李廣賢， 薛 剛， 孫聚濤， 張安乾， 劉 超， 陳 芳， 賀凌霄， 楊鐵釗， 徐世曉

(河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 煙草學(xué)院， 河南 鄭州 450002)

豫煙12號是河南農(nóng)業(yè)大學(xué)以MSG28為母本，以自選的烤煙材料“YZ90”為父本雜交選育而成的烤煙雜交種，經(jīng)全國煙草品種審定委員會2016年煙草新品種審定委員會審定通過。豫煙12號田間生長勢強(qiáng)，高抗根結(jié)線蟲病，易落黃，耐烘烤。煙葉采收時的成熟度是影響烤后煙葉形成最終產(chǎn)品的重要因素，是分級標(biāo)準(zhǔn)中衡量煙葉品質(zhì)的第一要素，也是煙葉質(zhì)量的核心[1-3]。生產(chǎn)上對成熟度的量化判斷必須建立在同一生態(tài)類型和基因型且在統(tǒng)一規(guī)范、科學(xué)的生產(chǎn)管理基礎(chǔ)之上。但我國生態(tài)類型多樣，導(dǎo)致成熟度在不同品種、地區(qū)、生態(tài)類型和管理水平等下的表現(xiàn)存在一定的差異[4]。為此，通過設(shè)置欠熟(提前采收)、適熟(常規(guī)采收)和過熟(延遲采收)3個采收成熟度煙葉，研究其對豫煙12號烤后煙葉經(jīng)濟(jì)性狀、外觀質(zhì)量、化學(xué)成分及中性香味物質(zhì)含量的影響，以期為豫煙12號的配套栽培提供技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 材料

供試烤煙品種為豫煙12號，河南農(nóng)業(yè)大學(xué)。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)于2016年8月在洛陽市洛寧縣小界鄉(xiāng)王村進(jìn)行,種植密度為16 500株/hm2,單株留葉18～22片。取中部葉片,分別按欠熟(提前采收)、適熟(常規(guī)采收)和過熟(延遲采收)3個不同成熟度進(jìn)行采收。欠熟(提前采收):主脈全白，支脈大部分青，葉色黃綠，葉尖微下勾，茸毛較少脫落；適熟(常規(guī)采收)：主脈全白、發(fā)亮，支脈2/3發(fā)白，葉面黃而均勻，枯尖焦邊，茸毛較多脫落；過熟(延遲采收):主脈、支脈全白、發(fā)亮，葉面黃泡變白，茸毛大部分脫落。

1.2.2 項(xiàng)目測定

1) 經(jīng)濟(jì)性狀。煙葉成熟后分部位采收，每個處理取8竿煙葉放置于烤房中棚中部，按照三段式烘烤工藝調(diào)制后，按42級烤煙分級標(biāo)準(zhǔn)(國標(biāo))分級，各小區(qū)單獨(dú)計(jì)產(chǎn)，統(tǒng)計(jì)烤煙的產(chǎn)量、產(chǎn)值、均價和上等煙比例等經(jīng)濟(jì)性狀。

2) 外觀質(zhì)量。測定指標(biāo)有顏色、成熟度、葉片結(jié)構(gòu)、身份、油分、色度、葉面組織、柔軟性和光澤等，由上海煙草公司專家測定打分。

3) 化學(xué)成分。總糖采用蒽酮比色法測定，還原糖采用DNS比色法測定，總氮采用過氧化氫-硫酸消化法測定，煙堿經(jīng)鹽酸萃取后采用活性碳脫色法測定，鉀離子采用濕法灰化-火焰光度法測定，氯離子采用莫爾法測定。

