羅 輝，江寧寧，周細(xì)根

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葎草利尿作用的實(shí)驗(yàn)研究

羅 輝，江寧寧，*周細(xì)根

（井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部，江西，吉安 343009）

探索葎草水提液和醇提液的利尿作用。采用干凈濾紙吸收鼠尿方法，研究葎草的利尿作用。葎草水提液高、中劑量組和呋塞米組在給藥后第1 h明顯增加尿量，與生理鹽水組比較差異顯著（< 0.05），葎草醇提液各劑量組與生理鹽水組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（> 0.05）。葎草水提夜有利尿作用。

葎草；水提液；醇提液；利尿作用

葎草為桑科植物葎草[Hu-mulus scandens (Lour.)Merr.]的全草。味寒、性甘苦。有清熱散結(jié)、解毒利尿的功效，可用于治療瘧疾、瀉痢、肺結(jié)核、肺膿瘍、痔漏、瘡瘍腫毒。全草含木犀草素、牡荊素、芹菜素，具有抗氧化和抗腫瘤作用[1]。葎草正丁醇萃取部位對結(jié)核分枝桿菌H37RV及臨床分離的敏感株有明顯的抗菌作用[2]；葎草醇提液對二甲苯致小鼠耳腫脹法、蛋清致小鼠足跖腫脹法及伊文思藍(lán)法等抗炎實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ途酗@著的抑制作用[3]；葎草水提物也具有止癢作用[4]。民間有治療小便不利、膽石癥、急性腎炎、泌尿系結(jié)石等疾病的驗(yàn)方[5]。但有關(guān)葎草利尿作用的實(shí)驗(yàn)研究未見報道。本研究采用干凈濾紙吸收小鼠尿來采集尿量的實(shí)驗(yàn)方法研究葎草利尿作用，為其在治療小便不利等民間用法和開發(fā)應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 藥物

葎草采于江西吉安，經(jīng)井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)系周秋貴副教授鑒定為?？浦参锶劜輀(Lour.)Merr.]的全草；呋塞米片，天津力生制藥股份有限公司，規(guī)格20 mg/片，批號111106。

1.2 動物

清潔級昆明種小鼠（18~22 g），雄雌兼有，80只，實(shí)驗(yàn)動物均由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動物有限公司提供，許可證號SCXK(湘)2011-0003。

1.3 儀器

分析天平BS-124S，北京塞多利斯儀器系統(tǒng)有限公司；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀ZX98-1，上海豫康科教儀器設(shè)備有限公司；水浴鍋HH-4，國華電器有限公司。

2 方法

2.1 葎草水提液的制備[6]

取葎草干品50 g，加500 mL的蒸餾水浸泡30 min后，煮2次，每次2 h，并兩次的煎液，靜置去渣，放于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上進(jìn)行旋蒸，濃縮至1.0 g生藥/mL作為母液，密封后放冰箱貯存?zhèn)溆?。?shí)驗(yàn)時用蒸餾水配制所需濃度。

2.2 葎草醇提液的制備[7]

取葎草干品50 g，加500 mL的75%乙醇索氏加熱回流提取2 h，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀揮干溶劑，濃縮為浸膏狀，密封后放冰箱貯存?zhèn)溆?。?shí)驗(yàn)時用蒸餾水配制所需濃度。

2.3 呋塞米溶液制備

取呋塞米一片，規(guī)格為20 mg/片，用研缽碾碎，用100 mL蒸餾水制成含呋塞米0.2 mg/mL的懸浮液。

2.4 葎草水提液的利尿?qū)嶒?yàn)

2.4.1 實(shí)驗(yàn)動物分組和給藥

將80只小鼠在實(shí)驗(yàn)室里喂養(yǎng)1周后，隨機(jī)分為陰性對照組，給生理鹽水；陽性對照組，給濃度為0.2 mg/mL呋塞米；葎草水提液高、中和低濃度組，分別給濃度為0.5 g生藥/mL、0.3 g生藥/mL和0.1 g生藥/ml葎草水提液；葎草醇提液高、中和低濃度組，分別給濃度為0.5 g生藥/mL、0.3 g生藥/mL和0.1 g生藥/mL葎草醇提液；連續(xù)灌胃4 d，給藥容量均為10 mL/kg。

2.4.2 葎草水提液和醇提液對小鼠尿量的影響

最后一次給藥后，小鼠禁食不禁水24 h，實(shí)驗(yàn)前先按壓小鼠下腹，使小鼠排盡余尿，每組小鼠分別腹腔注射100 mL/kg生理鹽水作水負(fù)荷模型[8]，半小時后分別給每組小鼠灌胃相應(yīng)編號的試液。用藥后將小鼠放入準(zhǔn)備好的鼠籠中，每籠1只，鼠籠中的濾紙在放入小鼠前已稱重，放入小鼠后1 h取出濾紙稱重，兩次的重量差即為小鼠第1 h的尿量，連續(xù)稱量4次小鼠的尿量。

