董 艷，姚魁武，劉詠梅，張 云，陳 光，2，王 階＊＊

（1.中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院 北京 100053；2.北京中醫(yī)藥大學(xué)廣安門醫(yī)院 北京 100029）

非編碼RNA（ncRNA）是不編碼蛋白質(zhì)的RNA，參與調(diào)控多種疾病的發(fā)生與發(fā)展[1-3]。作為占真核細(xì)胞總RNAs 95%以上[4]的功能RNA，其在藥物靶點領(lǐng)域也受到越來越多研究者的重視。而一直以來中藥的肯定療效和模糊作用機理促成了其在矛盾中尋求自我發(fā)展。盡管中藥提取物被認(rèn)為具有更高純度和相對明確的活性成分，但將其代替?zhèn)鹘y(tǒng)中藥的有效性和安全性仍然受到質(zhì)疑。ncRNA的出現(xiàn)從表觀遺傳學(xué)角度為中藥活性成分研究提供了新方向，有助于從上游基因調(diào)控層面明確作用靶點，揭示其多靶點多層次治療疾病的本質(zhì)，促進(jìn)“中藥成分—靶點—分子機制—疾病”的精準(zhǔn)醫(yī)療模式的實現(xiàn)。目前，有關(guān)中藥活性成分干預(yù)ncRNAs 的研究已如雨后春筍，故本文對相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行綜述，以梳理發(fā)展現(xiàn)狀并闡述尚存在的問題。

1 以多種ncRNAs為靶點的抗腫瘤中藥活性成分

越來越多的研究發(fā)現(xiàn)某些中藥活性成分可通過調(diào)節(jié)miRNA 的表達(dá)而發(fā)揮抗腫瘤作用。而lncRNA 和circRNA 作為內(nèi)源性競爭性非編碼RNA（ceRNA），能通過miRNA 識別元件，競爭性結(jié)合miRNA，從而誘導(dǎo)基因沉默[5]。因此，這些ceRNAs 同樣具有成為中藥靶點的潛能，進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤作用（表1）。

1.1 小檗堿下調(diào)miRNAs，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡和周期停滯

小檗堿（分子式C20H19NO5）是一種季銨生物堿，為黃連、黃柏及三顆針等中藥的活性提取物，具有抗炎、抗腫瘤、降血糖、降血脂及抗心律失常等作用[6]。越來越多的研究發(fā)現(xiàn)其抗腫瘤機制與多種miRNAs 相關(guān)。通過下調(diào)3 個miRNA 簇（miR-99a-125b、miR-17-92和miR-106-25），以 及RAC1、NFκB1、MYC、JUN 和CCND1 等多個靶基因，小檗堿調(diào)控p53、Erb 和MAPK信號通路，抑制多發(fā)性骨髓瘤[7]。另一項研究[8]則顯示，它至少部分通過調(diào)節(jié)IL6/STAT3，下調(diào)miR-21，增加程序性細(xì)胞死亡蛋白4（PDCD4）表達(dá)，阻滯p53信號通路，從而抑制多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞生長，且該作用可被PDCD4 沉默所逆轉(zhuǎn)。進(jìn)一步實驗證實[7,8]，小檗堿具有類似mir-99a-125b 簇和miR-21 抑制劑的作用，通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、G2期細(xì)胞周期停滯和集落抑制從而發(fā)揮抗腫瘤作用。因此，小檗堿調(diào)節(jié)多種基因表達(dá)，其主要的調(diào)控通路為p53 信號通路，參與的細(xì)胞功能為抑制腫瘤細(xì)胞周期和誘導(dǎo)凋亡，而這種治療作用的潛在上游靶點為mir-99a-125b簇和miR-21。

表1 以多種ncRNAs為靶點的抗腫瘤中藥活性成分

此外，小檗堿還能與抗腫瘤藥物聯(lián)合作用，減弱西藥耐藥性，增強臨床療效。順鉑耐藥細(xì)胞系中miR-93 水平高于順鉑敏感細(xì)胞系，小檗堿可以抑制miR-93 在卵巢癌中的表達(dá)和功能，增加腫瘤抑制因子PTEN表達(dá)，調(diào)節(jié)miR-93/PTEN/AKT 信號通路，從而增強順鉑的促細(xì)胞凋亡作用，并誘導(dǎo)G0/G1 細(xì)胞周期停滯，增強順鉑對卵巢癌細(xì)胞的敏感性[9]。

