主艷飛 ，慕 衛(wèi) ，劉 峰 ，于偉麗 ，左文靜 ，莊占興 *，宋化穩(wěn)

（1.山東農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院，山東泰安 271018；2.山東省農(nóng)藥科學(xué)研究院，山東省化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，濟(jì)南250033）

農(nóng)藥污染是世界主要環(huán)境污染之一，農(nóng)藥在施用過程中由于噴灑和流失會進(jìn)入附近的土壤和水體環(huán)境中，造成土壤和水體污染，并引起土壤和水體中非靶標(biāo)生物的中毒或死亡[1]。戊唑醇屬三唑類內(nèi)吸殺菌劑，是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中常用殺菌劑，其主要作用機(jī)理是抑制麥角甾醇中間體的氧化脫甲基反應(yīng)[2]。戊唑醇長期大量使用已對生態(tài)環(huán)境造成一定的壓力和影響。有研究表明：戊唑醇對玉米螟赤眼蜂的毒性為高風(fēng)險[3]；戊唑醇對家蠶的急性毒性為中等毒[4]；戊唑醇對花翅搖蚊的毒性為中等毒，EC50值為3.056 mg/kg[5]。其對水生生物的毒性因物種的不同而略有差異。根據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗(yàn)準(zhǔn)則第13部分：溞類急性活動抑制試驗(yàn)》[6]毒性評價標(biāo)準(zhǔn)，其等級劃分多為中等毒。研究表明，戊唑醇對魚類[7]、大型溞[8]、羊角月牙藻[9]等均為中等毒。吳生敢等[10]研究表明，戊唑醇對斜生柵列藻的毒性為高毒，對大型溞和斑馬魚的毒性為中等毒。

相同成分不同劑型的化學(xué)農(nóng)藥對生態(tài)環(huán)境的毒性受助溶劑、消解動態(tài)及環(huán)境行為等因素的影響。據(jù)理化性質(zhì)，戊唑醇可以加工為乳油、可濕性粉劑、懸浮劑、濕拌種劑、水乳劑、懸浮種衣劑、水分散粒劑等[11]。不同劑型的戊唑醇對不同水生生物的毒性評價鮮有報道。因此，有必要進(jìn)一步研究不同劑型戊唑醇對水生生物的急性毒性，制定科學(xué)合理的用藥方案，選擇合適劑型以減少環(huán)境污染和浪費(fèi)。本文采用半靜態(tài)法測試95%戊唑醇原藥（TC）、50%戊唑醇懸浮劑（SC）、85%戊唑醇水分散粒劑（WG）、250 g/L戊唑醇水乳劑（EW）、80%戊唑醇可濕性粉劑（WP）對大型溞的急性毒性，評估戊唑醇4種常見劑型產(chǎn)品對大型溞的毒性差異，分析篩選出環(huán)保劑型，以期減少農(nóng)藥使用過程對生態(tài)環(huán)境的污染。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

供試藥劑：95%戊唑醇TC由陜西康禾立豐生物科技藥業(yè)有限公司提供；50%戊唑醇SC由青島東生藥業(yè)有限公司提供；85%戊唑醇WG由青島泰生生物科技有限公司提供；250 g/L戊唑醇EW由青島凱源祥化工有限公司提供；80%戊唑醇WP由上海升聯(lián)化工有限公司提供。

大型溞（Daphnia magna）引種于中國疾病預(yù)防控制中心環(huán)境與健康相關(guān)產(chǎn)品安全所。試驗(yàn)選用實(shí)驗(yàn)室條件下，孤雌繁殖3代以上、出生時間為6～24 h、健康活潑的幼溞。

試驗(yàn)用水為ISO標(biāo)準(zhǔn)稀釋水。稀釋水pH值為6.0～9.0，硬度為140～250 mg/L（以CaCO3計），溶解氧3.0 mg/L以上。在此水體中，大型溞生長健康。恒溫光照培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，光照/黑暗時間比為16/8，溫度為（20±2）℃。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)參照《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗(yàn)準(zhǔn)則第13部分：溞類急性活動抑制試驗(yàn)》（GB/T 31270.13—2014）[6]，采用半靜態(tài)法測定各制劑對大型溞的急性毒性。根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，每個制劑設(shè)置5個試驗(yàn)有效成分質(zhì)量濃度，見表1。將試驗(yàn)藥液分裝至6個燒杯中（其中1個燒杯用于水質(zhì)測定），每個燒杯中加入30 mL藥液，每個濃度設(shè)置3次重復(fù)，每次重復(fù)10只幼溞。同時設(shè)置空白對照。試驗(yàn)期間不喂食，于藥劑處理后24 h和48 h測定燒杯中溶液的溶氧量、pH值，同時觀察大型溞中毒癥狀和受抑制數(shù)。根據(jù)GB/T 31270.13—2014中農(nóng)藥對溞類的毒性分級標(biāo)準(zhǔn)對戊唑醇TC及4種劑型進(jìn)行毒性等級劃分。

表1 不同劑型戊唑醇的急性毒性試驗(yàn)濃度

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計

試驗(yàn)結(jié)果用SPSS16.0統(tǒng)計軟件處理，計算供試藥劑對大型溞24 h、48 h的半數(shù)抑制濃度（EC50）值和95%置信限。

