毛跟年, 胡 媛, 何亞娟, 侯景龍, 楊文娟

(陜西科技大學(xué) 食品與生物工程學(xué)院, 陜西 西安 710021)

0 引言

我國酒文化歷史悠久，近年隨著人們生活水平的提高，飲酒過度較為常見，醉酒對人體的神經(jīng)和消化系統(tǒng)產(chǎn)生損傷，重則會(huì)導(dǎo)致肝硬化，肝功能衰竭等[1]疾病，因此，解酒產(chǎn)品一直被飲酒人士所重視.葛根、枳椇子是我國傳統(tǒng)用于解酒保肝的藥食兩用中藥[2,3].目前，我國已有葛枳組方的解酒保肝產(chǎn)品及相關(guān)制備工藝及解酒保肝作用研究[4,5].但市場上多數(shù)解酒醒酒產(chǎn)品是以固態(tài)或液態(tài)形式通過口服進(jìn)入消化道，使解酒物質(zhì)釋放、吸收并達(dá)到解酒保肝的目的，而且是在人們清醒狀態(tài)下或者主動(dòng)配合醒酒狀態(tài)下服用，如果已經(jīng)進(jìn)入酒醉狀態(tài)，自主的醒酒過程相對較為困難.

口腔崩解片服用時(shí)無需吞咽，無需用水送服，僅用唾液中少量的水即可崩解，并且在食道中無滯留現(xiàn)象[6].若將葛枳解酒藥物制成口腔崩解片，會(huì)非常適合醉酒等吞咽困難人群的使用[7].口腔崩解片既要具有一定的片劑硬度，又要求快速崩解，因此，在片劑成型設(shè)計(jì)時(shí)有一定的特點(diǎn)和要求.為解決目前市場上解酒產(chǎn)品的口服局限性，本研究以葛根、枳椇子等藥材為原料，對葛枳口腔崩解片的處方進(jìn)行考察，使其在口腔快速崩解，利用人們自主吞咽功能服用，進(jìn)而達(dá)到解酒保肝的效果.將口腔崩解片這種新劑型應(yīng)用于葛枳解酒保肝產(chǎn)品研究，不僅拓寬了口腔崩解片的應(yīng)用領(lǐng)域，而且大大提高了飲酒人群的服藥順應(yīng)性，避免了不必要的危害.

本研究按照中醫(yī)藥理論“君臣佐使”配伍規(guī)律，以葛根、枳椇子、枸杞、山楂為主藥，處方中君藥葛根的有效成分葛根素能夠減輕脂質(zhì)過氧化對細(xì)胞損害、解除血管痙攣、降低血液黏滯性，對急、慢性酒精中毒有保護(hù)作用，且一定程度上可抑制酒精導(dǎo)致的肝纖維化[8.9]；臣藥枳椇子中黃酮類物質(zhì)具有抗炎、抗菌、抗病毒及較強(qiáng)的保肝作用[10]，佐藥枸杞、山楂為藥食同源中藥，能夠保肝、助消化、調(diào)節(jié)免疫.四藥配伍恰當(dāng)，結(jié)合口腔崩解片的制劑形式，使解酒保肝活性物質(zhì)快速充分釋放，以期達(dá)到有效解酒保肝的目的.

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

1.1.1 主要材料

葛根、枳椇子、山楂、枸杞，西安市鹿鳴飲片廠；葛根素標(biāo)準(zhǔn)品，中國食品藥品檢定研究院；微晶纖維素(MCC)、低取代羥丙纖維素(L-HPC)，安徽山河藥用輔料有限公司；甘露醇，明月海藻集團(tuán)；乳糖，鎮(zhèn)江市康復(fù)生物工程有限公司；檸檬酸，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；碳酸氫鈉，天津市天力化學(xué)試劑有限公司.以上試劑均為分析純.

甲醇,色譜純,天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司.

1.1.2 主要儀器

TPD單沖壓片機(jī) 上海天祥健臺(tái)機(jī)械有限公司；LB-2D型崩解時(shí)限測定儀 上海南海藥檢儀器廠；RCZ-8A智能藥物溶出儀 天津大學(xué)精密儀器廠；Agilent 1200高效液相色譜儀 美國安捷倫科技公司.

