■龔澤修 李章奕 穆永勝 杜紅梅*

（1.婁底職業(yè)技術(shù)學(xué)院，湖南婁底 417000；2.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)商學(xué)院，湖南長(zhǎng)沙 410128；3.湖南三和生物科技有限公司，湖南長(zhǎng)沙 410125）

隨著現(xiàn)代養(yǎng)殖技術(shù)的高速發(fā)展，抗生素作為飼料添加劑已經(jīng)出現(xiàn)不同的弊端，動(dòng)物生產(chǎn)過程中對(duì)不同細(xì)菌等產(chǎn)生的耐藥性、動(dòng)物產(chǎn)品中的藥物殘留以及改變動(dòng)物肉質(zhì)產(chǎn)品的質(zhì)量等問題的集中出現(xiàn)，引起了人們的高度重視，無抗養(yǎng)殖逐漸成為健康養(yǎng)殖的代名詞。作為抗生素的替代產(chǎn)品，益生菌廣泛受到青睞[1]。益生菌是活菌，包括乳酸桿菌、芽孢桿菌、雙歧桿菌及其制劑等，它有益于宿主的健康生長(zhǎng)，通過維持腸道的生態(tài)平衡來提高動(dòng)物健康，已成為替代抗生素的理想綠色添加劑[2-3]。玉屏風(fēng)散主要由黃芪、防風(fēng)和白術(shù)三種中藥成分組成，對(duì)動(dòng)物的免疫調(diào)節(jié)具有重要作用，可以提高動(dòng)物免疫力，增強(qiáng)抗氧化力[4-5]。在動(dòng)物試驗(yàn)中，可提高動(dòng)物的免疫功能和抗氧化力，對(duì)生長(zhǎng)性能具有一定的促進(jìn)作用[6]。因此，本試驗(yàn)研發(fā)以益生菌和玉屏風(fēng)散為主的飼料添加劑，旨在探討其對(duì)豬生長(zhǎng)性能和血清免疫指標(biāo)的影響。目前，益生菌對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能和免疫功能方面的研究較多，但是與玉屏風(fēng)散共同作用方面的研究較少，本試驗(yàn)在飼料中添加益生菌和玉屏風(fēng)散，研究二者共同作用對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能和免疫功能的影響，為其科學(xué)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

益生菌和玉屏風(fēng)散多糖均由湖南三和生物科技有限公司提供。益生菌主要成分為：枯草芽孢桿菌，活菌數(shù)≥2.5×109個(gè)/g；酵母菌，活菌數(shù)≥1.0×109個(gè)/g；嗜酸乳桿菌，活菌數(shù)≥2.5×109個(gè)/g。玉屏風(fēng)散多糖中粗蛋白質(zhì)為17.70%、總還原糖為35.13%、水分為5.03%、粗脂肪為0.92%、粗灰分為9.36%、粗纖維為0.67%，純度約為80%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

采用單因素隨機(jī)試驗(yàn)設(shè)計(jì)。選取96頭杜長(zhǎng)大三元雜交生長(zhǎng)豬，體重(13.12±1.32)kg，將試驗(yàn)豬隨機(jī)分為4組，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8頭豬。空白對(duì)照組(Ⅰ組)飼喂基礎(chǔ)日糧，益生菌組(Ⅱ組)飼喂基礎(chǔ)日糧+0.15%益生菌，玉屏風(fēng)散多糖組(Ⅲ組)飼喂基礎(chǔ)日糧+0.04%玉屏風(fēng)散多糖，綜合試驗(yàn)組(Ⅳ組)飼喂基礎(chǔ)日糧+0.15%益生菌+0.04%玉屏風(fēng)散多糖。試驗(yàn)共計(jì)60 d，分兩階段進(jìn)行，第一階段為1～30 d（生長(zhǎng)豬體重10～20 kg），第二階段為31～60 d（生長(zhǎng)豬體重20～50 kg）。

1.3 試驗(yàn)飼糧與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)飼糧為玉米-豆粕型，參考標(biāo)準(zhǔn)為NY/T 65—2004，詳情見表1，預(yù)試期3 d。試驗(yàn)期間生長(zhǎng)豬自由采食與飲水，免疫消毒等程序參照試驗(yàn)豬場(chǎng)具體情況執(zhí)行。

