王日明，王志強，向佐湘

（1. 北部灣大學資源與環(huán)境學院，廣西 欽州 535011；2. 湖南芷蘭生態(tài)環(huán)境建設(shè)有限公司, 湖南 長沙 410000；3. 湖南農(nóng)業(yè)大學農(nóng)學院草業(yè)科學系, 湖南 長沙 410128）

草坪在現(xiàn)代城市發(fā)展和日常生活中起著越來越重要的作用。南方亞熱帶過渡區(qū)6-8月份氣溫常達35～38 ℃, 而對于大多數(shù)的冷季型草坪草來說，在夏季高溫條件下普遍難以越夏。多年生黑麥草(Lolium perenne)是城市和庭園綠化以及足球場運動草坪建植中常用的冷季型草種，因其具有草坪質(zhì)量優(yōu)異、分蘗性能好、成坪迅速等優(yōu)點，常被作為草坪建植的先鋒草種。黑麥草的最適生長溫度范圍為15～25 ℃，高于35 ℃時植株的生長發(fā)育不良，草坪質(zhì)量下降甚至植株死亡[1-2]。

溫度過高通常會傷害植物的細胞膜，進而影響植物的正常生長發(fā)育。高溫脅迫下植物體內(nèi)會產(chǎn)生大量的超氧陰離子 (superoxide anion, O2·ˉ)、單線態(tài)氧 (singlet oxygen,1O2) 以及過氧化氫 (hydrogen peroxide, H2O2)等 活 性 氧 (reactive oxygen species,ROS)[3]。但由于植物體內(nèi)同時具有相應(yīng)的ROS清除系統(tǒng)，使得ROS的產(chǎn)生和消除處于動態(tài)平衡狀態(tài)。當ROS含量到達一定程度或出現(xiàn)過剩時，破壞細胞內(nèi)的大分子結(jié)構(gòu)，造成細胞膜出現(xiàn)膜脂過氧化，導(dǎo)致植物代謝失調(diào)、光合降低等變化。在植物的細胞體內(nèi)存在由酶促抗氧化和非酶促抗氧化反應(yīng)組成的兩套ROS清除系統(tǒng)，酶促抗氧化主要 有 超 氧 化 物 歧 化 酶 (superoxide dismutase, SOD)、過氧化氫酶(catalase, CAT)、抗壞血酸過氧化物酶(ascorbate peroxidase, APX)及過氧化物酶 (Peroxidase,POD)等，高溫脅迫常誘導(dǎo)這些抗氧化酶大量合成和活性提高[4]。因此，SOD、POD、CAT和APX等抗氧化酶活性的高低常作為植物耐高溫能力的判定指標之一。

γ-氨基丁酸(GABA)是在動植物體內(nèi)普遍存在的四碳非蛋白類氨基酸。GABA可以作為外源小分子物質(zhì)參與到植物的生長發(fā)育和逆境脅迫調(diào)控等一系列的生理代謝途徑[5]。當植物受到水分、溫度、鹽堿等一些逆境脅迫時，植物體內(nèi)GABA的含量大量增加而抗逆性提高[6]。外源GABA可作為臨時氮庫，通過清除活性氧自由基[7-8]、調(diào)節(jié)pH和滲透調(diào)節(jié)等作用減緩逆境脅迫對植株的傷害[9]。外源GABA能夠增強番茄(Lycopersicon esculentum)[10-11]、網(wǎng)紋甜瓜(Cucumis melo)[7]、黃瓜(Cucumis sativus)[12-13]、小麥 (Triticum aestivum)[14]、玉米 (Zea mays)[15]、白三葉(Trifolium repens)[16]、等植物在干旱、鹽害、冷害、缺氧、淹水等逆境脅迫中的抗性。但是關(guān)于外源GABA能否提高多年生黑麥草的耐熱性，尤其是在高溫脅迫下外源GABA對黑麥草的抗氧化防御系統(tǒng)及內(nèi)源激素代謝的影響未見報道。因此，本研究在前期試驗的基礎(chǔ)上，以耐熱性弱的黑麥草品種為材料，研究外源GABA對高溫脅迫下黑麥草的生長和草坪質(zhì)量、葉綠素含量、根系活力、ROS代謝、抗氧化酶的活性及其基因的表達和內(nèi)源激素代謝的影響，探討外源GABA影響多年生黑麥草抗熱性的生理機制，為進一步研究外源GABA增強植物抗逆能力奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 植物材料

