蒲思宜，楊靜慧，通信作者，冀馨寧，夏凱麗，宋科，王芝學(xué)

（1.天津農(nóng)學(xué)院 園藝園林學(xué)院，天津300384；2.天津市農(nóng)科院 果樹所，天津300384）

藍(lán)莓（Valliniumspp.）被聯(lián)合國糧農(nóng)組織向世界推薦為“第三代水果”[1]，其果實(shí)因富含花色素苷、維生素、葉酸等物質(zhì)而具有抗氧化、抑菌和抑制腫瘤生長等作用，是目前國內(nèi)外保健功能食品研究的熱點(diǎn)[2-3]。藍(lán)莓適宜栽植的土壤為酸性且適應(yīng)范圍較窄，pH值在4.0～5.5之間為宜[4]。在非適應(yīng)土壤上進(jìn)行栽種時(shí)會(huì)出現(xiàn)葉片大面積黃化的現(xiàn)象。天津市多數(shù)果園的土壤都有不同程度的鹽堿化, 致使其果樹失綠現(xiàn)象十分普遍[5]，如天津薊州區(qū)26.68 hm2藍(lán)莓植株出現(xiàn)了較大面積的植株葉片缺鐵性黃化。因此，如何矯正藍(lán)莓葉片黃化是本研究的重點(diǎn)。

目前，治療果樹葉片缺鐵性黃化的方法主要是施鐵肥以增加植株內(nèi)有效鐵的含量，如葉噴及土施硫酸亞鐵、EDTA-Fe等。楊靜慧等研究得出，介質(zhì)中有效鐵的含量是影響植株生長狀況的重要因素[6]。但當(dāng)前多數(shù)是以蘋果、梨等果樹增施鐵肥矯正缺鐵性黃化的研究對(duì)象，針對(duì)藍(lán)莓缺鐵性黃化的相關(guān)研究少有報(bào)道，如張般般等研究發(fā)現(xiàn)，當(dāng)土壤pH 高于5.2 時(shí)，土壤中的有效鐵易被固定，因而不能被根系吸收和利用，容易發(fā)生缺鐵黃化[7]，但由于其試驗(yàn)材料黃化現(xiàn)象不嚴(yán)重，因而未能提出具體的解決方法。

本試驗(yàn)通過葉面施肥、土壤施肥2種施肥方式及硫酸亞鐵、檸檬酸與硫酸亞鐵混合液、EDTA-Fe等3種鐵肥的應(yīng)用，研究了‘藍(lán)豐’（Bluecrop）‘藍(lán)金’（Bluegold）2個(gè)藍(lán)莓品種黃化葉片的葉綠素含量及類胡蘿卜素含量的變化，旨在為生產(chǎn)實(shí)踐提供參考。

1 材料與方法

試驗(yàn)品種‘藍(lán)豐’‘藍(lán)金’由薊州區(qū)藍(lán)莓基地提供。

試驗(yàn)于2017年在薊州區(qū)藍(lán)莓基地實(shí)施?；匚挥谔旖蛩E州區(qū)馬伸橋二代日光加溫溫室。溫室面積為1 650 m2，高4.2 m。樣地為黏壤土，土層深1 m，pH 6.0。溫室東西向，藍(lán)莓植株南北向種植，株行距為1.0 m×1.5 m。

試驗(yàn)采用葉噴硫酸亞鐵（750 mg/L）、葉噴檸檬酸與硫酸亞鐵混合（150 mg/L＋750 mg/L）、 葉噴EDTA-Fe（1 100 mg/L）、土壤溝施硫酸亞鐵及清水對(duì)照5個(gè)處理。施肥時(shí)間為自2017年6月25日開始，葉噴半月一次，時(shí)間為11∶00之前和16∶00之后，自下而上噴至葉面形成水滴滴下為止；土壤施肥每月一次，施肥量為30 g/株。土壤施用硫酸亞鐵的同時(shí)混合有機(jī)肥（1∶5），鐵肥用適量水溶解后施入環(huán)形溝，填埋。

葉片樣品采集于2017年6月25日和7月25日。每處理選取3個(gè)樣株，為3次重復(fù)，且從樣株4個(gè)方位均勻采樣，每株植物采樣30個(gè)葉片，待測(cè)。

用紫外分光光度計(jì)在波長649、665、470 nm下測(cè)定葉綠素a、b，以及類胡蘿卜素含量和光合色素含量。

計(jì)算公式[8]