1.4 生長(zhǎng)性能測(cè)定

試驗(yàn)豬在兩個(gè)飼喂階段均進(jìn)行生長(zhǎng)性能測(cè)定，于試驗(yàn)的第0、30、60 d分別進(jìn)行空腹測(cè)定，并記錄試驗(yàn)期間的飼料消耗情況。生長(zhǎng)性能測(cè)定指標(biāo)包括平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）以及料重比（F/G）。

1.5 血清免疫指標(biāo)測(cè)定

分別在兩個(gè)試驗(yàn)階段結(jié)束時(shí)對(duì)生長(zhǎng)豬進(jìn)行血清免疫指標(biāo)測(cè)定。每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇2頭，共計(jì)24頭生長(zhǎng)豬，前腔靜脈采血5 ml，分離血清，-20℃保存。采用ELISA法（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法）測(cè)定血清中免疫球蛋白含量（IgG），試劑盒購(gòu)自上海酶聯(lián)生物公司。采用HITACHI7020自動(dòng)分析儀測(cè)定血清中總蛋白（TP）、球蛋白（GLB）和白蛋白（ALB）三種指標(biāo)，試劑盒購(gòu)自上海酶聯(lián)生物公司。

表1 基礎(chǔ)日糧組成和營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1.6 數(shù)據(jù)處理

采用SAS 9.4統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，以鄧肯法對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行差異性顯著分析，結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果

2.1 對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能的影響（見表2）

表2 對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能的影響

從表2中可以看到，在第一階段，在末重、平均日增重上Ⅱ～Ⅳ組顯著高于Ⅰ組（對(duì)照組）、而料重比顯著下降（P＜0.05），在初重和平均日采食量上差異不顯著（P＞0.05）。在第二階段，在末重上Ⅱ～Ⅳ組顯著高于Ⅰ組、而料重比顯著下降（P＜0.05），在平均日增重和平均日采食量上差異不顯著（P＞0.05）。在整個(gè)試驗(yàn)周期內(nèi)，與Ⅰ組（對(duì)照組）相比，Ⅱ～Ⅳ組平均日增重顯著提高（P＜0.05），料重比顯著降低（P＜0.05），平均日采食量差異不顯著（P＞0.05）。

2.2 對(duì)生長(zhǎng)豬血清免疫指標(biāo)的影響(見表3)

從表3中可以看到，在第一階段中，Ⅱ～Ⅳ組免疫球蛋白G含量分別比Ⅰ組提高了7.67%（P＞0.05）、10.04%（P＞0.05）和19.53%（P＜0.05），Ⅱ～Ⅳ組免疫球蛋白A含量分別比Ⅰ組提高了 16.22%（P＞0.05）、18.02%（P＞0.05）和36.94%（P＜0.05）；在第二階段中，Ⅱ～Ⅳ組免疫球蛋白G含量分別比Ⅰ組提高了11.63%（P＞0.05）、14.42%（P＞0.05）和26.48%（P＜0.05），Ⅱ～Ⅳ組免疫球蛋白A含量分別比Ⅰ組提高了10.92%（P＞0.05）、9.24%（P＞0.05）和25.21%（P＜0.05）。在兩個(gè)試驗(yàn)階段，Ⅱ～Ⅳ組的總蛋白均高于Ⅰ組，但差異不顯著（P＞0.05）。

