金 鑫,周思菊,李 強(qiáng),李 萍,譚 偉,李小林,黃文麗*
(1.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院生物技術(shù)核技術(shù)研究所,成都610061;2.桂林市農(nóng)業(yè)科學(xué)院,廣西桂林541006;3.四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院土壤肥料研究所,成都610066)
靈芝(Ganoderma lucidum)隸屬于擔(dān)子菌門(mén)(Basidiomycota)、傘菌綱(Agaricomycetes),多孔菌目(Polyporales)、靈芝科(Ganodermataceae)[1],是我國(guó)的名貴中藥材。《神農(nóng)本草經(jīng)》和《本草綱目》認(rèn)為靈芝具有益氣強(qiáng)身、扶正固本、延年益壽等功效?,F(xiàn)代藥理學(xué)研究證實(shí)靈芝含有如靈芝多糖和三萜類(lèi)化合物等活性成分,具有調(diào)節(jié)免疫、抗腫瘤、抗衰老、保肝護(hù)肝、治療心腦血管疾病等作用[2-3]。我國(guó)是世界靈芝的主要生產(chǎn)國(guó)和出口國(guó),靈芝品種篩選研究也是中國(guó)食用菌種業(yè)研究的重要內(nèi)容[4]。我國(guó)市場(chǎng)上栽培靈芝品種較多,不同靈芝品種的農(nóng)藝性狀和轉(zhuǎn)化率及其活性成分含量和藥效品質(zhì)均有差異[5]。因此,本研究以5個(gè)不同來(lái)源的靈芝菌株為研究對(duì)象,對(duì)靈芝外觀性狀、色澤等農(nóng)藝性狀及轉(zhuǎn)化率、多糖、三萜等活性成分和抗氧化作用和促進(jìn)脾細(xì)胞增殖能力等進(jìn)行了測(cè)試分析,為靈芝產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)和靈芝種業(yè)研究提供基礎(chǔ)資料。
1.1.1 菌株來(lái)源
金地靈芝(簡(jiǎn)稱(chēng)JD,登錄號(hào):MF476197)和黃靈芝(簡(jiǎn)稱(chēng)HLZ,登錄號(hào):MF476199)來(lái)自四川省農(nóng)業(yè)科學(xué)院,平芝(簡(jiǎn)稱(chēng)PZ,登錄號(hào):MF476201)和圓芝8號(hào)(簡(jiǎn)稱(chēng)YZ8,登錄號(hào):MF476198)來(lái)自駐馬店農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所,靈白(簡(jiǎn)稱(chēng)LB,登錄號(hào):MF476200)來(lái)自泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院。
1.1.2 栽培管理
試驗(yàn)在四川省德陽(yáng)市食用菌專(zhuān)家大院進(jìn)行,栽培時(shí)間為2015年1—6月。首先選取直徑10~15 cm青岡樹(shù),截成15 cm長(zhǎng)的小段木通過(guò)裝袋、滅菌、接種,將接種完的菌袋全部搬入培養(yǎng)室內(nèi),溫度控制在25~28℃,濕度控制在60%~70%。4月上旬將發(fā)菌培養(yǎng)好的菌棒進(jìn)行脫袋覆土栽培,原基生長(zhǎng)階段控制濕度在85%~95%,溫度控制在25~30℃,菌柄生長(zhǎng)階段和菌蓋生長(zhǎng)階段控制濕度90%~95%,溫度控制在28~30℃,子實(shí)體成熟期降低濕度到80%~85%,溫度控制在25~30℃,子實(shí)體白色邊緣消失并開(kāi)始噴射孢子粉時(shí)表明進(jìn)入成熟期,此時(shí)即采收同時(shí)進(jìn)行數(shù)據(jù)測(cè)量。
1.2.1 樣品采集、農(nóng)藝性狀測(cè)定