葉綠素a：Ca（mg/L）＝13.95A665-6.88A649

葉綠素b：Cb（mg/L）＝24.96A649-7.32A665

類胡蘿卜素：

Cx：C（mg/L）＝（1 000A470-2.05Ca-144.8Cb）/245

光合色素的含量（mg/g）＝色素的濃度（mg/L）×提取液的體積（L）×稀釋倍數(shù)/樣品鮮重（g）（或干重）

采用Excel收集數(shù)據(jù)及制圖，SPSS軟件進(jìn)行差異顯著性比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同類型鐵肥和施肥方式對(duì)藍(lán)莓葉片葉綠素a的影響

表1顯示，各處理下的葉綠素a含量差異顯著或極顯著，各個(gè)處理均能使藍(lán)莓葉片中葉綠素a含量不同程度增加。對(duì)照、葉面施用EDTA-Fe、土壤施用硫酸亞鐵、葉面施用檸檬酸與硫酸亞鐵混合液、葉面施用硫酸亞鐵使‘藍(lán)金’葉片內(nèi)葉綠素a含量比施肥前分別增加了0.012、0.058、0.053、0.085、0.032 mg/g；‘藍(lán)豐’分別增加了0.006、0.032、0.055、0.059、0.066 mg/g。但不同處理下2個(gè)品種的變化不一致?！{(lán)金’葉片內(nèi)葉綠素a增長量表現(xiàn)為：葉面施用檸檬酸與硫酸亞鐵混合液＞葉面施用EDTA-Fe＞土壤施用硫酸亞鐵＞葉面施用硫酸亞鐵；‘藍(lán)豐’則表現(xiàn)為葉面施用硫酸亞鐵＞葉面施用檸檬酸與硫酸亞鐵混合液＞土壤施用硫酸亞鐵＞葉面施用EDTA-Fe。

表1 不同類型鐵肥和施肥方式處理前后藍(lán)莓葉片葉綠素a增長量 mg/g

2.2 不同類型鐵肥和施肥方式對(duì)藍(lán)莓葉片葉綠素b的影響

圖1顯示，各處理間的葉綠素b含量差異顯著或極顯著，各處理均能增加葉片中的葉綠素b含量。對(duì)照、葉面施用EDTA-Fe、環(huán)狀土壤施用硫酸亞鐵、葉面施用檸檬酸與硫酸亞鐵混合液、葉面施用硫酸亞鐵使‘藍(lán)金’葉片內(nèi)葉綠素b含量比施肥前分別增加了0.003、0.099、0.024、0.061、0.031 mg/g；使‘藍(lán)豐’分別增加了0.002、0.084、0.016、0.055、0.030 mg/g。2個(gè)品種處理效果為葉面施用EDTA-Fe＞葉面施用檸檬酸與硫酸亞鐵混合液＞葉面施用硫酸亞鐵＞土壤施用硫酸亞鐵。

圖1 不同類型鐵肥和施肥方式對(duì)藍(lán)莓葉片葉綠素b的影響

2.3 不同類型鐵肥和施肥方式對(duì)藍(lán)莓葉片類胡蘿卜素含量的影響

表2顯示，各處理下的類胡蘿卜素含量差異顯著或極顯著，且各處理均能增加葉片中的類胡蘿卜素含量。其中對(duì)照、葉面施用EDTA-Fe、環(huán)狀土壤施用硫酸亞鐵、葉面施用檸檬酸與硫酸亞鐵混合液、葉面施用硫酸亞鐵使藍(lán)金葉片內(nèi)類胡蘿卜素含量比施肥前分別增加了0.004、0.030、0.015、0.034、0.018 mg/g；使‘藍(lán)豐’分別增加了0.002、0.020、0.013、0.019、0.016 mg/g。2個(gè)品種均表現(xiàn)為：葉面施用EDTA-Fe或葉面施用檸檬酸與硫酸亞鐵混合液＞葉面施用硫酸亞鐵＞土壤施用硫酸亞鐵。

表2 不同類型鐵肥和施肥方式處理前后藍(lán)莓葉片類胡蘿卜素增長量 mg/g

2.4 不同類型鐵肥和施肥方式對(duì)藍(lán)莓葉片葉綠素/類胡蘿卜素比值的影響

圖2顯示，各處理下的葉綠素/類胡蘿卜素差異顯著或極顯著，各種處理間均顯著高于對(duì)照。其中清水對(duì)照、葉面施用EDTA-Fe、環(huán)狀土壤施用硫酸亞鐵、葉面施用檸檬酸與硫酸亞鐵混合液、葉面施用硫酸亞鐵使藍(lán)金葉片內(nèi)葉綠素/類胡蘿卜素比值比施肥前分別增加了0.023、0.269、0.140、0.194、0.071；使‘藍(lán)豐’分別增加了0.006、0.210、0.118、0.199、0.171。‘藍(lán)豐’葉綠素/類胡蘿卜素比值的變化與葉綠素b、類胡蘿卜素一致，表現(xiàn)為：葉面施用EDTA-Fe＞葉面施用檸檬酸與硫酸亞鐵混合液＞葉面施用硫酸亞鐵＞土壤施用硫酸亞鐵；‘藍(lán)金’表現(xiàn)為葉面施用EDTA-Fe＞葉面施用檸檬酸與硫酸亞鐵混合液＞土壤施用硫酸亞鐵＞葉面施用硫酸亞鐵。