1.2 姜黃素靶向調(diào)節(jié)lncRNA-miRNA，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，抑制腫瘤侵襲

姜黃素（分子式C21H20O6）是從姜黃中提取的酚類化合物，具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化及抗纖維化等作用[10]。其抗腫瘤作用與調(diào)節(jié)多種lncRNAs 和miRNAs相關(guān)。姜黃素上調(diào)胰腺癌相關(guān)miR-22，下調(diào)靶基因雌激素受體1（ESR1）和轉(zhuǎn)錄因子SP1，抑制胰腺癌細(xì)胞生長和侵襲[11]；并能抑制EZH2 亞基及其相關(guān)lncRNA PVT1 的表達(dá)，增強化療耐藥胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞的敏感性[12]。它還能抑制lncRNA-ROR，上調(diào)miR-145 表達(dá)，降低細(xì)胞周期蛋白Ccnd1和Cdk4，以及Oct4、CD44和CD133 等干細(xì)胞標(biāo)記物，進(jìn)而抑制人前列腺癌干細(xì)胞的體外增殖、侵襲和細(xì)胞周期停滯[13]。通過上調(diào)lncRNA AK125910 表達(dá)，姜黃素還能誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞凋亡[14]。它抑制miR-203 啟動子甲基化，上調(diào)miR-203表達(dá)，下調(diào)Akt2 和Src，進(jìn)而抑制膀胱癌細(xì)胞增殖，并誘導(dǎo)凋亡[15]。通過抑制激活蛋白1（AP-1）與啟動子的結(jié)合，它以劑量依賴性方式降低miR-21 啟動子活性和表達(dá)，并誘導(dǎo)腫瘤抑制因子PDCD4 表達(dá)，從而抑制結(jié)腸直腸癌細(xì)胞生長，侵襲和體內(nèi)轉(zhuǎn)移[16]。

由此可見，姜黃素能從miRNAs 和lncRNAs 兩個層面發(fā)揮不同的抗腫瘤作用，它們之間構(gòu)成了潛在的ceRNA 交互網(wǎng)絡(luò)。通過干預(yù)lncRNA-ROR/miR-145/細(xì)胞周期蛋白/干細(xì)胞標(biāo)記物調(diào)控網(wǎng)絡(luò)，姜黃素表現(xiàn)出抗前列腺癌作用。而在胰腺癌中，lncRNA PVT1 和miR-22/ESR1 被發(fā)現(xiàn)參與姜黃素的抗腫瘤作用，它們之間亦或存在直接或間接的調(diào)控關(guān)系，值得進(jìn)一步深入研究。

1.3 紫草素、雷公藤甲素分別調(diào)節(jié)lncRNA和miRNA，恢復(fù)靶向藥物敏感性

紫草素（分子式C16H16O5）是一種天然茶醌類衍生化合物，存在于中藥紫草根中，具有抗炎、抗病原微生物、抗腫瘤，以及抑制脂肪和雌激素形成等作用[17]。雷公藤甲素（分子式C20H24O6）則是從雷公藤中提取的環(huán)氧二萜內(nèi)酯化合物，具有抗腫瘤、抗炎和免疫調(diào)節(jié)等作用[18]。隨著腫瘤化療藥的普遍使用，耐藥現(xiàn)象越來越廣泛，顯著降低了其臨床療效；而中藥活性成分能增強藥物敏感性，降低耐藥性而發(fā)揮獨特的協(xié)同作用。研究[19]顯示抗他莫昔芬的MCF-7R 乳腺癌細(xì)胞中存在lncRNA uc.57 低表達(dá)和BCL11A 高表達(dá)。紫草素能通過上調(diào)lncRNA uc.57，下調(diào)BCL11A，抑制PI3K/AKT 和MAPK 信號通路，從而增強他莫昔芬的敏感性。而雷公藤甲素聯(lián)合阿霉素則能促進(jìn)K562/A02 細(xì)胞的凋亡指數(shù)，其潛在機制可能為雷公藤甲素抑制miR-21表達(dá)，增強白血病細(xì)胞對阿霉素的敏感性[20]。

1.4 芍藥苷、丹參酮、厚樸酚、木犀草素、肉桂醛上調(diào)保護(hù)性miRNA 和circRNA，抑制腫瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)凋亡