采收后的子實(shí)體分別用游標(biāo)卡尺測(cè)定靈芝子實(shí)體菌蓋直徑、菌蓋厚度和菌柄長(zhǎng)度,并計(jì)算轉(zhuǎn)化率:轉(zhuǎn)化率=(干產(chǎn)量/鮮段木重)×100%,分別隨機(jī)選取30朵子實(shí)體作為試驗(yàn)樣品,將樣品子實(shí)體完全烘干至恒重,粉碎過(guò)篩孔尺寸為0.18 mm的篩備用。
1.2.2 多糖提取測(cè)定
稱(chēng)取30 g靈芝樣品,以蒸餾水為提取溶劑,料液體積比1∶60,100℃浸提1 h,浸提2次,合并濾液,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),再通過(guò)苯酚硫酸法測(cè)定多糖含量[6]。
1.2.3 三萜提取測(cè)定
稱(chēng)取20 g靈芝樣品,按1∶20的料液體積比加入95%的乙醇,攪拌混勻后,300 W(30%)超聲1 h,超聲完成后浸泡8 h,抽濾獲得靈芝三萜提取液。以熊果酸為標(biāo)準(zhǔn)品,采用香草醛-冰醋酸法測(cè)定三萜含量[7]。精確移取樣品0.1 mL,置于10 mL容量瓶中,加入新制的香草醛-冰醋酸溶液0.6 mL,再加入1.2 mL的濃硫酸搖勻,于70℃恒溫水浴上保溫反應(yīng)30 min,流水冷卻至室溫,再加入冰醋酸定量到10 mL,搖勻。同時(shí)做空白對(duì)照,在552 nm處測(cè)定體系的吸光度。
1.2.4 不同品種靈芝的抗氧化活性測(cè)定
不同品種的靈芝經(jīng)粉碎后,按照1.2.2獲得多糖提取物,提取物經(jīng)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,冷凍干燥后備用。進(jìn)行清除DPPH自由基能力測(cè)定[8],超氧自由基(O2-)清除率測(cè)定[9],羥自由基(·OH)清除率的測(cè)定[10]。
1.3.1 脾細(xì)胞懸液制備
對(duì)SPF級(jí)6 W齡(18~22 g)的BALB/C小鼠進(jìn)行無(wú)菌取脾,置于盛有適量(3~5 mL)無(wú)菌Hank's液平皿中,并在脾上面放置一塊紗布,用大號(hào)注射器內(nèi)芯輕輕將脾磨碎,制成單個(gè)細(xì)胞懸液。經(jīng)篩孔尺寸為0.075 mm的篩網(wǎng)過(guò)濾,用Hank's液洗2次,每次離心10 min(1 000 r/min)。然后將細(xì)胞懸浮于2 mL的完全培養(yǎng)液中,用全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)脾細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞濃度為3×106個(gè)/mL。
1.3.2 淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)
將細(xì)胞懸液分兩孔加入24孔培養(yǎng)板中,每孔1 mL,每孔加75 mL ConA液(相當(dāng)于7.5μg/mL),加入不同濃度的靈芝多糖提取物(0.05、0.1、0.5、1 mg/mL)100μL,以緩沖液替代靈芝提取物作為陰性對(duì)照,未加細(xì)胞的孔作為空白對(duì)照。置5%CO2,37℃CO2孵箱中培養(yǎng)72 h。培養(yǎng)結(jié)束前4 h,每孔輕輕吸去上清液0.7 mL,加入0.7 mL不含小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液,同時(shí)加入MTT(5 mg/mL)50μL/孔,繼續(xù)培養(yǎng)4 h。培養(yǎng)結(jié)束后,每孔加入1 mL酸性異丙醇,超聲震蕩(2 s)或人工吹打混勻,使紫色結(jié)晶完全溶解。然后分裝到96孔培養(yǎng)板中,每個(gè)孔分裝3孔作為平行樣,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀,以570 nm波長(zhǎng)測(cè)定OD值。