2.5 統(tǒng)計學(xué)處理

3 結(jié)果

3.1 葎草水提液的影響

與生理鹽水組比較，葎草水提液高、中劑量組和呋塞米組在給藥后第1 h明顯增加尿量，葎草水提液高劑量組在給藥后第2 h明顯減少尿量，呋塞米組在給藥后第2 h和第3 h明顯減少尿量，與生理鹽水組比較差異顯著（< 0.05）；而葎草水提液高劑量組在給藥后第3 h和第4 h的尿量，葎草水提液中劑量組在給藥后第2 h、3 h和4 h的尿量，低劑量組在給藥后第1 h、2 h、3 h和4 h的尿量，呋塞米組在給藥后第4 h的尿量，與生理鹽水組差異無統(tǒng)計學(xué)意義（> 0.05）。

與呋塞米組比較，葎草水提液高、中劑量組在給藥后第1 h的尿量差異顯著（< 0.05）。結(jié)果見表1。

表1 葎草水提物對小鼠尿液生成的影響（, n = 10)

注：與陰性對照組比較，*< 0.05；與陽性對照組比較＆< 0.05

3.2 葎草醇提液的影響

與生理鹽水組比較，葎草醇提液高、中、低劑量組在給藥后第1 h、2 h、3 h和4 h的尿量，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（> 0.05）。結(jié)果見表2。

表2 葎草醇提物對小鼠尿液生成的影響（, n = 10)

注：與陰性對照組比較，*＞0.05

4 討論

本實(shí)驗(yàn)采用小鼠的經(jīng)典利尿模型[9]，通過稱重法，對葎草水提液和醇提液影響小鼠的尿量進(jìn)行研究。通過實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析，呋塞米在給藥后第1 h明顯增加小鼠的尿量，葎草水提液高、中劑量（相當(dāng)于人用劑量0.5 g生藥/kg和0.3 g生藥/kg）在給藥后第1 h也明顯增加小鼠的尿量，但是利尿作用比呋塞米稍弱；在給藥后第2 h，葎草水提液高劑量組尿量減少，在給藥后第2 h和3 h，呋塞米組尿量明顯減少，表明葎草水提液的利尿作用只能維持1 h，在給藥1 h后小鼠的尿量不僅沒有增加而且減少，可能的原因是小鼠在給藥后第1 h內(nèi)有大量的體液隨尿的增加而丟失，因而，當(dāng)藥物的利尿作用消失后尿量會減少。葎草水提液低劑量組（相當(dāng)于人用劑量0.1 g生藥/kg）沒有利尿作用，根據(jù)《中藥大辭典》中葎草的常用量為10 g~15 g可知，民間驗(yàn)方葎草用于小便不利有一定療效，按體重為50 kg的人來計算，葎草用量需要15 g以上才會有明顯增加尿量作用。葎草醇提液各劑量組在給藥后各時間段內(nèi)均不影響小鼠的尿量，表明葎草醇提液不含利尿作用成分，所以，葎草在民間用法中治療淋痛小便不利應(yīng)采用水煎法是合理的。在本次試驗(yàn)中由于實(shí)驗(yàn)前小鼠禁食了24 h，小鼠饑餓很明顯，會撕咬濾紙，可能是導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果數(shù)據(jù)出現(xiàn)一些偏差的主要原因。

綜上所述，本實(shí)驗(yàn)中葎草水提液具有明顯利尿作用，其實(shí)驗(yàn)研究為民間合理應(yīng)用葎草治療淋痛小便不利和泌尿系結(jié)石提供了藥理學(xué)基礎(chǔ)，也為其進(jìn)一步開發(fā)利用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。其增加尿量的活性部位以及如何發(fā)揮作用的機(jī)制等，有待于今后進(jìn)一步探討研究。

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EXPERIMENTAL STUDY ON DIURETIC EFFECT OF HUMULUS SCANDENS

LUO Hui, JIANG Ning-ning,*ZHOU Xi-gen

(Faculty of Medicine, Jinggangshan University, Ji′an , Jiangxi 343009, China)

To explore the diuretic effects of the water and ethanol extract of.The diuretic effects ofwere studied by using clean filter paper to absorb mice urine.One hour after administration, compared with the physiological saline group, high-, medium-dose (5, 3 g/kg) group ofwater extract and furosemide group significantly increased the urine volume of mice (< 0.05), but there were no significant differences between all dosage groups of ethanol extract and the physiological saline group (> 0.05).water extract has diuretic effect.

; water extract; ethanol extract; diuretic effect

R285.5

A

10.3969/j.issn.1674-8085.2019.02.018

1674-8085(2019)02-0097-03

2018-12-26；

2019-01-20

國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(31460488)；國家科技支撐計劃項(xiàng)目子課題項(xiàng)目(2012BAC11B02-6)

羅 輝(1971-)，男，江西吉水人，副教授，碩士，主要從事生物化學(xué)教學(xué)科研(E-mail: luohui9898@163.com);

江寧寧(1995-)，女，江西九江人，井岡山大學(xué)醫(yī)學(xué)部藥學(xué)專業(yè)2013級本科生(E-mail: 745282269@qq.com);

*周細(xì)根(1972-)，男，江西吉水人，副教授, 主要從事中草藥藥理及毒理研究(E-mail: xgzhou1972@163.com).