1.2 方法

1.2.1 葛枳浸膏的制備

按照主藥處方量稱取葛根、枳椇子、山楂、枸杞，粉碎過篩，以10倍量60%乙醇回流提取1 h，提取2次，提取液合并，濃縮，干燥即得主藥葛枳浸膏.

1.2.2 葛枳口腔崩解片制備方法

采用濕法制粒法制備，將主藥浸膏、崩解劑、填充劑、發(fā)泡劑混合均勻，50%乙醇為粘合劑，18目標(biāo)準(zhǔn)篩制粒，濕顆粒65 ℃干燥30 min，16目標(biāo)準(zhǔn)篩整粒，加入潤滑劑、矯味劑等混合均勻，壓片，片重0.3 g，片劑直徑5 mm，硬度2.5～3.5 kg.

1.2.3 崩解時(shí)限測定方法

葛枳口腔口崩片的工藝考察指標(biāo)為崩解時(shí)限.按照2015年版《中國藥典》(四部)口崩片的崩解時(shí)限檢查法[11,12]要求進(jìn)行測定.測定方法：取葛枳口腔口崩片12片放入崩解儀吊籃，于37 ℃水溫下觀測片劑從接觸水面開始至顆粒完全通過篩網(wǎng)所需要的時(shí)間，記錄平均崩解時(shí)間.

1.2.4 基礎(chǔ)處方的確定

根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)及文獻(xiàn)來設(shè)定葛枳口腔崩解片的基礎(chǔ)處方.處方各組成用量為：崩解劑(MCC、L-HPC)30%，填充劑(甘露醇、乳糖)46%，發(fā)泡劑(檸檬酸、碳酸氫鈉)3%，潤滑劑(硬脂酸鎂)0.3%，矯味劑(阿斯巴甜)0.7%，主藥(葛枳浸膏)20%.

1.2.5 崩解劑的確定

(1) 崩解劑組成的確定

確定崩解劑種類為MCC與L-HPC，設(shè)置MCC與L-HPC的比例為7∶1、8∶1、9∶1、10∶1、11∶1，其他輔料不變，按照處方和制備方法處理，壓片后測定崩解時(shí)限，確定最佳崩解劑組成.

(2)崩解劑用量的確定

設(shè)置崩解劑用量為30%、35%、40%、45%、50%，填充劑用量相應(yīng)調(diào)整，其他輔料不變，按照處方和制備方法處理，壓片后測定崩解時(shí)限，確定最佳崩解劑用量.

1.2.6 填充劑組成的確定

確定填充劑為甘露醇和乳糖，設(shè)置甘露醇和乳糖的比例為0.5∶1、1∶1、1.5∶1、2∶1、3∶1，其他輔料不變，按照處方和制備方法處理，壓片后測定崩解時(shí)限，確定最佳填充劑組成.

1.2.7 主藥用量的確定

設(shè)置主藥浸膏添加量為10%、15%、20%、25%、30%，填充劑相應(yīng)調(diào)整，其他輔料不變，按照處方和制備方法處理，壓片后測定崩解時(shí)限，確定最佳主藥添加量.

1.2.8 正交試驗(yàn)優(yōu)化處方

崩解劑和填充劑是口腔崩解片的重要輔料，對口腔崩解片的崩解時(shí)限具有顯著影響，因此在主藥添加量確定的基礎(chǔ)上，采用L9(34)正交表對崩解劑組成、崩解劑用量及填充劑組成3因素進(jìn)行考察，因素和水平如表1所示.

表1 因素水平表

1.2.9 葛枳口腔崩解片中葛根素含量測定

(1) 色譜條件及線性關(guān)系考察

色譜條件[13]：WatersC18柱(250 nm×4.6 mm，5μm)；流動(dòng)相為甲醇-水(35∶65)，流速1 mL/min，柱溫25 ℃，檢測波長250 nm，進(jìn)樣量20μL.精密稱取葛根素對照品10.0 mg，30%乙醇溶解制得0.2 mg/mL的對照品溶液，分別取0.1、0.5、1.6、2.5、3.2 mL置于10 mL量瓶中，加30%乙醇至刻度，搖勻，0.22μm過濾，取續(xù)濾液注入色譜儀，測定色譜峰面積，以峰面積為縱坐標(biāo)，葛根素濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并計(jì)算回歸方程.