表1 不同靈芝菌株子實(shí)體農(nóng)藝性狀及轉(zhuǎn)化率比較Table 1 Comparison of agronomic characters and conversion rateof different Ganodermalucidum strains
試驗(yàn)測(cè)定的數(shù)據(jù)結(jié)果全部用±s表示,用SPSS17.0軟件對(duì)結(jié)果進(jìn)行t檢驗(yàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
從表1可以看出,5個(gè)靈芝菌株其子實(shí)體的菌蓋直徑、菌蓋厚度和菌柄長(zhǎng)度相互間存在較大差異。黃靈芝(HLZ)的菌蓋直徑最大達(dá)到(17.42±1.03)cm,其次為圓芝8號(hào),金地靈芝(JD)的菌蓋直徑最小僅為(8.76±1.20)cm,5個(gè)靈芝的菌蓋直徑相互間存在顯著差異(P<0.05);黃靈芝和圓芝8號(hào)(YZ8)靈芝菌蓋厚度較大,二者間不存在顯著差異(P>0.05),金地靈芝的菌蓋最?。辉诰L(zhǎng)度上,金地靈芝和圓芝8號(hào)菌柄較長(zhǎng),兩者間不存在顯著差異(P>0.05),黃靈芝菌柄最短;圓芝8號(hào)的轉(zhuǎn)化率最高達(dá)到1.64%,其次為黃靈芝1.58%,最低的為金地靈芝,其轉(zhuǎn)化率為0.64%。從下圖1中可以看出,金地靈芝生長(zhǎng)整齊度表現(xiàn)一般,有單朵生長(zhǎng)也有連芝現(xiàn)象,黃色邊緣尚未全部消失就有孢子粉彈出;黃靈芝出芝最晚且稀疏,分支較少,在菌蓋生長(zhǎng)階段其邊緣為黃色,單朵菌蓋直徑最大,且菌蓋較厚,干產(chǎn)量轉(zhuǎn)化率也較高,綜合表現(xiàn)較好;平芝(PZ)菌株出芝最早,成熟時(shí)間短,菌蓋邊緣較平展,分芝較多,菌柄短,產(chǎn)孢量較其他品種多;圓芝8號(hào)出芝較整齊,不易分支,色澤較好,成熟時(shí)背面為金黃色,子實(shí)體外觀整齊,單朵菌蓋成腎型;靈白(LB)菌株出芝整齊度最差,在菌蓋分化階段,其菌蓋邊緣為白色,易分支,菌蓋厚度較小。綜合子實(shí)體農(nóng)藝性狀和轉(zhuǎn)化率可以看出圓芝8號(hào)菌株表現(xiàn)最好,適合進(jìn)行推廣種植。
從圖2中可以看出5個(gè)靈芝菌株其子實(shí)體多糖含量在1.82%~2.1%之間,PZ最高達(dá)到2.1%,YZ8最低為1.82%,HLZ和JD、LB、YZ8存在差異顯著(P<0.05),具體順序?yàn)镠LZ>PZ>JD>LB>YZ8。從圖3中可以看出5個(gè)靈芝菌株其子實(shí)體三萜含量在0.84%~1.06%之間,最高的為JD,其次為PZ,而含量最低的為YZ8,僅為0.84%;JD和PZ兩者之間不存在顯著差異(P>0.05),它們與HLZ、LB、YZ8存在顯著差異(P<0.05)??芍?,以不同的靈芝菌株通過(guò)相同的栽培材料和栽培方法其子實(shí)體內(nèi)活性成分存在較大差異。結(jié)果顯示,以多糖為目標(biāo)進(jìn)行菌株篩選,HLZ為最佳菌株;以三萜為目標(biāo)進(jìn)行菌株篩選,JD為最佳菌株。
以5個(gè)不同靈芝子實(shí)體為原料,分析它們的抗氧化能力,對(duì)其水提物的DPPH清除率、羥自由基清除率、超氧自由基清除率進(jìn)行相互比較,以Vc為對(duì)照。從圖4結(jié)果中發(fā)現(xiàn),5個(gè)靈芝子實(shí)體均具有較強(qiáng)的清除DPPH能力,其清除能力范圍在0.945~0.969之間,各菌株之間沒(méi)有明顯的差異(P>0.05),均與Vc相當(dāng)。