朱信屹，田 田，蔡 旭，秦廣琪，孫孟紅，吳 炅，沈鎮(zhèn)宙，邵志敏，胡 震

1.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺外科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海 200032；2.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海200032；3.復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院組織庫(kù)，復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院腫瘤學(xué)系，上海200032

乳腺癌已經(jīng)成為威脅中國(guó)女性健康的主要疾病之一。遺傳基因相關(guān)的乳腺癌占所有乳腺癌發(fā)生比例的5%～10%［1］，其中BRCA1和BRCA2是主要的遺傳性乳腺癌相關(guān)基因，攜帶BRCA1/2突變的女性患乳腺癌的風(fēng)險(xiǎn)會(huì)顯著增加［2-3］。已有研究發(fā)現(xiàn)攜帶有BRCA1突變的乳腺癌患者比BRCA2突變陽(yáng)性和BRCA1/2突變陰性的患者在臨床病理學(xué)特征上更多地表現(xiàn)為三陰性乳腺癌和高組織學(xué)分級(jí)［4-6］，而且乳腺癌患者特定的免疫組織化學(xué)表型可以用來(lái)預(yù)測(cè)其攜帶BRCA1突變的概率［5］。另外，還有研究者發(fā)現(xiàn)基底標(biāo)志物細(xì)胞角蛋白14（cytokeratin 14，CK14）、細(xì)胞角蛋白5/6（cytokeratin 5/6，CK5/6）、細(xì)胞角蛋白17（cytokeratin 17，CK17）和表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor，EGFR）等在BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌中也有更高的陽(yáng)性率［7］。近年來(lái)的研究證實(shí)，除了雌激素受體（estrogen receptor，ER）和孕激素受體（progestrone receptor，PR），雄激素受體（androgen receptor，AR）在乳腺癌細(xì)胞中也有廣泛的表達(dá)，并且AR還是影響乳腺癌無(wú)病生存期（disease-free survival，DFS）的顯著預(yù)后因素之一［8］。為證實(shí)BRCA1/2突變陽(yáng)性乳腺癌的組織病理學(xué)和免疫組織化學(xué)特征，本研究對(duì)中國(guó)乳腺癌中BRCA1/2突變攜帶者和非突變攜帶者的組織病理學(xué)和免疫組織化學(xué)特征進(jìn)行分析。

1 資料和方法

1.1 研究對(duì)象

收集于2012年—2016年在復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院乳腺外科接受手術(shù)的患者資料，并符合以下入組標(biāo)準(zhǔn)：① 年齡小于等于35歲的患者，至少有1位親屬患有任意類型的腫瘤。② 年齡大于35歲而小于等于50歲的患者，父系或母系的親屬中至少有2人患有任意類型的腫瘤。③ 年齡大于50歲的患者，父系或母系親屬中至少有3人患有任意類型的腫瘤。入組之后，患者簽署知情同意書(shū)并且接受BRCA1/2突變的檢測(cè)，基因檢測(cè)的方法及突變類型的篩選和驗(yàn)證在本研究組之前的文獻(xiàn)中已有詳細(xì)描述［9］。入組的患者皆為女性患者。本研究獲復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，所有參與者簽署了知情同意書(shū)。

1.2 臨床資料

從復(fù)旦大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院病理科的數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取每例患者的臨床病理信息，其中包括腫瘤組織學(xué)類型、腫瘤大小、浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌的組織學(xué)分級(jí)、脈管癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)，以及ER、PR、人表皮生長(zhǎng)因子受體2（human epidermal growth factor receptor 2，HER2）、Ki-67、AR、腫瘤抑制蛋白p53、上皮鈣黏蛋白（E-cadherin）、CK5/6和EGFR的檢測(cè)結(jié)果，本研究所用抗體的詳細(xì)信息見(jiàn)表1。本研究入組的所有乳腺癌患者的診斷和治療均以中國(guó)抗癌協(xié)會(huì)乳腺癌診治指南與規(guī)范（2017年版）為標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行［10］，并且根據(jù)2013年St.Gallen會(huì)議共識(shí)將入組的乳腺癌分為L(zhǎng)uminal樣型、HER2過(guò)表達(dá)型和三陰性型［11］。使用美國(guó)癌癥聯(lián)合會(huì)（American Joint Committee on Caneer，AJCC）TNM分期標(biāo)準(zhǔn)對(duì)腫塊大小進(jìn)行分級(jí)［12］。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用IBM SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，雙側(cè)P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 乳腺癌免疫組織化學(xué)分析所使用的抗體Tab.1 Antibodies used in breast cancer immunohistochemistry

2 結(jié) 果

2.1 入組患者臨床及突變情況

本研究篩選了確診并接受過(guò)BRCA1/2基因突變檢測(cè)的287例乳腺癌，年齡范圍為20～70歲，中位年齡41歲，其中浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌244例，導(dǎo)管原位癌25例，其他類型乳腺腫瘤18例。這些乳腺癌患者中有66例為BRCA1突變陽(yáng)性，47例為BRCA2突變陽(yáng)性，174例為BRCA1/2突變陰性。在113例BRCA1/2突變陽(yáng)性乳腺癌的所有致病性突變中，78例為框移突變，22例為錯(cuò)義突變，6例為無(wú)義突變，4例為剪接突變，3例為BRCA1/2基因的大片段缺失。

