫效果不佳主要是由基層防疫工作人員對豬群免疫狀況不了解，免疫劑量不足、攜帶和保存疫苗過程中效價(jià)降低、制定的免疫程序不合理、造成疫苗中和母源抗體等因素引起，這與南文金等[8-10]研究結(jié)果相似。

4.1 疫苗運(yùn)輸及操作因素

基層冷鏈運(yùn)輸基礎(chǔ)設(shè)施不夠完善，設(shè)施缺乏或損壞，有的超出使用年限，加之大部分基層防疫員學(xué)歷較低，對冷鏈運(yùn)輸保障疫苗質(zhì)量認(rèn)識不到位，難以確保疫苗效價(jià)和動物免疫質(zhì)量。部分縣區(qū)雖然具備良好的疫苗冷藏、保存、運(yùn)輸能力，但防疫員一次性從庫房領(lǐng)取過多疫苗，使部分疫苗反復(fù)凍融，造成疫苗失效；部分農(nóng)村在實(shí)際免疫過程中，飼養(yǎng)員未在現(xiàn)場，而防疫員未充分了解豬群的健康狀況便開始免疫，部分豬群由于處在病理期而免疫失敗，研究表明藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒病、附紅細(xì)胞體感染等免疫抑制病都會影響豬瘟疫苗的免疫效果。部分防疫員在免疫時(shí)未得到畜主的配合，保定豬只困難，注射方式、注射部位不合理，有時(shí)出現(xiàn)漏針導(dǎo)致免疫失?。辉诜酪哌^程中為了圖省事兒，一次注射多種疫苗，且沒有合理的時(shí)間間隔，多種疫苗相互抑制，使抗體產(chǎn)生受到干擾；部分豬群由于免疫應(yīng)激，在免疫后采食量相應(yīng)下降，飼養(yǎng)員人為注射或在飼料中添加抗生素等藥物，從而影響免疫效果。

4.2 首免日齡及母源抗體的干擾

仔豬出生時(shí)缺乏的γ-免疫球蛋白完全通過初乳獲得，特異性母源抗體水平與母豬抗體滴度呈現(xiàn)正相關(guān)。母源抗體的被動免疫對新生仔豬非常重要，但母源抗體水平過高時(shí)，也會與弱毒疫苗產(chǎn)生中和作用，從而嚴(yán)重影響疫苗的免疫效果。有研究表明，當(dāng)仔豬母源抗體滴度小于等于32時(shí)，接種保護(hù)效果最佳；而母源抗體滴度大于32時(shí)，就會影響疫苗的保護(hù)性免疫，導(dǎo)致免疫失敗[11-12]。由本文研究可知，1個(gè)月內(nèi)母源抗體處于較高水平，1個(gè)月后母源抗體迅速下降。也有試驗(yàn)表明：5周齡后免疫保護(hù)作用較3周齡高，5周齡后免疫保護(hù)作用逐漸升高[13]，建議仔豬的首免日齡應(yīng)選擇在40天以后，首免1個(gè)月后進(jìn)行加強(qiáng)免疫。