羥自由基清除率結(jié)果如圖5,清除能力范圍在0.234~0.629之間,存在顯著差異(P<0.05),清除能力最強(qiáng)的為HLZ,最低為PZ,JD、HLZ、YZ8這3種靈芝清除羥自由基的能力比Vc強(qiáng),PZ和LB較Vc弱。從圖6超氧自由基清除率結(jié)果看出,5種靈芝的清除能力范圍在0.455~0.550之間,清除能力都較Vc弱,PZ和YZ8清除能力較強(qiáng),二者間不存在顯著差異,JD、HLZ和LB三者間不存在顯著差異(P>0.05),但與PZ和YZ8存在顯著差異(P<0.05),具體清除率順序?yàn)閂c>YZ8>PZ>HLZ>LB>JD。綜合得出HLZ和YZ8對(duì)自由基的清除能力較JD、PZ和LB強(qiáng)。
圖1 段木栽培子實(shí)體圖Figure 1 Fruiting bodies of cut-log cultivation
圖2 不同靈芝菌株其子實(shí)體多糖含量Figure 2 Polysaccharide content of different Ganoderma lucidum strains
圖3 不同靈芝菌株其子實(shí)體三萜含量Figure 3 Triterpenoids content of different Ganoderma lucidum strains
5個(gè)靈芝子實(shí)體為原料,以水提液中多糖濃度為變量,比較分析不同濃度多糖靈芝水提液體外給藥對(duì)免疫細(xì)胞功能的影響。從圖7結(jié)果中可以看出,JD、HLZ、LB、YZ8其對(duì)脾細(xì)胞的增殖作用隨著濃度的不斷提高,脾細(xì)胞的增殖先降低后升高,而PZ對(duì)脾細(xì)胞的增殖作用隨著濃度的不斷提高,其增殖作用隨之提高。HLZ、YZ8在水提液多糖濃度從0.1 mg/mL提高到0.5 mg/mL時(shí),其增殖作用明顯增強(qiáng),LB在水提液多糖濃度為0.05 mg/mL時(shí)其增殖作用最強(qiáng),濃度越高其增殖作用反而變?nèi)趿恕?個(gè)靈芝子實(shí)體水提液多糖濃度為0.05 mg/mL時(shí),LB增殖作用最強(qiáng),PZ最低;水提液多糖濃度為0.10 mg/mL時(shí),其A700值與水體系相當(dāng),故其還原能力最弱[11],5個(gè)靈芝菌株子實(shí)體的增殖作用相互之間不存在顯著差異;水提液多糖濃度為0.50 mg/mL時(shí),HLZ增殖作用最強(qiáng),PZ最低;JD、HLZ、LB和YZ8這4個(gè)靈芝菌株其子實(shí)體水提液多糖濃度在0.50 mg/mL和1.00 mg/mL時(shí)其脾細(xì)胞增殖作用相互間不存在顯著差異(P>0.05),PZ的不同濃度水提液對(duì)脾細(xì)胞的增殖作用相互間存在顯著差異(P<0.05)。
圖4 不同靈芝子實(shí)體水提物對(duì)DPPH的清除率Figure 4 Scavenging rate of DPPH in aqueous extract of Ganoderma lucidum
圖5 不同靈芝子實(shí)體水提物對(duì)羥自由基的清除率Figure 5 Scavenging rates of hydroxyl radicals from aqueous extracts of different Ganoderma lucidum
圖6 不同靈芝子實(shí)體水提物對(duì)超氧自由基的清除率Figure 6 Scavenging rates of supernatant free radicals from aqueous extracts of different Ganoderma lucidum
圖7 不同靈芝子實(shí)體水提物濃度對(duì)脾細(xì)胞的增殖作用Figure 7 Effect of aqueous extract of Ganoderma lucidum on the proliferation of spleen cells
本研究對(duì)5種靈芝菌株的子實(shí)體農(nóng)藝性狀、轉(zhuǎn)化率、活性成分、抗氧化能力以及對(duì)脾細(xì)胞的增殖作用進(jìn)行了分析。