芍藥苷（分子式C23H28O11）是芍藥根的主要活性成分，具有舒張平滑肌、抗氧化、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等作用[21]。丹參酮（分子式C18H12O3）為丹參的脂溶性菲醌類提取物，包括丹參酮I、丹參酮IIA、丹參酮IIB 等多種活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗血小板聚集、抗腫瘤及性激素樣等作用[22]。厚樸酚（分子式C18H18O2）源于廣玉蘭的生物活性多酚，具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤及抗動脈粥樣硬化等作用[23]。木犀草素（分子式C15H10O6）是全葉青蘭、野菊花、金銀花、石榴和紫蘇等植物的黃酮類成分，具有抗炎、抗氧化、抗腫瘤及神經(jīng)保護(hù)等作用[24]。肉桂醛（分子式C9H8O）是肉桂的醛類提取物，具有抗腫瘤、抗炎、抗氧化和保護(hù)缺血再灌注損傷等作用[25]。研究顯示miR-16、miR-32、miR-34a及miR-630 等在多種腫瘤細(xì)胞中低表達(dá)，具有抑制腫瘤的作用。中藥活性成分通過上調(diào)這些保護(hù)性基因，進(jìn)而發(fā)揮抗腫瘤功效。

MiR-16 在神經(jīng)膠質(zhì)瘤組織中下調(diào)，而芍藥苷通過上調(diào)miR-16，下調(diào)MMP-9，發(fā)揮抑制腫瘤細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)凋亡的作用[26]。丹參酮則通過上調(diào)miR-32，下調(diào)AURKA，抑制細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，從而抗非小細(xì)胞肺癌[27]；且進(jìn)一步實驗證實，沉默AURKA 基因能獲得與上述觀察一致的結(jié)果。厚樸酚抑制Stat3 磷酸化，阻止其向miR-34a啟動子募集，誘導(dǎo)miR-34a活化，阻滯瘦素誘導(dǎo)Wnt1-MTA1-β-連環(huán)蛋白信號通路，進(jìn)而抑制肥胖狀態(tài)下乳腺癌細(xì)胞生長、侵襲、遷移，以及瘦素誘導(dǎo)的乳腺-腫瘤-異種移植物生長[28]。在前列腺癌細(xì)胞中，木犀草素能上調(diào)miR-630和miR-5703，抑制腫瘤細(xì)胞生長[29]。此外，肉桂醛靶向上調(diào)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞中hsa_circ_0043256 表達(dá)，抑制Wnt/β-catenin 通路，減弱細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[30]。而hsa_circ_0043256 誘導(dǎo)的Itchy E3 泛素蛋白連接酶（ITCH）表達(dá)能被miR-1252 部分消除，表明其與miR-1252 存在相互調(diào)節(jié)關(guān)系。由此可以推測，肉桂醛介導(dǎo)的抗腫瘤作用與hsa_circ_0043256/miR-1252 交互網(wǎng)絡(luò)相關(guān)。

1.5 白藜蘆醇、青蒿琥酯下調(diào)促腫瘤miRNA 和lncRNA，抑制細(xì)胞增殖和遷移，誘導(dǎo)凋亡

白藜蘆醇（分子式C14H12O3）是一種多酚類化合物，為虎杖、葡萄、花生等植物的活性提取物，具有抗炎、抗氧化和抗腫瘤等作用[31]。青蒿琥酯（分子式C19H28O8）是青蒿葉的倍半萜內(nèi)酯提取物，具有抗瘧、抗腫瘤及免疫調(diào)節(jié)等作用[32]。研究表明，miR-151、miR-21和lncRNA UCA1在多種腫瘤細(xì)胞中上調(diào)，具有促腫瘤作用；而中藥活性成分通過下調(diào)這些ncRNAs 而發(fā)揮抗腫瘤功效。其中白藜蘆醇下調(diào)miR-151 表達(dá)，抑制肝癌HepG2 細(xì)胞株增殖，并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[33]。而在胰腺癌中，它通過下調(diào)miR-21，調(diào)控BCL-2 表達(dá)而誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡[34]。青蒿琥酯則下調(diào)lncRNA UCA1 水平，參與下游miR-184/Bcl-2 信號通路，抑制細(xì)胞增殖和侵襲，誘導(dǎo)凋亡，從而改善前列腺癌患者的不良預(yù)后；且這種作用能被lncRNA UCA1 高表達(dá)所逆轉(zhuǎn)[35]。由此可見，青蒿琥酯能從lncRNA-miRNA-mRNA 的網(wǎng)絡(luò)層面發(fā)揮抗腫瘤機制。