2 結(jié)果與分析

2.1 大型溞在5種戊唑醇制劑中的中毒癥狀

試驗(yàn)期間，空白對照組大型溞未出現(xiàn)死亡和可見異常行為，不同劑型戊唑醇對大型溞表現(xiàn)出不同程度抑制作用，染毒后的大型溞游動減慢，觸角后束，基本觀察不到擺動，體色發(fā)白，不再透明，沉于杯底。各藥劑處理組試驗(yàn)大型溞出現(xiàn)不同程度的死亡，48 h死亡率達(dá)到峰值。

2.2 戊唑醇TC及4種制劑對大型溞的急性毒性評價結(jié)果

戊唑醇TC及4種制劑對大型溞的急性毒性試驗(yàn)結(jié)果見表2。50%戊唑醇SC對大型溞24、48 h的EC50值最小，分別為1.807 mg/L和1.374 mg/L。95%戊唑醇TC對大型溞24、48 h的EC50值最大，分別為17.493 mg/L和8.396 mg/L。在本實(shí)驗(yàn)條件下，戊唑醇TC及4種劑型對大型溞的急性毒性均為中等毒。

3 討論

隨著農(nóng)藥用量的逐年增加，農(nóng)藥助劑的安全性問題日益受到關(guān)注。雖然農(nóng)藥助劑對靶標(biāo)生物沒有直接的生物活性，但對人類、有益生物和環(huán)境存在一定的毒害作用[11]。受所用助劑溶劑等材料、有效成分含量等因素影響，相同化學(xué)農(nóng)藥的不同劑型產(chǎn)品對環(huán)境生物的急性毒性存在顯著差異。王雅東等[12]測得430 g/L戊唑醇SC、60 g/L戊唑醇FS、25%戊唑醇EW對斑馬魚96 h的半致死濃度（LC50）分別為7.81 mg/L、5.28 mg/L和3.10 mg/L，3種劑型戊唑醇對斑馬魚的急性毒性均為II級，且以懸浮劑對斑馬魚的急性毒性最低。季靜等[13]測定了40%毒死蜱EC和30%毒死蜱CS對魚類、鳥類、家蠶和蜜蜂等4種環(huán)境生物的毒性。毒死蜱EC對斑馬魚的LC50值（96 h）為0.68 mg/L，毒性為高毒，毒死蜱CS對斑馬魚的LC50值為47.30 mg/L，毒性為低毒。兩者毒性差異非常大。因此，評價不同農(nóng)藥劑型產(chǎn)品對水生生物的安全性對合理使用農(nóng)藥、開發(fā)低毒劑型、減少農(nóng)藥對農(nóng)業(yè)生態(tài)環(huán)境的污染、保護(hù)生態(tài)多樣性具有重要意義。

龔會琴等[8]研究結(jié)果顯示，戊唑醇TC對大型溞的LC50值（48 h）為8.05 mg/L，毒性為中等毒。吳生敢等[10]研究結(jié)果表明，60 g/L戊唑醇FS對大型溞和斑馬魚的毒性為中等毒。戊唑醇其他劑型產(chǎn)品對大型溞的急性毒性研究鮮少報道。雖然不同研究的急性毒性結(jié)果有所差異，但是戊唑醇對大型溞的急性毒性均劃分為中等毒。

表2 戊唑醇TC及不同制劑對大型溞急性毒性試驗(yàn)結(jié)果

分析表2具體數(shù)據(jù)，相同劑型產(chǎn)品隨受試物濃度的增加和試驗(yàn)時間的延長，大型溞中毒程度加重，戊唑醇TC及其4種劑型產(chǎn)品的48 h急性毒性均比同劑型產(chǎn)品24 h毒性高；不同劑型中95%戊唑醇TC對大型溞急性毒性數(shù)據(jù)最高，毒性最低。其余4種劑型的戊唑醇毒性比較，80%戊唑醇WP＜250 g/L戊唑醇EW＜85%戊唑醇WG＜50%戊唑醇SC。80%戊唑醇WP的急性毒性是50%戊唑醇SC毒性的4倍左右，是85%戊唑醇WG毒性的2倍左右，是250 g/L戊唑醇EW毒性的2倍左右。一般來說，不同劑型間的毒性差異主要因?yàn)橛袡C(jī)溶劑和乳化劑的作用。

同一種有效成分不同廠家生產(chǎn)的相同劑型產(chǎn)品也會存在不同的毒性。針對于本文研究的4種戊唑醇劑型產(chǎn)品，80%戊唑醇WP毒性最低，實(shí)際使用中推薦優(yōu)先使用，并嚴(yán)格按照正確使用方式及控制用量，減少戊唑醇對水生生物的影響，保護(hù)生態(tài)系統(tǒng)。

4 結(jié)論

戊唑醇TC及其4種制劑產(chǎn)品對大型溞急性毒性為中等毒，不同劑型產(chǎn)品對大型溞毒性不同，其中戊唑醇WP對大型溞的急性毒性最低。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，推薦使用戊唑醇WP劑型控制植物病害，以減少農(nóng)藥對生態(tài)系統(tǒng)的影響。