2.2 BRCA1/2突變陽(yáng)性乳腺癌臨床病理特征

BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌只有1.5%表現(xiàn)為導(dǎo)管原位癌，明顯低于BRCA2突變陽(yáng)性組的10.6%和BRCA1/2突變陰性組的10.9%（P=0.035）。而且，BRCA1突變陽(yáng)性組中浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織學(xué)分級(jí)為Ⅲ級(jí)的比例為74.6%，顯著高于BRCA2突變陽(yáng)性組（48.8%）和BRCA1/2突變陰性組（31.4%，P＜0.001）。BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌中，ER、PR的陰性表達(dá)比例明顯高于BRCA2突變陽(yáng)性組和BRCA1/2突變陰性組（P＜0.001）。在BRCA1和BRCA2突變陽(yáng)性乳腺癌中，HER2受體的陽(yáng)性率分別為7.6%和6.4%，明顯低于BRCA1/2突變陰性患者中的26.4%。此外，BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌的分子分型中72.7%為三陰性型，顯著高于BRCA2突變陽(yáng)性的25.5%和BRCA1/2突變陰性的19.0%（P＜0.05）。BRCA2突變陽(yáng)性和BRCA1/2突變陰性乳腺癌中Luminal樣型的比例較高，分別為70.2%和75.9%（表2）。

BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌中，AR表達(dá)的陽(yáng)性率為18.0%且明顯低于其他兩組（P＜0.05）?；讟?biāo)志物CK5/6和EGFR在BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌中的陽(yáng)性率分別為54.4%和47.5%，顯著高于其余兩組（P＜0.05）。腫瘤腫塊大小、脈管癌栓、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、Ki-67指數(shù)、腫瘤抑制蛋白p53和E-cadherin的表達(dá)在3組患者之間的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表2 BRCA1/2突變陽(yáng)性和突變陰性乳腺癌的病理學(xué)特征Tab.2 Pathological features of breast cancers with BRCA1/2 mutation and non-BRCA1/2 mutation［n(%)］

續(xù)表

3 討 論

本研究發(fā)現(xiàn)BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌中Ⅲ級(jí)組織學(xué)分級(jí)的比例為73.4%，明顯高于BRCA2突變陽(yáng)性和BRCA1/2突變陰性的人群，國(guó)內(nèi)外均有類似的報(bào)道［4-6,13］。在本研究中BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌中三陰性乳腺癌的比例高達(dá)72.7%，與既往報(bào)道的中國(guó)人群攜帶BRCA1突變的乳腺癌中三陰性乳腺癌的比例（66.0%～69.0%）相似［4，13］。但是，在BRCA2突變陽(yáng)性的乳腺癌中，三陰性乳腺癌的比例為25.5%，與突變陰性的乳腺癌相似。在BRCA2突變陽(yáng)性和BRCA1/2突變陰性乳腺癌中大部分為L(zhǎng)uminal樣型，比例分別為70.2%和70.9%。另外，BRCA1和BRCA2突變陽(yáng)性乳腺癌中HER2受體陽(yáng)性率分別為7.6%和6.4%，明顯低于BRCA1/2突變陰性乳腺癌的26.4%，在中國(guó)人群和國(guó)外人群中的研究中都有類似的發(fā)現(xiàn)［4-6，13］。綜上所述，在BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌中有70%左右為三陰性型的患者，而且BRCA1和BRCA2突變陽(yáng)性乳腺癌中HER2受體陽(yáng)性表達(dá)比例明顯低于突變陰性乳腺癌，這些差異可能會(huì)導(dǎo)致BRCA1/2突變陽(yáng)性乳腺癌的全身治療敏感藥物不同于突變陰性乳腺癌，這部分患者的療效和預(yù)后是否與突變陰性的患者存在差別，仍需要進(jìn)一步的研究予以證實(shí)。

基底標(biāo)志物CK5/6和EGFR已經(jīng)成為臨床病理學(xué)診斷的指標(biāo)之一，但是這些基底標(biāo)志物在乳腺癌細(xì)胞中陽(yáng)性表達(dá)的機(jī)制還沒(méi)有明確的解釋。在本研究中BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌CK5/6和EGFR的陽(yáng)性率明顯高于BRCA2突變陽(yáng)性和BRCA1/2突變陰性乳腺癌（P＜0.001）。國(guó)外研究也發(fā)現(xiàn)了類似的結(jié)果［7］。AR在乳腺癌中的陽(yáng)性率為40%～80%，而且在不同的腫瘤類型中AR表達(dá)狀況不盡相同，ER陽(yáng)性乳腺癌中AR的表達(dá)陰性率為75%，而在ER陰性的比例為32%［14］。AR在三陰性乳腺癌中的表達(dá)也明顯低于非三陰性乳腺癌［15-17］。在我們的研究中BRCA2突變陽(yáng)性和BRCA1/2突變陰性乳腺癌患者中，AR均有50%左右的陽(yáng)性率。與之相反，BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌中的陽(yáng)性表達(dá)率只有18%，明顯低于BRCA2突變陽(yáng)性和BRCA1/2突變陰性的乳腺癌。國(guó)外也有類似的報(bào)道［18］。由于AR、p53、E-cadherin、CK5/6和EGFR等臨床病理學(xué)診斷指標(biāo)的普及時(shí)間不長(zhǎng)，因此本研究所獲得的樣本量并不是很充足，需要后續(xù)更大樣本量的研究來(lái)驗(yàn)證本研究的結(jié)果。

綜上所述，BRCA1突變陽(yáng)性乳腺癌較BRCA2突變陽(yáng)性乳腺癌和BRCA1/2突變陰性乳腺癌具有更獨(dú)特的病理學(xué)特征。我們的研究有助于進(jìn)一步認(rèn)識(shí)中國(guó)攜帶BRCA1/2基因突變?nèi)橄侔┗颊叩呐R床及病理學(xué)特征。