本研究以耐熱性弱的多年生黑麥草品種‘頂峰'(Pinnacle)為試驗材料[17]。

1.2 試驗設(shè)計與處理

將黑麥草種子播種于塑料花盆中，花盆的尺寸為上口徑 15 cm、下口徑 10 cm、高 15 cm，栽培基質(zhì)為體積比1∶1混合均勻的市售花卉培養(yǎng)基質(zhì)和河砂，放置于湖南農(nóng)業(yè)大學教學科研試驗溫室中培養(yǎng)。待發(fā)芽后苗高約8 cm時開始修剪，修剪高度保持在6 cm左右，每周每盆澆Hoagland's營養(yǎng)液 200 mL。

播種好的花盆放置于溫室中培養(yǎng)約45 d，然后將各盆栽材料轉(zhuǎn)入生長箱內(nèi)預(yù)培養(yǎng)3 d，培養(yǎng)條件為溫度 25 ℃/20 ℃(晝/夜)，相對濕度 65%～75%，光周期 12 h，光合有效輻射 400 μmol·(m2·s)-1。盆栽材料在生長箱預(yù)培養(yǎng)3 d后開始進行試驗處理，每盆噴施GABA溶液100 mL并同時澆灌150 mL 0、2.5、5、10 和 20 mmol·L-1的 GABA 溶液，上述步驟2 d后開始進行溫度處理，一個生長箱晝夜溫度設(shè)為25 ℃/20 ℃(常溫)，另一個生長箱晝夜溫度設(shè)為 35 ℃/30 ℃(高溫)；共處理 7 d，待篩選出最佳GABA濃度后重復(fù)上述試驗步驟進行相關(guān)指標的測定，試驗共設(shè)4個處理(對照、常溫+GABA、高溫、高溫+GABA)，每個處理設(shè)4次重復(fù)(4盆)，完全隨機試驗設(shè)計。各處理盆栽材料每天澆水保持土壤體積含水量為30%～32%，防止干旱。在高溫處理后的7、14和21 d取樣進行測定分析。每盆取倒數(shù)第3～5片功能葉片剪成約1 cm長的小段后混勻，在液氮速凍后保存于-80 ℃冰箱備用。

1.3 測定項目與方法

1)生長速率：試驗處理前將冠層修剪整齊并測定高度，然后在處理的7、14和21 d用直尺測定各處理的冠層高度，兩者之差再除以處理天數(shù)為生長速率，單位為cm·d-1。

2)草坪質(zhì)量：采用目測法，根據(jù)草坪的色澤、密度、質(zhì)量和均一性進打分評價(0～9分)。

3)電導(dǎo)率：取約0.1 g葉片，用去離子水沖洗干凈，剪成1 cm的小段置于試管中，加去離子水10 mL后在室溫條件下，轉(zhuǎn)速 200 r·min-1，振蕩 24 h 后，測外滲液的電導(dǎo)率(E1)，然后封口在高壓滅菌鍋中高溫高壓滅菌15 min，冷卻至室溫后測電導(dǎo)率(E2)，再按下式計算：相對電導(dǎo)率 = [E1/E2] × 100%。

4)葉綠素含量：樣品經(jīng)二甲基亞砜浸提后，采用分光光度計法測定[18]。

5)根系活力測定：根據(jù)TTC還原法進行測定[19]。

6)活性氧和抗氧化酶活性測定：采用pH 7.8的磷 酸 緩 沖 液 (phosphate buffer solution, PBS)提 取 酶液。根據(jù)Hu等[20]的方法，用硫酸鈦法測定H2O2含量，羥胺氧化反應(yīng)法測定O2·ˉ產(chǎn)生速率，氮藍四唑氧光化還原法測定超氧化物歧化酶活性，愈創(chuàng)木酚法測定過氧化物酶活性，過氧化氫還原法測定過氧化氫酶活性，紫外吸收法測定抗壞血酸過氧化物酶活性。