圖2 不同類型鐵肥和施肥方式對(duì)藍(lán)莓葉片葉綠素/類胡蘿卜素的影響

3 討論

從表1可知，5種處理對(duì)葉綠素a的影響無明顯規(guī)律，其原因可能由于受到溫室材料吸收太陽光的影響，光線的強(qiáng)度以及光譜的構(gòu)成有別于大田。進(jìn)入溫室內(nèi)的光譜福射亮度明顯小于溫室外福射亮度[9]。紅光主要來源于直射, 溫室的遮陰效果擋住了直射光源導(dǎo)致紅光比例降低; 而藍(lán)光的波長較短, 與大氣中懸浮物的分子大小相似, 導(dǎo)致藍(lán)光易被散射，大量聚集與溫室中[10]。這種條件下容易使得葉綠素a轉(zhuǎn)化為葉綠素b，且兩個(gè)藍(lán)莓品種內(nèi)部存在自身差異，因而導(dǎo)致試驗(yàn)中的5個(gè)處理對(duì)葉綠素a的影響無明顯規(guī)律。張朝紅等在缺鐵黃化對(duì)酥梨葉片營養(yǎng)元素含量和光合特性的影響研究中，同樣得出了缺鐵對(duì)葉綠素b的影響比葉綠素a大，葉綠素b對(duì)缺鐵更敏感的結(jié)論[11]；白寶璋等在細(xì)胞分裂素對(duì)缺鐵大豆幼苗黃化葉片中光合色素含量的影響研究中指出，鐵對(duì)于葉綠體內(nèi)各色素的影響大小不同，對(duì)與葉綠素b的影響尤為明顯[12]，與本試驗(yàn)結(jié)果一致。

從圖1、表2結(jié)果可得，葉面施肥效果比土壤施肥迅速，且EDTA-Fe的效果最佳。肖艷等對(duì)于不同鐵制劑與施用方法對(duì)矯正花生缺鐵黃化癥的效果研究中表明，葉面施肥因直接噴于植株表面，具有養(yǎng)分吸收迅速、利用效率高、用肥節(jié)約等特點(diǎn)，使其效果快于土壤施肥[13]。但薛進(jìn)軍等在鐵肥品種和施肥方式對(duì)蘋果體內(nèi)葉綠素和鐵含量的影響中指出，葉面施肥的效果受多種環(huán)境因素的影響，且由于其移動(dòng)性較差，葉片上只有噴到鐵肥的部分才復(fù)綠，因而易出現(xiàn)斑點(diǎn)狀復(fù)綠[14]。蘇律等在鐵肥不同施用方式對(duì)蘋果缺鐵黃化病的矯正效果研究中也表示，葉噴過程中會(huì)有一部分鐵肥因噴于空氣中而減少了樹體對(duì)鐵肥的吸收量[15]。土壤施肥因其中鐵容易被固定，效果慢于葉噴，但其持效性優(yōu)于葉噴，功能類似于緩效肥。綜合來看，建議實(shí)際操作中葉噴與土壤施肥結(jié)合使用。

試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，EDTA-Fe優(yōu)于其他鐵肥。傅偉軍在對(duì)龍泉桃樹缺鐵黃化的研究中認(rèn)為，硫酸亞鐵中，F(xiàn)e2＋在空氣中易被氧化為Fe3＋且肥效時(shí)間較短，而螯合鐵可在pH為4～9之間穩(wěn)定存在，直接施用效果較好[16]。與本試驗(yàn)中結(jié)果一致。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)中，葉面施肥和土壤施肥這兩種施肥方式及硫酸亞鐵、檸檬酸與硫酸亞鐵混合液、螯合鐵（EDTA-Fe）這3種鐵肥，均可使光合色素的含量提升且葉綠素/類胡蘿卜素比值也升高，‘藍(lán)豐’、‘藍(lán)金’兩個(gè)品種的黃化現(xiàn)象均有所改善。其中，葉噴的效果比土壤施肥效果更好。施肥使葉綠素含量增加更多，葉綠素b尤為明顯。各處理中，葉面施用EDTA-Fe的效果最好，能使葉片內(nèi)光合色素量增加最多。