(2)供試品溶液的制備

取葛枳口腔崩解片10片，粉碎過80目篩，精密稱取6.0 g，30%乙醇超聲，定容至100 mL，取2 mL至5 mL量瓶中，定容至刻度，0.22μm過濾，取續(xù)濾液作為供試品溶液.

(3)陰性樣品溶液的制備

按處方組成，取除葛根外的其他藥材，按照葛枳口腔崩解片制備工藝要求，制備不含葛根的陰性口腔崩解片，按供試品溶液的制備項(xiàng)下方法制成陰性樣品溶液.

1.2.10 葛枳口腔崩解片中葛根素溶出度測定

取葛根口腔崩解片2片，照溶出度測定法[12]，以蒸餾水900 mL為介質(zhì)，轉(zhuǎn)速50 r·min-1，分別于2 min、5 min、10 min、20 min、30 min取樣5 mL(同時(shí)補(bǔ)充同溫蒸餾水5 mL)，0.22 m過濾，精密量取濾液20μL進(jìn)行葛根素含量測定，計(jì)算溶出度，繪制溶出度曲線.

2 結(jié)果與討論

2.1 崩解劑的確定

口腔崩解片最重要的輔料為崩解劑.常用崩解劑有MCC和L-HPC,MCC具有良好的流動(dòng)性和可壓性，可用于直接壓片，但用量過多會(huì)引起砂礫感[14]，因此常與L-HPC合用改善其性質(zhì)[15].

2.1.1 崩解劑組成的確定

將崩解劑按不同組成加入，結(jié)果如圖1所示，當(dāng) MCC與L-HPC的比例為8∶1時(shí)崩解時(shí)間為17.91 s，與其他崩解劑組成相比，崩解時(shí)間最短，因此崩解劑組成采用MCC∶L-HPC比例為8∶1.

圖1 崩解劑組成對崩解時(shí)限的影響

2.1.2 崩解劑用量的確定

將崩解劑按照不同用量加入，結(jié)果如圖2所示，在崩解劑用量為45%和50%時(shí)，崩解時(shí)間較短，為10.76 s和10.32 s，但用量為50%時(shí)，口腔崩解片成型性及口感較差，硬度降低，沙粒感明顯，考慮到人體順應(yīng)性，因此選擇崩解劑用量45%為最佳用量.

圖2 不同用量崩解劑對崩解時(shí)限的影響

2.2 填充劑的確定

填充劑是口腔崩解片的主要輔料之一，常用填充劑有甘露醇和乳糖.甘露醇水溶性好，口感清涼，但流動(dòng)性差，將流動(dòng)性好的乳糖與其合用，明顯能夠改善流動(dòng)性[16,17]，進(jìn)而制備口感佳、粉體流動(dòng)性好的口腔崩解片[18].本實(shí)驗(yàn)將填充劑按不同組成加入，結(jié)果如圖3所示，甘露醇與乳糖的比例為1.5∶1時(shí)，崩解時(shí)間最短為7.95 s，相對于其他比例所用的崩解時(shí)間最短，因此選擇1.5∶1為甘露醇與乳糖的最佳比例.

圖3 不同組成比例填充劑對崩解時(shí)限的影響

2.3 主藥添加量的確定

主藥按一定量加入，結(jié)果如圖4所示，當(dāng)添加量在25%以下時(shí)，制粒容易，所制顆粒均勻，具有較理想的流動(dòng)性，片劑成型性好，硬度能夠達(dá)到要求，崩解時(shí)限較短.隨著主藥添加量的增加，崩解時(shí)限隨之增加，當(dāng)添加量達(dá)到30%時(shí)，崩解時(shí)限超過了60 s，其原因是中藥浸膏成分復(fù)雜，粘性較大，影響了顆粒崩解，此時(shí)制粒困難，片劑無法成型，因此，不予考慮30%以上的添加量.綜合片劑成型性、崩解時(shí)限及藥物藥效的要求，擬定主藥添加量為20%.