7)內(nèi)源激素：根據(jù)王日明和熊興耀[17]的方法，采用高效液相色譜質(zhì)譜(HPLC-MS)的方法測定ABA、IAA、GA3和ZR含量。樣品的內(nèi)源激素含量用外標法，激素含量由標準曲線計算得到。

8)抗氧化酶基因表達分析：采用Trizol試劑盒提取黑麥草葉片總RNA，用Nanodrop 2000檢測濃度和純度，用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測完整性。根據(jù) Fermentas cDNA synthesis試劑盒說明書進行反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。參考TaKaRa公司的SYBR System操作手冊，采用ABI7500實時熒光定量PCR儀進行PCR擴增。反應(yīng)程序為：95 ℃預(yù)變性30 s，95 ℃變性 5 s，52～55 ℃ 退火 20 s，40 個循環(huán)。每個處理設(shè)3個重復(fù)。基因特異性引物為F/R，以eEF1A(s)基因為內(nèi)參，序列參考Hu等[21]進行合成(表1)。根據(jù)得到的Ct值，利用2-△△CT法，分別計算目標基因在不同處理下的相對表達量[22]。

1.4 數(shù)據(jù)處理與分析

利用 SAS for Window 9.0 軟件對試驗中的生長速率、草坪質(zhì)量、電導(dǎo)率、葉綠素含量、活性氧、抗氧化酶活性、激素含量等數(shù)據(jù)進行方差分析，采用Duncan多重比較檢驗不同處理間的差異顯著性 (P＜0.05)。

2 結(jié)果與分析

2.1 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草生長和草坪質(zhì)量的影響

正常生長條件下不同濃度外源GABA處理對黑麥草的生長速率和草坪質(zhì)量無顯著影響(P ＞ 0.05)(圖1)。高溫脅迫顯著降低了黑麥草的生長速率和草坪質(zhì)量(P＜0.05)，但外源施用GABA后不同程度地緩解了因高溫脅迫而造成黑麥草生長速率和草坪質(zhì)量的下降，尤其當GABA濃度為5和10 mmol·L-1時與未施用GABA處理相比，顯著提高了生長速率和草坪質(zhì)量。

表1 試驗中所用基因及其引物序列Table 1 Genes and primers used in the experiment

2.2 外源GABA處理對高溫脅迫下黑麥草耐熱性相關(guān)生理指標的影響

2.2.1 對葉片細胞膜穩(wěn)定性的影響

高溫脅迫下黑麥草葉片的相對電導(dǎo)率隨著高溫處理時間的延長而顯著升高(P＜0.05)(圖2)，在脅迫處理 7、14和 21 d，電導(dǎo)率顯著高于對照 (P＜0.05)，分別比對照增加了1.6、3.4和5.4倍；施用外源GABA后，黑麥草葉片電導(dǎo)率雖然隨著處理時間的延長而升高，在脅迫處理7、14和21 d分別是對照的1.2、2.1和3.9倍，但與高溫處理下未施用GABA的處理相比顯著降低。

2.2.2 對葉綠素含量的影響

高溫脅迫下黑麥草葉片的葉綠素含量呈顯著下降趨勢，在高溫脅迫的7、14和21 d，葉綠素含量均較對照顯著下降(P＜0.05)，分別比對照下降了84%、63%和43%(圖3)；外源施用GABA后則顯著緩解了因高溫而造成的葉綠素含量的下降，在高溫處理后的7、14和21 d，葉綠素含量分別下降至對照的95%(P ＞ 0.05)、80%(P＜0.05)和 63%(P＜0.05)，在高溫脅迫下外源施用了GABA的處理葉綠素含量顯著高于未施用GABA處理。

2.2.3 對根系活力的影響

高溫脅迫下黑麥草的根系活力隨著處理時間的延長而顯著下降(P＜0.05)，在脅迫處理的7、14和21 d分別下降至對照的81%、59%和36%(圖4)；但是外源施用GABA后，黑麥草的根系活力下降程度顯著得到緩解，在脅迫處理的7、14和21 d分別下降至正常對照的 91%(P ＞ 0.05)、75%(P＜0.05)和54%(P＜0.05)，在高溫脅迫下外源施用了GABA的處理根系活力顯著高于未施用GABA的處理。