2 以miRNAs、lncRNAs為靶點的抗炎性中藥活性成分

炎癥參與多種疾病的病理過程，與冠心病、哮喘及炎癥性腸病等的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。但目前無論是非甾體類抗炎藥還是免疫抑制劑都存在較大的副作用，因此作為疾病基礎(chǔ)病理改變的炎癥反應(yīng)尚缺乏有效的藥物治療。而中藥在這方面表現(xiàn)出顯著的治療優(yōu)勢，其活性成分可通過調(diào)節(jié)miRNA 或lncRNA，抑制多種炎癥因子，進(jìn)而在炎癥相關(guān)性疾病中發(fā)揮重要的基礎(chǔ)治療作用（表2）。

表2 以miRNAs、lncRNAs為靶點的抗炎性中藥活性成分

2.1 丹參酮ⅡA雙向調(diào)節(jié)miRNAs，抗炎抗心律失常

丹參酮ⅡA（分子式C19H18O3）為丹參酮的主要組成部分，也是其發(fā)揮藥效的成分之一，具有抗氧化和抗動脈粥樣硬化等作用[36]。研究[37]發(fā)現(xiàn)丹參酮ⅡA 還具有抗炎功效，且這種作用與多種miRNAs 密切相關(guān)。通過下調(diào)miR-155、miR-147、miR-184、miR-29b 和miR-34c表達(dá)，它能降低細(xì)胞因子，趨化因子和急性期GM-CSF、sICAM-1、cxcl-1、MIP-1α 水平，抑制LPS 誘導(dǎo)的NF-κB 活化，降低腫瘤壞死因子α（TNF-α）、IL-1β、COX-2、TLR4 和MyD88 等[37]。另有報道則顯示，丹參酮ⅡA 增加心梗后miR-1 表達(dá)，抑制其基因轉(zhuǎn)錄激活因子SRF，恢復(fù)大鼠心室肌細(xì)胞中低IK1 電流和Kir2.1 蛋白，進(jìn)而降低急性心肌缺血誘發(fā)的心律失常及心梗3 個月后大鼠的死亡率[38]。由此可見，丹參酮ⅡA 作為傳統(tǒng)活血化瘀中藥的主要活性成分，其抗炎和抗心律失常的心臟保護(hù)作用與雙向調(diào)節(jié)miRNAs 密切相關(guān)。但遺憾的是，它的miRNAs 靶點并不能直接作為其發(fā)揮活血化瘀功效的客觀依據(jù)，因此進(jìn)一步針對性的開展活血化瘀相關(guān)的靶基因研究，對于揭示中藥傳統(tǒng)功效的作用機理有重要的現(xiàn)實意義。

2.2 五味子乙素、香芹酚調(diào)節(jié)miRNA、lncRNA，抗細(xì)胞增殖及炎癥因子，抑制哮喘的炎癥反應(yīng)

五味子乙素（分子式C23H28O6）為五味子的木脂素提取物，具有保肝、抗衰老及心臟、神經(jīng)保護(hù)作用[39]。香芹酚（分子式C10H14O）及其異構(gòu)體百里香酚是百里香的主要單萜酚成分，具有調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)鈣離子平衡、舒張血管、保肝、抑菌、抗真菌及抗氧化等作用[40]。通過上調(diào)miR-150，下調(diào)lncRNA BCYRN1 表達(dá)，五味子乙素能抑制哮喘大鼠氣道平滑肌細(xì)胞增殖和遷移[41]。香芹酚及百里香酚則通過下調(diào)miR-155、miR-146a 及miR-21，降低炎癥因子TLR4 和TLR2 的蛋白水平，增加TLR 的負(fù)調(diào)節(jié)劑SHIP1 和SOCS1 水平，進(jìn)而抑制哮喘炎癥反應(yīng)[42]。以上研究表明，哮喘的炎癥反應(yīng)受miRNA 和lncRNA 的調(diào)節(jié)，而中藥活性成分靶向調(diào)控這些ncRNAs 進(jìn)而發(fā)揮治療作用。值得注意的是，在五味子介導(dǎo)的miR-150/lncRNA BCYRN1 調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中，miR-150 為lncRNA BCYRN1 的上游調(diào)控基因，這種交互作用與常規(guī)的ceRNA 網(wǎng)絡(luò)并不相同，表明了miRNA和lncRNA之間存在著復(fù)雜的雙向調(diào)節(jié)關(guān)系。