目前,市場(chǎng)上栽培的靈芝主要以子實(shí)體農(nóng)藝性狀和轉(zhuǎn)化率為依據(jù)進(jìn)行分析[12],如林興生等[13]對(duì)10個(gè)赤芝通過(guò)段木栽培模式進(jìn)行栽培特性分析,發(fā)現(xiàn)雖然在分類(lèi)學(xué)名上統(tǒng)稱(chēng)為赤芝然其栽培特性差異較大,其中菌株8、新6產(chǎn)量高,子實(shí)體農(nóng)藝性狀較好。王慶武等[14]通過(guò)代料栽培模式對(duì)17個(gè)靈芝菌株進(jìn)行農(nóng)藝性狀分析,發(fā)現(xiàn)各靈芝菌株其芝片形狀、芝柄、轉(zhuǎn)化率差異較大,靈芝泰山-4耐二氧化碳適宜做盆景,靈芝P1產(chǎn)量高適合大面積推廣。本研究對(duì)5個(gè)靈芝菌株進(jìn)行段木栽培,分別從子實(shí)體農(nóng)藝性狀和轉(zhuǎn)化率進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)不同的靈芝菌株其子實(shí)體外觀形狀、色澤、產(chǎn)孢量和出芝整齊度差別較大,如以子實(shí)體的農(nóng)藝性狀和干產(chǎn)量轉(zhuǎn)化率為指標(biāo),圓芝8號(hào)菌株表現(xiàn)最好,較適合推廣種植。
靈芝多糖和三萜類(lèi)化合物是靈芝的主要活性成分,逐漸成為衡量靈芝品質(zhì)的一個(gè)重要指標(biāo)[15-16]。有較多學(xué)者對(duì)不同靈芝的多糖和三萜化合物含量進(jìn)行研究,周連玉等[17]對(duì)8個(gè)靈芝菌株通過(guò)代料栽培進(jìn)行子實(shí)體產(chǎn)量和多糖含量研究,發(fā)現(xiàn)各靈芝子實(shí)體產(chǎn)量和多糖含量存在顯著差異,并且產(chǎn)量高的菌株其多糖含量不一定高。齊川等[18]通過(guò)對(duì)11個(gè)靈芝子實(shí)體活性成分測(cè)定分析,結(jié)果顯示不同靈芝品種子實(shí)體均含有較高總多糖和總?cè)?,然而它們之間的含量均存在顯著差異,有的品種其多糖含量較高,但三萜含量卻較低,其子實(shí)體內(nèi)多糖和三萜含量不存在協(xié)同相關(guān)性。付立忠等[19]通過(guò)對(duì)12個(gè)不同靈芝菌株子實(shí)體進(jìn)行多糖和三萜含量分析,發(fā)現(xiàn)不同靈芝菌株子實(shí)體的多糖和三萜含量存在較大差異。本研究對(duì)5個(gè)靈芝菌株子實(shí)體進(jìn)行多糖和三萜化合物含量分析,發(fā)現(xiàn)不同的靈芝菌株通過(guò)相同的栽培材料和栽培方法其子實(shí)體內(nèi)活性成分存在較大差異,多糖含量高的菌株其三萜化合物含量反而低,這一結(jié)果與前人研究結(jié)果類(lèi)似。
靈芝的抗氧化作用一直是學(xué)術(shù)界的熱門(mén)研究課題,大量研究結(jié)果表明靈芝具有較強(qiáng)的抗氧化能力。Pan K.等[20]的研究結(jié)果表明靈芝對(duì)胃癌大鼠具有免疫調(diào)節(jié)作用以及抗氧化清除自由基作用,Tie L.等[21]發(fā)現(xiàn)靈芝多糖能抑制糖尿病小鼠皮膚的Mn-SOD硝化,增強(qiáng)Mn-SOD和GPX活性,抑制氧化還原酶P66ShC的表達(dá)和磷酸化,Jia J.等[22]研究結(jié)果顯示靈芝多糖能夠使大鼠體內(nèi)抗氧化酶量和胰島素含量顯著升高,同時(shí)降低脂質(zhì)過(guò)氧化作用和血糖含量,可見(jiàn)靈芝多糖是一種有效的抗氧化物。聶健等[23]研究7個(gè)不同靈芝菌株的熱水提取物的體外抗氧化活性,發(fā)現(xiàn)各種靈芝子實(shí)體熱水提取物均有不同程度的體外抗氧化能力,同一濃度下不同靈芝菌株的體外抗氧化能力差異較大。