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        直接細菌鑒定與藥敏試驗法在臨床血液檢驗中的應用

        2019-04-10 01:53:34
        中國繼續(xù)醫(yī)學教育 2019年9期
        關鍵詞:革蘭標本細菌

        近幾年,隨著抗生素的應用越來越廣泛,隨之而來的抗生素應用不合理、細菌耐藥性等問題也日益嚴峻,從而增加了菌血癥、敗血癥的發(fā)病率[1]。因此,在臨床血液檢驗中,細菌鑒定的臨床意義重大[2]。臨床醫(yī)師對尋找更加快捷、方便、準確的細菌鑒定方法給予高度重視。現(xiàn)階段臨床上的血液檢驗中細菌鑒定手段相對較多,常規(guī)藥敏試驗、直接藥敏試驗為常用手段,應用十分廣泛[3-4]。本次研究中,以對直接細菌鑒定與藥敏試驗法在臨床血液檢驗中的應用價值進行評價分析為目的,對我院收集到的血液標本分別采取直接細菌鑒定和藥敏試驗法、常規(guī)細菌鑒定與藥敏試驗法進行檢測,并對檢測結(jié)果進行了統(tǒng)計分析,結(jié)果匯報如下。

        1 資料與方法

        1.1 一般資料

        隨機抽取2017年1月—2018年6月我院收集到的血液標本568份作為研究對象,血液標本均來源于發(fā)熱或者是全身感染癥狀患者,并且剔除了血液系統(tǒng)疾病、凝血功能障礙患者。所有受試者均自愿接受臨床血液檢驗,并簽署了知情同意書,符合醫(yī)院倫理委員會要求。

        1.2 方法

        1.2.1 研究方法 經(jīng)血培養(yǎng)儀培養(yǎng)后,分別采取直接細菌鑒定和藥敏試驗法、常規(guī)細菌鑒定與藥敏試驗法進行檢測,并對檢測結(jié)果進行統(tǒng)計分析。

        1.2.2 檢測方法 在無菌條件下,采集受試者發(fā)熱初期或高峰期靜脈血20 mL,立即送檢。每份樣本均同時分別接受常規(guī)檢測法進行細菌鑒定、藥敏試驗法與直接細菌鑒定、藥敏試驗法進行檢測,分別定義為常規(guī)組和直接組。對兩組檢驗結(jié)果進行評價分析。

        直接細菌鑒定:將血培養(yǎng)標本,采用Bactec9240型生化自動血培養(yǎng)儀進行自動培養(yǎng)基檢測,在培養(yǎng)儀自動報警時,顯示血液樣本檢測結(jié)果陽性,存在細菌生長,而后經(jīng)無菌注射器快速抽取10 mL陽性樣品,注入無菌試管,在1 500 r/min條件下,離心處理5~10 min,收集上清液后,在3 000 r/min條件下,離心處理15~20 min,而后收取沉淀,經(jīng)無菌生理鹽水洗滌兩次后,收集細菌懸液,取20μL懸液涂片,革蘭染色后,進行鏡檢。若是鏡檢結(jié)果呈陽性,經(jīng)濃度為MH+5%的羊血板進行初步藥敏試驗。以鏡檢結(jié)果為依據(jù),選擇合適觸酶或者是氧化酶,將菌液濃度調(diào)整至6.9×108cfu/L,將其接種在NCH21或者是PC11綜合板上,經(jīng)微生物分析儀展開細菌鑒定、藥敏試驗。

        常規(guī)細菌鑒定:將陽性血液標本分別接種在巧克力平板、血平板以及麥康凱平板上,在35℃、濃度為5%的二氧化碳條件下,孵育18~24小時,取出菌落涂片,對其展開革蘭染色鏡檢,而后依據(jù)鏡檢結(jié)果選擇相應觸酶、氧化酶展開實驗,經(jīng)U R ITEST-3000生物鑒定儀展開鑒定分析和藥敏試驗。

        1.3 觀察指標

        對比分析兩種鑒定方法對陽性標本的檢出率的鑒定結(jié)果及兩種鑒定方法結(jié)果報告時間。

        1.4 統(tǒng)計學方法

        采取SPSS 18.0軟件對數(shù)據(jù)進行分析處理,計量資料以(均數(shù)±標準差)表示,采用t檢驗;計數(shù)資料以(n,%)表示,采用χ2檢驗,以P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。

        2 結(jié)果

        2.1 兩種鑒定方法的鑒定結(jié)果比較

        568份血液標本中,陽性標本219例,常規(guī)檢測法鑒定出革蘭陰性桿菌166株,革蘭陽性球菌53株,直接鑒定法檢出革蘭陰性桿菌152株,革蘭陽性球菌39株,陽性標本191例;兩種方法細菌鑒定結(jié)果比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)(見表1)。

        2.2 兩種鑒定方法結(jié)果報告時間比較

        直接法細菌鑒定、藥敏試驗結(jié)果報告時間平均為(10.2±2.4)小時,較常規(guī)法的(72.1±11.6)小時發(fā)生明顯縮短,差異具有統(tǒng)計學意義(t=124.539,P=0.000)。

        3 討論

        近年來,細菌耐藥性問題日益嚴峻,菌血癥、敗血癥等疾病的發(fā)病率呈現(xiàn)逐年升高的趨勢,由于血液疾病死亡的人數(shù)不斷增加,對患者生存健康構(gòu)成了嚴重威脅[5-8]。因此,積極尋找有效并且快速的檢測手段,提高血液檢驗的準確性,對于臨床疾病診斷、合理用藥指導具有十分重要的意義。

        表1 兩種鑒定方法鑒定結(jié)果比較

        臨床上,常用的血液檢測方法較多,但是直接藥敏試驗、常規(guī)藥敏試驗的臨床應用最為廣泛[9-10]。本次研究中,以對直接細菌鑒定與藥敏試驗法在臨床血液檢驗中的應用價值進行評價分析為目的,對我院收集到的血液標本分別采取直接細菌鑒定和藥敏試驗法、常規(guī)細菌鑒定與藥敏試驗法進行檢測,并對檢測結(jié)果進行了統(tǒng)計分析,以選擇適宜的方法應用于臨床血液檢查中。結(jié)果發(fā)現(xiàn),568份血液標本中,陽性標本219例,常規(guī)檢測法鑒定出革蘭陰性桿菌166株,革蘭陽性球菌53株,直接鑒定法檢出革蘭陰性桿菌152株,革蘭陽性球菌39株,兩種方法細菌鑒定結(jié)果陽性標本檢出率都比較高,差異不具有統(tǒng)計學意義(P>0.05);直接法細菌鑒定、藥敏試驗結(jié)果報告時間平均為(10.2±2.4)小時,較常規(guī)法的(72.1±11.6)小時發(fā)生明顯縮短,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。這一結(jié)果與相關文獻[11-12]報道結(jié)果相似,由此證實,在血液檢驗工作中,直接細菌鑒定與藥敏試驗法的檢測結(jié)果準確性與常規(guī)方法無明顯差異,但是操作更為簡單,耗時更短,臨床價值顯著。

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