2.2.4 對活性氧代謝的影響

高溫脅迫下黑麥草植株內(nèi)的活性氧超氧陰離子產(chǎn)生速率和過氧化氫含量均隨著處理時間的延長而顯著上升 (P＜0.05)(圖 5)。在高溫處理的7、14 和 21 d，O2·ˉ的產(chǎn)生速率分別為對照的 1.1、1.46和1.52倍，H2O2含量分別為對照的1.8、3.4和4.7倍。高溫脅迫下外源施用GABA后，黑麥草體內(nèi)的O2·ˉ的產(chǎn)生速率和H2O2含量均顯著低于未施用GABA的處理，表現(xiàn)為在高溫處理的7、14 和 21 d，O2·ˉ的產(chǎn)生速率分別為對照的 1.08、1.2和1.3倍，H2O2含量分別為對照的1.5、2.6和3.9倍。

圖1 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草生長速率和草坪質(zhì)量的影響Figure 1 Effect of exogenous GABA on the growth rate and turf quality of perennial ryegrass under heat stress同一溫度不同小寫字母表示不同濃度處理間差異顯著(P＜0.05)Different lowercase letters within same temperature indicate significant difference among different concentration treatments at the 0.05 level.

圖2 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草葉片電導(dǎo)率的影響Figure 2 Effect of exogenous GABA on the leaf electrolyte leakage in perennial ryegrass under heat stress不同小寫字母表示同一處理不同處理時間間差異顯著(P ＜0.05)，不同大寫字母表示同一處理時間不同處理間差異顯著(P ＜0.05)。 下同。Different lowercase letters within same treatment indicate significant difference between different treatment duratuions at the 0.05 level, and different capital letters indicate significant difference between different treatments in the same duration; similarly for the following figures.

圖3 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草葉綠素含量的影響Figure 3 Effect of exogenous GABA on the leaf chlorophyll content in perennial ryegrass under heat stress

2.2.5 對葉片抗氧化酶活性的影響

在高溫脅迫下黑麥草葉片的SOD、POD、CAT和APX活性表現(xiàn)為先升高后下降的趨勢(圖6)；在脅迫處理7和14 d，4種抗氧化酶的活性均顯著高于對照 (P＜0.05)，隨后在脅迫處理 21 d 時 4 種抗氧化酶活性與對照差異不顯著(P ＞ 0.05)。高溫脅迫下外源施用GABA顯著提高了黑麥草葉片SOD、POD、CAT和APX活性，在脅迫處理7 d時，施用GABA處理比未施用GABA處理分別提高了29%、21%、22%和16%，脅迫處理14 d分別提高了22%、24%、34%和13%，尤其是在脅迫處理21 d時，分別提高了113%、67%、37%和21%。

2.3 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草葉片激素代謝的影響

高溫脅迫促進了黑麥草葉片ABA的積累，并且隨著處理時間的延長積累量顯著升高(P＜0.05)(表2)，在高溫迫處理7、14和21 d時，ABA含量分別升高至對照的2.2、3.6和6.6倍。常溫條件下外源施用GABA對黑麥草葉片的ABA含量較對照無顯著影響(P ＞ 0.05)；高溫脅迫條件下外源施用GABA較對照顯著促進了黑麥草葉片ABA的積累和含量的增加，在脅迫處理7、14和21 d時，ABA含量分別升高至對照的4.3、5.5和9.7倍。

高溫脅迫處理下，黑麥草葉片中的IAA、GA3和ZR的含量均隨著脅迫處理時間的延長而顯著下降 (P＜0.05)(表 2)；在高溫處理 7、14 和 21 d，IAA含量分別下降至對照的78%、69%和49%，GA3含量分別下降至對照的67%、35%和12%，ZR含量分別下降至對照的64%、43%和30%。常溫條件下外源施用GABA對黑麥草葉片的IAA、GA3和ZR含量無顯著影響(P ＞ 0.05)；高溫處理下外源施用GABA顯著緩解了因高溫脅迫而造成的黑麥草葉片IAA、GA3和ZR含量的下降；在高溫處理7、14和 21 d、IAA含量僅分別下降至對照的89%、76%和62%，GA3含量分別下降至對照的85%、54%和27%，ZR含量分別下降至對照的74%、55%和44%。

圖4 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草根系活力的影響Figure 4 Effect of exogenous GABA on the root activity in perennial ryegrass under heat stress