3 討論

3.1 對(duì)生長(zhǎng)豬生長(zhǎng)性能的影響

作為抗生素的替代產(chǎn)品，益生菌廣泛用于飼料添加劑中，它有益于宿主的健康生長(zhǎng)，通過維持腸道的生態(tài)平衡來提高動(dòng)物健康，進(jìn)一步提升動(dòng)物的生長(zhǎng)性能[7]，前人已經(jīng)通過實(shí)驗(yàn)證明了乳酸桿菌等益生菌用在豬飼料添加劑中可顯著提高豬的平均日增重[8-9]；玉屏風(fēng)散多糖可加強(qiáng)動(dòng)物的免疫功能、提高機(jī)體的抗氧化力，對(duì)生長(zhǎng)性能具有促進(jìn)作用，鄧緣等[6]在對(duì)玉屏風(fēng)散多糖在仔豬生長(zhǎng)性能的影響試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)日糧中添加玉屏風(fēng)散多糖可提高仔豬的生長(zhǎng)速度和平均日增重，降低料重比。本試驗(yàn)兩階段試驗(yàn)結(jié)果表明，在第一階段，益生菌和玉屏風(fēng)散多糖在平均日增重指標(biāo)影響上優(yōu)于第二階段，本結(jié)果與 Giang等[10]、周盟等[11]、劉輝等[3]和鄧緣等[6]試驗(yàn)結(jié)果相似。仔豬在斷奶之后，其免疫系統(tǒng)和消化系統(tǒng)發(fā)育仍未成熟，容易受環(huán)境和飼料等外界應(yīng)激的影響，在飼料中添加益生菌，能夠幫助仔豬建立平衡的腸道菌群，提高其腸胃吸收功能；在飼料中添加玉屏風(fēng)散多糖，能夠幫助仔豬提高免疫能力，抵抗外界不良因素，與益生菌一起促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)。隨著仔豬的生長(zhǎng)，腸胃菌群和免疫能力的完善，益生菌和玉屏風(fēng)散多糖對(duì)仔豬生長(zhǎng)性能的提高逐漸降低，這與本試驗(yàn)結(jié)果相似。

表3 對(duì)生長(zhǎng)豬血清免疫指標(biāo)的影響

3.2 對(duì)生長(zhǎng)豬血清免疫指標(biāo)的影響

仔豬血清免疫指標(biāo)的波動(dòng)直接影響著仔豬的生長(zhǎng)發(fā)育和免疫能力，能夠反映仔豬的健康情況，其中血清中免疫球蛋白G、免疫球蛋白A與總蛋白（白蛋白和球蛋白）在動(dòng)物機(jī)體免疫功能上起著重要作用。益生菌與玉屏風(fēng)散多糖均能夠提高動(dòng)物機(jī)體的免疫功能。楊久仙等[12]通過在日糧中添加益生菌發(fā)現(xiàn)可以顯著提高仔豬免疫球蛋白G水平，王四新等[13]發(fā)現(xiàn)豬源發(fā)酵乳酸桿菌可以提升保育豬免疫球蛋白G和免疫球蛋白A水平，由此可見，益生菌能夠提高豬血清中免疫球蛋白G和免疫球蛋白A水平來提升豬的免疫能力，該結(jié)果與本試驗(yàn)結(jié)果相似。早在2011年，湯瀅等[14]通過現(xiàn)代藥理研究證明，玉屏風(fēng)散多糖能夠通過提升動(dòng)物機(jī)體中免疫球蛋白G和免疫球蛋白A含量來增強(qiáng)動(dòng)物免疫功能；胡雄貴等[4]通過試驗(yàn)再次證明玉屏風(fēng)散多糖能夠提升仔豬的免疫能力，這與本試驗(yàn)結(jié)果相似，玉屏風(fēng)散多糖能夠通過提升血清中免疫球蛋白G含量來提高仔豬的免疫能力。同時(shí)本試驗(yàn)旨在探討益生菌與玉屏風(fēng)散多糖合用對(duì)仔豬血清免疫指標(biāo)的影響，試驗(yàn)結(jié)果表明二者合用比分別添加能顯著提升仔豬血清中免疫球蛋白G和免疫球蛋白A的含量，增強(qiáng)仔豬機(jī)體免疫能力，促進(jìn)健康生長(zhǎng)。

4 結(jié)論

在仔豬基礎(chǔ)日糧中分別添加0.15%益生菌和0.04%玉屏風(fēng)散多糖均能夠提高仔豬機(jī)體免疫能力和生長(zhǎng)性能，且同時(shí)添加0.15%益生菌與0.04%玉屏風(fēng)散多糖能夠顯著提高血清中IgG和IgA水平，促進(jìn)機(jī)體吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，提高仔豬生長(zhǎng)性能。