何秋瑜 陳志青 鄒勇文

病毒性腹瀉(viral diarrhea)又稱病毒性胃腸炎，由一組多種病毒感染引起的急性胃腸道疾病，廣泛存在并流行于世界各地，發(fā)展中國(guó)家尤為嚴(yán)重[1]。腹瀉病已成為一個(gè)重要的公共衛(wèi)生問(wèn)題，據(jù)世界衛(wèi)生組織報(bào)道，全球每年約有17億例兒童期腹瀉病，每年共有52.5萬(wàn)名兒童死于此病，腹瀉病是五歲以下兒童的第二大死因[2]。輪狀病毒(rotavirus，RV)和諾如病毒(norovirus，NV)是引起病毒性腹瀉最主要的病原[3]。為了解梅州市腹瀉患者中NV和RV感染情況和流行趨勢(shì)，掌握其發(fā)病的重點(diǎn)人群、高發(fā)季節(jié)等，以便采取有針對(duì)性的防控措施。現(xiàn)對(duì)梅州市2012-2017年腹瀉患者進(jìn)行NV和RV分型檢測(cè)，為梅州市病毒性腹瀉的預(yù)防控制提供參考。

1 材料與方法

1.1樣本來(lái)源 采集監(jiān)測(cè)門診(包括消化內(nèi)科、腸道門診、兒科和急診科)中符合“腹瀉病例”監(jiān)測(cè)定義的病人糞便標(biāo)本和/或嘔吐物標(biāo)本，開(kāi)展諾如病毒(GI、GII)核酸檢測(cè)與輪狀病毒抗原檢測(cè)。兩家監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)分別是梅州市婦幼保健院(今稱“梅州市婦女兒童醫(yī)院”)和梅縣人民醫(yī)院(今稱“中山大學(xué)附屬第三醫(yī)院粵東醫(yī)院”)。

1.2儀器與試劑 儀器：ABI 7500 fast PCR儀。試劑：諾如病毒核酸檢測(cè)采用試劑為核酸提取試劑盒為QIAGEN/西安天隆公司產(chǎn)品，貨號(hào)52904/52906；Real-time -PCR試劑為TAKARA公司產(chǎn)品，貨號(hào)204443；輪狀病毒抗原ELISA檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫法)為德國(guó)R-biopharm AG公司產(chǎn)品，產(chǎn)品編號(hào)KIB0901。嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)操作，檢測(cè)試劑盒均在有效期內(nèi)使用。

1.3方法

1.3.1樣本采集方法與保存： 哨點(diǎn)醫(yī)院采集糞便和/或嘔吐物標(biāo)本，成型便采3～5 g(“成人拇指頭”體積)，水樣便采集3～5 mL，采集的標(biāo)本應(yīng)置冷凍保存，并于每周一將冷藏標(biāo)本運(yùn)送至市級(jí)疾控中心開(kāi)展病毒性腹瀉病原(諾如病毒、輪狀病毒)檢測(cè)。

1.3.2檢測(cè)方法： NV檢測(cè)采用Real-time PCR方法，以感染性腹瀉診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS271-2007)為檢測(cè)依據(jù)。RV檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)方法。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 匯總廣東省急性傳染病監(jiān)測(cè)信息平臺(tái)系統(tǒng)2012年1月-2017年12月梅州市重點(diǎn)感染性腹瀉監(jiān)測(cè)登記的所有數(shù)據(jù)，建立Excel數(shù)據(jù)庫(kù)。將一年劃分為4個(gè)季節(jié)(1-3月為春季，4-6月為夏季，7-9月為秋季，10-12月為冬季)。用SPSS 24.0軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)處理，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用描述流行病學(xué)方法進(jìn)行分析。

2 結(jié)果

2.1流行概況 2012年1月-2017年12月，因腹瀉在梅州市兩家腹瀉監(jiān)測(cè)哨點(diǎn)醫(yī)院門診就診或住院的患者糞便樣本共3 066份，總陽(yáng)性率為26.84%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=288.96,P< 0.05)。共檢出NV陽(yáng)性406份，陽(yáng)性率為13.24%，包含GⅠ型7份，GⅡ型399份(占98.27%)，NV陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=168.85,P<0.05)；RV陽(yáng)性417份，陽(yáng)性率為13.60%，RV陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=173.77,P<0.05)。RV陽(yáng)性率自2013年起呈逐年下降趨勢(shì)，NV陽(yáng)性率則呈波動(dòng)趨勢(shì)，RV陽(yáng)性率略高于NV(表1和圖1)。