圖5 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草超氧陰離子(O2·ˉ)產(chǎn)生速率和過氧化氫(H2O2)含量的影響Figure 5 Effect of exogenous GABA on the O2·ˉ and H2O2 content in perennial ryegrass under heat stress

2.4 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草抗氧化酶基因表達的影響

高溫脅迫下抗氧化酶APX和POD基因(圖7A、圖7C)的表達水平在處理7 d時上調(diào)表達，在脅迫14 d時與對照無顯著差異 (P ＞ 0.05)，隨后在處理 21 d時表達量顯著下調(diào)(P＜0.05)，而CAT基因(圖7B)的表達水平在高溫脅迫下隨著處理時間的延長呈下調(diào)表達趨勢。在常溫生長條件下，外源施用GABA對APX、POD和CAT基因的表達水平?jīng)]有顯著影響；但在高溫脅迫條件下，與未施用GABA的處理相比，外源施用GABA顯著誘導(dǎo)了黑麥草葉片APX、POD和CAT基因的表達，在處理的7 d，分別提高了23%、17%和16%，在處理的14 d，分別提高了39%、28%和43%，在處理的21 d，分別提高了66%、37%和40%。

高溫脅迫誘導(dǎo)了SOD基因的上調(diào)表達，但不同SOD基因的表達模式不一樣。與對照相比，在高溫脅迫處理的 7 和 14 d，Cu/ZnSOD(圖 7D)，MnSOD(圖7E)和FeSOD(圖7F)基因均顯著上調(diào)表達，在脅迫處理的21 d僅MnSOD基因上調(diào)表達，而Cu/ZnSOD和FeSOD基因則下調(diào)表達。常溫生長條件下外源施用GABA對黑麥草葉片的SOD基因的表達水平?jīng)]有顯著影響，但在高溫脅迫下外源施用GABA則誘導(dǎo)了抗氧化酶基因的上調(diào)表達；與高溫條件下未施用GABA的處理相比，在脅迫處理的7、14和21 d，Cu/ZnSOD基因的表達分別上調(diào)了6%、16%和35%，MnSOD基因的表達分別上調(diào)了18%、20%和5%，F(xiàn)eSOD基因的表達分別上調(diào)了12%、18%和42%。

圖6 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草葉片超氧化物岐化酶(SOD)、過氧化物酶(POD)、過氧化氫酶(CAT)和抗壞血酸過氧化物酶(APX)活性的影響Figure 6 Effect of exogenous GABA on the SOD, POD, CAT and APX activity in leaves of perennial ryegrass under heat stress

3 討論

3.1 外源GABA提高了黑麥草的耐高溫能力

高溫常造成冷季型草坪草生長發(fā)育受阻、草坪質(zhì)量下降、細胞膜透性增大和膜脂過氧化程度增加、葉片枯黃衰老、根系活力下降等生理生化變化[23]。前人研究發(fā)現(xiàn)，用外源GABA對番茄[10]、小麥[24]種子進行浸泡可以有效增加發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)。同時，還有研究發(fā)現(xiàn)，外源GABA可提高黃瓜[16]、番茄[11]、玉米[14]對鹽脅迫和漬水脅迫的抵抗能力。本研究結(jié)果顯示，外源施用GABA對高溫脅迫下黑麥草的生長速率、草坪質(zhì)量、細胞膜透性和根系活力的下降均具有很好的緩解作用，這表明外源GABA對黑麥草在高溫脅迫下生長的抑制具有緩解作用，施用外源GABA可以顯著提高黑麥草的耐高溫能力，這與在冷季型草坪草匍匐剪股穎(Agrostis stolonifera)中的研究結(jié)果相一致[25-26]。

3.2 外源GABA延緩了高溫脅迫下黑麥草植株的衰老

本研究結(jié)果顯示，高溫脅迫下黑麥草葉片枯黃失綠和根系活力下降，表明高溫脅迫導(dǎo)致了黑麥草植株的衰老，葉綠體結(jié)構(gòu)和根系吸收能力受到破壞，這與前人在高羊茅(Festuca arundinacea)[27]、剪股穎[28]、仙客來(Cyclamen persicum)[29]、玉米[30]、小麥[31]和水稻(Oryza sativar)[32]的研究結(jié)果相一致。高溫脅迫下施用外源GABA顯著提高了黑麥草的葉綠素含量和根系活力，表明外源GABA緩解了高溫對黑麥草葉片和根系的傷害，延緩了植株葉片和根系的衰老，從而有利于維持葉片的光合能力和根系的吸收能力，提高了耐高溫能力。