2.3 黃芩苷下調(diào)miR-191a，改善細(xì)胞活力，治療炎癥性腸病

黃芩苷（分子式C21H18O11）是從黃芩中提取的黃酮苷類活性成分，具有抗菌、抗病毒及保肝等作用[43]。它可逆轉(zhuǎn)TNF-α誘導(dǎo)的小腸內(nèi)皮細(xì)胞ZO-1 減少和miR-191a增加，顯著改善細(xì)胞活力和遷移。進(jìn)一步實驗表明，抑制miR-191a 能增強黃芩苷對ZO-1 蛋白表達(dá)的恢復(fù)作用，保護(hù)TNF-α誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷，進(jìn)而為炎癥性腸病治療提供新思路[44]。由此可見，黃芩苷與miR-191a低表達(dá)之間存在協(xié)同增效的作用，一方面黃芩苷能下調(diào)miR-191a 表達(dá)，另一方面miR-191a 低表達(dá)又能促進(jìn)黃芩苷的細(xì)胞保護(hù)作用。此外，黃芩苷還可以抑制小鼠胚胎干細(xì)胞增殖，增加G1 期細(xì)胞，減少S 期或G2/M 期細(xì)胞。這種作用可能通過下調(diào)miR-294，降低c-jun 和c-fos表達(dá)實現(xiàn)，且該作用能被miR-294過表達(dá)所逆轉(zhuǎn)[45]。

3 靶向調(diào)節(jié)lncRNA 或miRNA 的抗動脈粥樣硬化性中藥活性成分

冠狀動脈粥樣硬化是冠心病和腦梗塞的重要病理改變，因此抗動脈粥樣硬化也成為了缺血性心腦血管疾病的基礎(chǔ)治療。目前循證依據(jù)較多的具有穩(wěn)定粥樣斑塊的藥物是他汀類，但該藥需長期服用，且具有損害肝功能和肌溶解的風(fēng)險，尤其對于老年患者，其副作用更加明顯。有鑒于此，尋找具有抗動脈粥樣硬化的藥物對于防治心腦血管疾病具有重要意義。而目前已有研究顯示，某些中藥活性成分可以通過調(diào)控lncRNA 和miRNA 的異常表達(dá)，發(fā)揮抗動脈粥樣硬化的作用（表3）。

表3 靶向調(diào)節(jié)lncRNA或miRNA的抗動脈粥樣硬化性中藥活性成分

表4 以miRNAs為靶點的抗感染中藥活性成分

3.1 芥子酸下調(diào)lncRNA-MALAT1，抑制細(xì)胞焦亡，抗糖尿病性動脈粥樣硬化

芥子酸（分子式C11H12O5）是白芥子、黃芥子的主要活性成分之一，具有保護(hù)高糖誘導(dǎo)的血管平滑肌損傷及同型半胱氨酸誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮損傷等作用[46,47]。研究[48]顯示，lncRNA-MALAT1 在糖尿病性動脈粥樣硬化大鼠的巨噬細(xì)胞中顯著上調(diào)；而低劑量芥子酸能降低lncRNA-MALAT1 水平，抑制血清內(nèi)皮素1（ET-1）和白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）含量，抑制骨髓來源巨噬細(xì)胞的細(xì)胞焦亡以及ASC、NRLP3 和Caspase-1 等焦亡相關(guān)蛋白的表達(dá)，從而抗糖尿病性動脈粥樣硬化。

3.2 虎杖苷靶向調(diào)節(jié)miR-214，抗動脈粥樣硬化合并肝功能不全

虎杖苷（分子式C20H22O8）是虎杖根莖的提取物，亦稱為白藜蘆醇苷，具有抗氧化、保護(hù)心肌缺血再灌注損傷、改善血管內(nèi)皮功能及降脂等作用[49]。一項動物研究[50]顯示，虎杖苷能顯著改善血糖，血清ALT、AST、TC、TG、LDL-C 和HDL-C 水平，以及肝組織中MDA 和SOD 含量，發(fā)揮抗動脈粥樣硬化和保護(hù)肝功能的作用。此外，它還能調(diào)控肝組織中miR-214 表達(dá)，而該ncRNA 或為虎杖苷調(diào)節(jié)血糖、血脂和肝功能的上游靶點，但它們之間的調(diào)節(jié)關(guān)系仍需進(jìn)一步更深入的研究。