表1 2012-2017年梅州市腹瀉病毒監(jiān)測(cè)情況

圖1 2012-2017年梅州市諾如病毒和輪狀病毒監(jiān)測(cè)情況

2.2流行特征

2.2.1人群分布： 3 066份病例中男性1 816份，女性1 250份，男女性別比為1.45∶1。其中陽(yáng)性患者的男女性別比NV為1.31∶1，RV為1.45∶1，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=0.75,P>0.05，表2)。

表2 不同性別腹瀉病毒監(jiān)測(cè)情況

2.2.2年齡分布： 按照年齡不同將病例分為<1歲、1～3歲、4～5歲以及>5歲4組，各年齡組人群均可檢出NV和RV陽(yáng)性，不同年齡組陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=28.96,P=0.00)，且以5歲及以下年齡組為主要感染對(duì)象，其陽(yáng)性數(shù)占總陽(yáng)性數(shù)的84.81%(表3)。

表3 不同年齡組腹瀉病毒監(jiān)測(cè)情況

2.2.3時(shí)間分布： 經(jīng)6年連續(xù)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，各月份均能檢出NV和RV陽(yáng)性，NV檢出高峰為10月和11月；RV則為1月和2月。與其他各月份比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=144.24,P=0.00)。按季節(jié)計(jì)算，NV和RV檢出情況呈現(xiàn)明顯的季節(jié)分布特征，以冬春季檢出陽(yáng)性數(shù)較多，合計(jì)占全年檢出陽(yáng)性數(shù)的73%。不同季節(jié)陽(yáng)性率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=119.06,P=0.00，圖2)。

圖2 不同月份腹瀉病毒監(jiān)測(cè)情況

3 討論

3.1監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)，2012-2017年，梅州市每年檢出NV和RV總陽(yáng)性率呈逐年下降趨勢(shì)，這可能與輪狀病毒疫苗的研制成功并逐步推廣有關(guān)[4]。近年來(lái)，GⅡ型株一直是我國(guó)NV引起散發(fā)和暴發(fā)急性胃腸炎的病原流行優(yōu)勢(shì)株[5]。檢測(cè)顯示，NV在梅州市全年各月份均可檢出，且以GⅡ型感染為主，達(dá)98%，尤其是10月和11月檢出率最高。值得注意的是，不同地區(qū)時(shí)間分布存在差異。有研究報(bào)道歐洲和印度等地區(qū)夏季為諾如病毒流行高峰[6,7]。

3.22011年全國(guó)的檢測(cè)報(bào)告顯示，廣東省輪狀病毒腹瀉報(bào)告發(fā)病數(shù)占全國(guó)報(bào)告總數(shù)的50.4%[8]。RV主要通過(guò)糞口途徑傳播，輪狀病毒性腹瀉患者、隱形感染者以及帶病毒者、急性期患者都是輪狀病毒的傳染源，水樣腹瀉是主要特征，診斷時(shí)需注意與霍亂等鑒別[9]。此次研究發(fā)現(xiàn)，梅州市RV 陽(yáng)性率高于NV，尤其以1-3月份檢出率最高，達(dá)25.30%。疫情以散發(fā)為主，全人群均能感染，但以5歲及以下年齡組為主要感染對(duì)象[10]。

綜上所述，梅州市2012-2017年腹瀉患者中NV發(fā)病率呈波動(dòng)趨勢(shì)，而RV發(fā)病率則呈逐年下降趨勢(shì)，但仍高于NV發(fā)病率。同時(shí)由于NV腹瀉目前尚無(wú)特異性預(yù)防措施，今后仍需加大衛(wèi)生投入，繼續(xù)加強(qiáng)梅州市NV和RV腹瀉監(jiān)測(cè)，以制定有效的綜合防治模式，進(jìn)一步降低NV和RV腹瀉發(fā)病率。