3.3 外源GABA提高了高溫脅迫下黑麥草的抗氧化能力

本研究結(jié)果顯示，高溫脅迫下黑麥草體內(nèi)的ROS產(chǎn)生速率和含量以及電導(dǎo)率顯著升高，并且隨著脅迫時間的延長而加劇，表明高溫脅迫下黑麥草植株細胞內(nèi)受到了氧化傷害。王曉冬等[14,33]研究表明GABA可通過調(diào)節(jié)抗氧化酶系統(tǒng)來增強小麥的耐熱性和耐澇性；楊麗文等[34]研究認為，低氧脅迫下外源GABA能顯著提高甜瓜( Cucumis melo)幼苗葉片SOD、CAT、APX、GR等抗氧化酶的活性。高溫條件下施用外源GABA后，黑麥草葉片內(nèi)的SOD、POD、CAT和APX基因的表達水平顯著上調(diào)，同時SOD、POD、CAT和APX活性也顯著升高，O2·ˉ和H2O2等ROS水平顯著降低，表明高溫下施用GABA可誘導(dǎo)抗氧化酶基因的上調(diào)表達，從而提高多個高抗氧化酶活性共同組成體內(nèi)的保護酶系統(tǒng)來清除體內(nèi)過量的ROS，促進黑麥草細胞胞內(nèi)ROS代謝平衡，提升細胞膜結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性，從而緩解高溫脅迫對植株造成的傷害，增強黑麥草的耐熱性。

表2 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草葉片內(nèi)源激素含量的影響Table 2 Effect of exogenous GABA on endogenous hormones content in the leaves of perennial ryegrass under high temperature stressng·g-1

3.4 外源GABA提高了高溫脅迫下黑麥草的激素代謝水平

植物對外界環(huán)境的抵抗能力常受植株內(nèi)源激素的調(diào)控，與植物對環(huán)境脅迫的適應(yīng)性密切相關(guān)[35]。本研究前期[16]及本研究結(jié)果均表明，在高溫處理下黑麥草葉片ABA含量均隨著脅迫時間的延長而顯著提高，而GA3、IAA和ZR含量均隨著脅迫時間的延長而顯著降低，這與前人的研究[36-37]結(jié)果一致。高溫脅迫下維持較高的內(nèi)源激素水平，不僅可以誘導(dǎo)或增加抗性基因的表達而增強植物對高溫的適應(yīng)能力，還可以提高SOD等膜保護酶的活性，直接或間接地清除自由基，減輕因逆境脅迫產(chǎn)生的氧自由基對細胞膜系統(tǒng)造成的傷害和延緩逆境脅迫下葉片的衰老，從而提高了黑麥草的耐高溫能力。

圖7 外源GABA對高溫脅迫下黑麥草葉片抗氧化酶基因表達的影響Figure 7 Effect of exogenous GABA on the expression level of antioxidant enzyme genes in the leaves of perennial ryegrass under heat stress

4 結(jié)論

通過在高溫條件下外源施用GABA對多年生黑麥草的生長和草坪質(zhì)量, 細胞膜的穩(wěn)定性, 葉綠素含量, 根系活力, 活性氧水平, 抗氧化酶活性及其基因的表達, 內(nèi)源激素ABA、GA3、IAA和ZR含量等指標的測定分析表明，外源施用GABA能有效提高黑麥草的耐高溫能力，這與GABA誘導(dǎo)了抗氧化酶基因的上調(diào)表達，提高了抗氧化酶的活性從而有效清除和降低細胞內(nèi)的活性氧，減輕了由高溫脅迫造成的氧化傷害，穩(wěn)定了細胞膜系統(tǒng)密切相關(guān)；此外，高溫下施用GABA后植株內(nèi)維持較高的促進生長類激素IAA、GA3和ZR有助于緩解因高溫和呼吸增強導(dǎo)致的葉片枯黃衰老和根系活力的下降，進而提高了黑麥草的抗高溫能力。