4 以miRNAs為靶點的抗感染中藥活性成分

抗菌素和抗病毒藥物是治療感染性疾病的基礎(chǔ)用藥，然而隨著抗菌素濫用、耐藥菌及病毒變異等問題的逐漸凸顯，人們開始關(guān)注感染性疾病的其他治療藥物，而中醫(yī)藥在這發(fā)面表現(xiàn)出顯著的優(yōu)勢。研究表明，某些中藥活性成分能調(diào)控miRNA 的異常表達(dá)，進(jìn)而改善機體感染過程中的病理改變（表4）。

4.1 淫羊藿苷下調(diào)miR-34c，促成骨分化和礦物結(jié)節(jié)形成，治療細(xì)菌性骨丟失病

淫羊藿苷（分子式C33H40O15）是從淫羊藿中分離出的主要活性類黃酮葡萄糖苷，具有抗骨質(zhì)疏松、促進(jìn)造血及調(diào)節(jié)神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)等作用[51]。研究[52]顯示，淫羊藿苷可通過下調(diào)miR-34c表達(dá)，抑制JNKs、p38和NF-kB通路，恢復(fù)LPS誘導(dǎo)的骨丟失，從而治療細(xì)菌性骨丟失病。此外，它的這種促成骨分化和礦物結(jié)節(jié)形成的作用能被miR-34c 過表達(dá)所逆轉(zhuǎn)，進(jìn)一步證實了miR-34c作為淫羊藿苷靶點的潛能。該研究從轉(zhuǎn)錄后調(diào)控層面揭示了淫羊藿苷治療細(xì)菌性骨丟失病的作用靶點，也在一定程度上為傳統(tǒng)中藥淫羊藿治療骨關(guān)節(jié)疾病提供了客觀依據(jù)。

4.2 人參皂苷上調(diào)miR-15b，對抗H9N2 流感病毒誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡，促進(jìn)細(xì)胞活力

人參皂苷是從人參中提取的固醇類化合物，含有人參皂甙Re、Rg、Rh、Rb 及Rc 等多種活性成分，具有抗病毒、增強免疫力、抗炎、抗氧化、抗衰老及抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡等作用[53]。研究[54]顯示，其代謝物原人參三醇通過上調(diào)miR-15b 表達(dá)，抑制H9N2/G1 感染后IP-10 的生成，促進(jìn)細(xì)胞活力；而人參皂甙Re 則可抑制H9N2/G1 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和DNA 損傷。由此可見，miR-15b 或可成為人參皂苷抗病毒的重要靶點。該研究結(jié)果豐富了人參的傳統(tǒng)治療功效，擴(kuò)大了其臨床運用范圍，為研究中藥治療急性感染性疾病提供新的靶點和思路。

表5 靶向調(diào)節(jié)miRNA或circRNA的抗結(jié)構(gòu)重構(gòu)性中藥活性成分

5 靶向調(diào)節(jié)miRNA 或circRNA 的抗結(jié)構(gòu)重構(gòu)性中藥活性成分

結(jié)構(gòu)重構(gòu)是許多疾病發(fā)展至后期的難逆性病理改變，與組織器官的功能失調(diào)密切相關(guān)，目前針對結(jié)構(gòu)重構(gòu)尚缺乏有效的治療方法。中藥活性成分被證實能靶向調(diào)節(jié)某些circRNA 或miRNA（表5），從而逆轉(zhuǎn)結(jié)構(gòu)重構(gòu)，恢復(fù)機體正常功能，改善疾病預(yù)后。

5.1 三七總皂苷多靶點雙向調(diào)節(jié)miRNAs，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)血管生成，抗心肌纖維化