4) 中性致香物。采用同時蒸餾萃取法，取20 g煙樣和80 mL水加入燒瓶內(nèi)加熱，保持N2流速45 mL/min，以二氯甲烷萃取餾分，萃取物在N2輔助下?lián)]發(fā)，得致香物質(zhì)。定性定量分析：提取的樣品由GC/MS鑒定和NIST庫檢索定性。GC/MS分析條件：色譜柱HP-5(60 m×0.25 mm×0.25 μm)，載氣(He)流速0.8 mL/min，進(jìn)樣口溫度250℃，傳輸線溫度280℃，離子源溫度177℃；升溫程序初溫50℃，2 min后以2℃/min的速度升至120℃，5 min后以2℃/min的速度升至240℃,保持30 min；分流比為1∶15，進(jìn)樣量2 μL，電離能70 eV，質(zhì)量數(shù)為50～500 amu，MS譜庫NIST02；采用內(nèi)標(biāo)法定量。

1.3 數(shù)據(jù)處理

采用Excel 2010和DPS軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，并用Ducan’s新復(fù)極差法進(jìn)行多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 采收成熟度對烤后煙葉經(jīng)濟(jì)性狀的影響

成熟度對烤后煙葉的經(jīng)濟(jì)性狀有著直接的影響[5]。從表1看出，單葉重，適熟煙葉最大，為12.43 g，過熟煙葉最小，為11.13 g。上等煙比例，適熟煙葉占比最高，為41.59%，欠熟煙葉最低，為33.20%。上中等煙比例，適熟煙葉占比最高，為83.31%，欠熟煙葉最低，為72.13%。單葉重、上等煙比例和上中等煙比例不同成熟度煙葉間差異均顯著。

表1 豫煙12號采收成熟度烤后煙葉的經(jīng)濟(jì)性狀Table 1 Economic character of different harvesting maturity of the cured tobacco leaves from Yuyan 12

2.2 不同成熟度對烤后煙葉外觀質(zhì)量的影響

從表2可知，不同成熟度煙葉烤后煙葉的外觀質(zhì)量差異較大。煙葉顏色，適熟和過熟煙葉得分相同，均高于欠熟煙葉；葉片結(jié)，欠熟和適熟煙葉得分高于過熟；煙葉身分、油分、葉面組織和柔軟性等方面，不同成熟度煙葉得分相同；煙葉色度及光澤，適熟煙葉得分高于欠熟和適熟煙葉。總體上看，適熟煙葉的總分最高，為62.00分；過熟次之，為57.75分；欠熟最低，為49.50分。

2.3 采收成熟度對烤后煙葉化學(xué)成分的影響

成熟度好的煙葉，其烤后化學(xué)成分的協(xié)調(diào)性好；成熟度差的煙葉，其烤后化學(xué)成分的協(xié)調(diào)性差[6]。從表3可知，還原糖含量，適熟煙葉最高，為23.08%；過熟煙葉最低，為17.81%。氯含量，不同成熟度煙葉為0.12%～0.18%，依次為過熟>適熟>欠熟?？偺呛?，欠熟和適熟煙葉相近，分別為27.42%和27.60%；過熟煙葉最低，為19.29%。煙堿含量，不同成熟度煙葉差異不大，依次為過熟>適熟>欠熟；鉀含量，欠熟和適熟煙葉相近，分別為1.30%和1.33%；過熟煙葉最低，為1.18%?？偟?，依次為欠熟>適熟>過熟。糖堿比，不同成熟度煙葉為6.86～9.48。氮堿比，欠熟煙葉最高，為0.77；過熟煙葉最低，為0.64。鉀氯比，欠熟>適熟>過熟；還原糖與總糖比，過熟煙葉最高，為0.92；欠熟煙葉最低，為0.80。

表3 豫煙12號采收成熟度烤后煙葉的化學(xué)成分含量Table 3 Chemical composition contents of different harvesting maturity of the cured tobacco leaves from Yuyan 12