圖4 不同添加量主藥對崩解時(shí)限的影響

2.4 正交試驗(yàn)結(jié)果

由表2可知，影響因素主次順序?yàn)锽>A>C，其中最主要影響因素為崩解劑用量.由直觀分析及正交試驗(yàn)結(jié)果可知最佳處方組合為A1B2C2，即崩解劑MCC∶L-HPC為9∶1，用量為處方量45%，填充劑甘露醇：乳糖為1.5∶1，在最優(yōu)處方組合下，葛枳口腔崩解片的崩解時(shí)限最短，在30 s內(nèi)崩解.

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果分析表

經(jīng)正交試驗(yàn)優(yōu)化，確定葛枳口腔崩解片的最佳處方為：主藥浸膏用量20%、崩解劑45%(MCC∶L-HPC 9∶1)、填充劑31%(甘露醇∶乳糖1.5∶1)、發(fā)泡劑3%(檸檬酸∶碳酸氫鈉1∶1)、潤滑劑0.3%(硬脂酸鎂)、矯味劑0.7%(阿斯巴甜).

采用濕法制粒法壓片制得葛枳口腔崩解片色澤均勻，大小均一，表面光滑，外觀良好.

2.5 葛根素含量測定結(jié)果

2.5.1 線性關(guān)系考察結(jié)果

線性關(guān)系考察結(jié)果如圖5所示，擬合回歸方程Y=92 062X+94.972,R2=0.999 2，表明葛根素在2～64μg/mL內(nèi)線性關(guān)系良好.

圖5 葛根素標(biāo)準(zhǔn)曲線

2.5.2 供試品及陰性樣品測定結(jié)果

如圖6所示，葛根素對照品保留時(shí)間為5.088 min，葛枳口腔崩解片在5.036 min出現(xiàn)明顯色譜峰,且與相鄰峰分離效果較好，而不含葛根的陰性樣品在相應(yīng)位置處無葛根素色譜峰，表明除葛根外其他藥材及輔料對測定無干擾.

(a)葛根素對照品HPLC測定結(jié)果

(b)對照品溶液HPLC測定結(jié)果

(c)陰性樣品溶液HPLC測定結(jié)果圖6 HPLC測定結(jié)果

2.5.3 葛根素含量測定結(jié)果

取10片葛枳口腔崩解片，按照供試品溶液項(xiàng)下測定方法進(jìn)行測定.由測定結(jié)果計(jì)算可知，平均每片口崩片含葛根素1.41 mg.

2.6 葛根素溶出度測定結(jié)果

對藥物溶出度的考察能夠評(píng)價(jià)口腔崩解片的制劑質(zhì)量[19]，所以本實(shí)驗(yàn)采用葛根素溶出度測定方法進(jìn)行了葛枳口腔崩解片的質(zhì)量評(píng)價(jià)，結(jié)果如圖7所示，葛枳口腔崩解片中葛根素在5 min溶出度達(dá)到71.55%，20 min基本釋放完全，葛根素溶出度符合要求.

圖7 葛根素溶出度結(jié)果

3 結(jié)論

本研究通過單因素及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對崩解劑組成及用量、填充劑組成、主藥添加量進(jìn)行考察，優(yōu)選出葛枳口腔崩解片的最佳處方：主藥浸膏6g、微晶纖維素(MCC)12.15 g、低取代羥丙纖維素(L-HPC)1.35 g、甘露醇5.58 g、乳糖3.72 g、檸檬酸0.3 g、NaHCO30.3 g、硬脂酸鎂0.09 g、阿斯巴甜0.21 g，制成100片，制得葛枳口腔崩解片硬度2.5～3.5 kg，外觀良好，30 s內(nèi)崩解，20 min基本溶出完全，平均每片含葛根素1.41 mg，符合要求.葛枳口腔崩解片的制備為醉酒人群提供了一種簡單易服的新型解酒保肝產(chǎn)品.