三七總皂苷（分子式C47H80O17）是三七根的主要活性成分，具有抗炎、抗動脈粥樣硬化、抑制心肌肥厚及保護(hù)缺血再灌注損傷等作用[55]。研究[56]顯示三七總皂苷能改善冠心病不穩(wěn)定型心絞痛血瘀證患者癥狀，其機制可能與下調(diào)miR-199a-5p 和miR-146b-5p 相關(guān)。進(jìn)一步研究證實，三七總皂苷可通過下調(diào)miR-146b-5p表達(dá)，抑制細(xì)胞凋亡，對抗H2O2誘導(dǎo)的細(xì)胞氧化損傷[57]。且通過上調(diào)miR-466b，下調(diào)Bcl2L13、Caspase-3和Caspase-9 蛋白，它還能抗急性心梗大鼠心肌細(xì)胞凋亡[58]。同時，它促進(jìn)心梗后VEGF 和miR-21 表達(dá)，促進(jìn)血管新生，從而縮小梗死面積[59]。有趣的是，另一項研究發(fā)現(xiàn)，三七總皂苷中的Rg1、Rb1 和R1 成分對血管生成表現(xiàn)出組織特異性調(diào)節(jié)，能減輕心肌缺血，同時抑制腫瘤生長。其潛在的機制可能是上調(diào)心臟中miR-18a、CD34 和vWF 表達(dá)，但下調(diào)腫瘤中這些基因及蛋白表達(dá)[60]。此外，它能上調(diào)心臟中抗纖維化miR-29c的表達(dá)，下調(diào)Col1a、Col1a2、Col3a1和Col5a1，以及Fbn1 和TGFβ1，從而減弱ISO 誘導(dǎo)的心肌損傷和纖維化[61]，改善結(jié)構(gòu)重構(gòu)。由此可見，三七總皂苷以多個miRNAs 為作用靶點，調(diào)控凋亡、血管生成及膠原蛋白相關(guān)分子，抑制細(xì)胞凋亡，促進(jìn)血管新生，抗心肌缺血和心肌纖維化。其中三七總皂苷靶向下調(diào)冠心病血瘀證的miR-146b-5p 表達(dá)，或能為三七的活血化瘀功效提供生物學(xué)基礎(chǔ)。

5.2 靈芝孢子油降低circRNA-Foxo3 表達(dá)，抗動脈粥樣硬化，抑制心室重構(gòu)

靈芝孢子油是從破壁的靈芝孢子中提取的油狀脂質(zhì)物，含有多種脂肪酸及不飽和脂肪酸等成分，具有抗腫瘤、提高免疫力、抗氧化、抗衰老及神經(jīng)保護(hù)等作用[62]。研究[63]顯示，口服靈芝孢子油還能使心臟射血分?jǐn)?shù)恢復(fù)正常，校正由橫向主動脈縮窄所致的分?jǐn)?shù)縮短，并抑制左心室肥大。其潛在機制可能為靈芝孢子油濃度和時間依賴性降低circ-Foxo3水平。該研究揭示了circ-Foxo3 的心臟保護(hù)作用，但遺憾的是并未報道circRNA 的靶基因；且以靈芝孢子油為研究對象，其活性成分并不明確。因此，該研究作為一個探索性的試驗，值得更深入和系統(tǒng)的研究。

隨著以miRNA、lncRNA 及circRNA 為代表 的ncRNAs 在中藥活性成分研究領(lǐng)域的日漸增多，明確中藥的作用靶點及調(diào)控機制，促進(jìn)中醫(yī)藥的精準(zhǔn)醫(yī)療將指日可待。盡管目前已有多種ncRNAs，尤其是miRNAs，被研究發(fā)現(xiàn)參與了中藥活性成分的治療過程，但是現(xiàn)有研究仍然存在以下幾點問題：①研究數(shù)量逐漸增多，但并不深入，未能構(gòu)建circRNA、lncRNA、miRNA 及mRNA 之間存在的復(fù)雜調(diào)控關(guān)系，因此不能系統(tǒng)的揭示中藥活性成分的作用機制；②大多數(shù)研究揭示了中藥的現(xiàn)代藥理作用和潛在治療靶點，但并未基于傳統(tǒng)中醫(yī)藥理論，因此難以構(gòu)建中藥傳統(tǒng)功效與客觀作用靶點之間的關(guān)系；③細(xì)胞研究是探索中藥活性成分作用ncRNA 靶點的主要方法，通過基因敲除或過表達(dá)，能發(fā)現(xiàn)它們與藥物之間存在的調(diào)節(jié)關(guān)系。但是這種在單細(xì)胞中存在的關(guān)系能否在人體的復(fù)雜系統(tǒng)里實現(xiàn)，仍需要進(jìn)行臨床試驗進(jìn)行驗證。因此，ncRNAs 的出現(xiàn)為中藥活性成分作用靶點研究提供了一個可預(yù)見的方向，但實踐中的研究之路仍任重而道遠(yuǎn)。