2.4 采收成熟度對烤后煙葉中性致香物質(zhì)含量的影響

煙葉的香氣物質(zhì)與煙葉成熟度和調(diào)制過程中各類物質(zhì)尤其是香氣前體物質(zhì)的代謝產(chǎn)物組成有關(guān)，煙葉成熟度必然影響煙葉最終的香氣物質(zhì)含量[7-8]。從表4看出，隨著煙葉成熟度提高，除2-乙?；秽?、2-乙酰基吡咯、3,4-二甲基-2,5-呋喃二酮、2,6-壬二烯醛、b-環(huán)檸檬醛、6-甲基-5-庚烯-2-醇、3-羥基-β-二氫大馬酮等致香物質(zhì)含量外，其余致香物質(zhì)的含量均呈先升后降趨勢。其中，新植二烯含量，適熟煙葉較欠熟煙葉提高17.37%，過熟煙葉較適熟煙葉降低24.84%；茄酮含量，適熟煙葉最高，為17.62 μg/g，欠熟煙葉最低，為13.28 μg/g。從各大類致香物質(zhì)看，苯丙氨酸類降解產(chǎn)物含量，適熟煙葉較欠熟煙葉增幅最大，為33.43%；類西柏烷類降解產(chǎn)物含量，適熟煙葉較欠熟煙葉增幅其次；棕色化反應(yīng)產(chǎn)物含量，適熟煙葉較欠熟煙葉增幅最小，為11.20%。適熟煙葉的中性致香物質(zhì)總含量最大，過熟煙葉最小。

表4 豫煙12號采收成熟度烤后煙葉中性致香物質(zhì)的含量Table 4 Contents of neutral flavor substances of different harvesting maturity of the cured tobacco leaves from Yuyan 12 μg/g

3 結(jié)論與討論

采收成熟度與烤后煙葉的經(jīng)濟(jì)性狀、外觀質(zhì)量、化學(xué)成分和中性致香物質(zhì)含量既相互作用，又緊密關(guān)聯(lián)[9]。煙葉的經(jīng)濟(jì)性狀和外觀特征恰恰在一定程度上反映煙葉的內(nèi)在質(zhì)量和化學(xué)成分的協(xié)調(diào)程度[10]。試驗(yàn)結(jié)果表明，欠熟煙葉單葉重大于過熟煙葉，但整體來說，豫煙12號適熟煙葉的經(jīng)濟(jì)性狀明顯優(yōu)于過熟煙葉，欠熟煙葉最差，且欠熟煙葉在外觀質(zhì)量評價中得分最低。

化學(xué)成分的協(xié)調(diào)性是優(yōu)質(zhì)煙葉的內(nèi)在保證[11]。試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著煙葉成熟度的提高，豫煙12號煙葉中還原糖、氯、總糖、煙堿和鉀等常規(guī)化學(xué)成分含量的變化規(guī)律與前人研究一致，但煙葉中的還原糖、總糖含量整體偏高，這可能與當(dāng)?shù)厣鷳B(tài)條件有關(guān)[12]。

香氣成分是評價煙葉質(zhì)量的核心。煙葉中的致香物質(zhì)可分為苯丙氨酸類降解產(chǎn)物、類西柏烷類降解產(chǎn)物、棕色化反應(yīng)產(chǎn)物、類胡蘿卜素類降解產(chǎn)物和葉綠素降解產(chǎn)物五大類[13-15]。試驗(yàn)結(jié)果表明，隨著成熟度的提高，五大類致香物質(zhì)含量均呈先升后降趨勢，并在適熟時達(dá)最高，與趙銘欽等[16]的研究結(jié)果一致。

總體上看，豫煙12號在適熟(主脈全白、發(fā)亮，支脈2/3發(fā)白，葉面黃而均勻，枯尖焦邊，茸毛較多脫落)時采收其產(chǎn)質(zhì)量最佳，可獲得最大經(jīng)濟(jì)效益。鑒于此，各地區(qū)應(yīng)結(jié)合實(shí)際生態(tài)條件和設(shè)施水平在煙葉適熟時進(jìn)行采收。