曹正等[24]研究不同靈芝的功能性成分含量和抗氧化活性,發(fā)現(xiàn)不同品種間的活性成分含量差異較大,活性成分含量高的菌株其抗氧化能不一定高,同一菌株的活性成分濃度越高其抗氧化能力越高。楊德等[25]研究發(fā)現(xiàn)多糖濃度與清除羥基自由基和超氧陰離子的能力呈正相關(guān)。張志軍等[26]研究表明靈芝具有較強(qiáng)的抗氧化活性和清除自由基的能力,且多糖濃度越高其抗氧化能力越強(qiáng),二者有一定的依賴(lài)性;董揚(yáng)[27]等研究同樣表明抗氧化活性與多糖質(zhì)量濃度呈一定效量關(guān)系,多糖質(zhì)量濃度越高,抗氧化活性越強(qiáng)。本研究對(duì)5個(gè)靈芝菌株的抗氧化能力進(jìn)行比較發(fā)現(xiàn),不同的靈芝菌株其抗氧化能力差異較大,這一結(jié)果與前人研究相似,5個(gè)靈芝菌株的抗氧化能力都很強(qiáng),總體上HLZ的抗氧化能力最強(qiáng),YZ8次之。大量研究結(jié)果顯示靈芝水提液具有很強(qiáng)的抗氧化能力,但其能力強(qiáng)弱并不僅僅由多糖和三萜化合物總含量控制,可能還有很多其他物質(zhì)共同起作用,這里需要更進(jìn)一步研究,而且多糖和三萜類(lèi)化合物的種類(lèi)、結(jié)構(gòu)、分子量也與其功能密切相關(guān),以至于具體的哪種活性物質(zhì)起主導(dǎo)作用以及它的作用機(jī)制還需要更深一步的研究。
脾臟是動(dòng)物機(jī)體最主要的免疫器官之一,是機(jī)體發(fā)揮防御功能的重要器官,脾臟指數(shù)可作為反映動(dòng)物機(jī)體免疫機(jī)能的客觀指標(biāo)之一[28],靈芝活性物質(zhì)多糖能顯著刺激小鼠脾淋巴細(xì)胞的增殖作用,增強(qiáng)Con A誘導(dǎo)的淋巴細(xì)胞增殖。從本研究的試驗(yàn)結(jié)果可以看出,5個(gè)靈芝子實(shí)體活性物質(zhì)多糖能顯著提高脾細(xì)胞的增殖作用,多糖濃度越高,脾細(xì)胞的增殖作用越強(qiáng)。這一結(jié)果與較多學(xué)者的研究結(jié)果相似,如鄒佳妤等[29]研究報(bào)道隨著多糖濃度的增加脾臟指數(shù)也隨之增加,二者呈現(xiàn)一定的量效相關(guān)性,丁佩娥等[30]研究報(bào)道靈芝多糖能顯著促進(jìn)小鼠脾細(xì)胞的增殖反應(yīng),且在一定范圍內(nèi)呈濃度依賴(lài)趨勢(shì)。這些結(jié)果都表明靈芝多糖能促進(jìn)脾腺的組織分化和細(xì)胞增生,促進(jìn)免疫器官的發(fā)育,增加脾腺免疫器官的重量,增大免疫指數(shù)。由此可見(jiàn),靈芝多糖能顯著提高機(jī)體的免疫力,在一定濃度范圍內(nèi),多糖濃度越高其免疫力越強(qiáng)。另外,從本研究結(jié)果還可以看出不同的靈芝菌株其對(duì)脾細(xì)胞的增殖作用差距較大,HLZ的增殖作用最強(qiáng),PZ最低。
目前市場(chǎng)上廣泛栽培的靈芝品種非常多,由于靈芝菌種活性退化較快,優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)菌株篩選一直是育種工作者的重點(diǎn)內(nèi)容。隨著人們消費(fèi)觀念的變化,消費(fèi)者不再只重視其外觀品質(zhì)而對(duì)其藥效保健作用更加關(guān)注,因而,對(duì)如何提高靈芝活性成分的產(chǎn)量成為現(xiàn)在人們致力研究的重點(diǎn)問(wèn)題。大量研究學(xué)者發(fā)現(xiàn)不同的靈芝菌株通過(guò)相同的栽培原料、相同的栽培方式,其子實(shí)體內(nèi)活性成分含量差異較大,因此,通過(guò)篩選出高活性高產(chǎn)量的靈芝菌株成為行之有效的途徑之一。
四川農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)2019年1期