劉利莎 (河北省望都縣動物疫病預(yù)防控制中心 072450)
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仔豬水腫病病原菌的分離鑒定及藥敏試驗
劉利莎 (河北省望都縣動物疫病預(yù)防控制中心 072450)
2017年3月,望都縣謙鵬豬場106頭斷乳3~10d、體況健壯的仔豬陸續(xù)發(fā)病,主要表現(xiàn)為發(fā)病急、死亡快,有的晚上還見吃料,第2天清晨就死在欄里。病程稍長者呈現(xiàn)眼瞼、結(jié)膜、耳部、頸部水腫。蓄主用青霉素、慶大霉素、地塞米松等治療,收效甚微,到化驗室就診時(以斷奶15d)已累計發(fā)病25頭,死亡17頭。經(jīng)剖檢胃大彎和噴門部位胃壁水腫,結(jié)腸腸系膜及淋巴結(jié)水腫;水腫部位切開,可見黏膜層和肌層之間有膠凍樣物,表面有液體流出,呈無色或茶色;胃底彌漫性出血,腸黏膜紅腫;心包、胸腔、腹腔有積液,暴露空氣后成膠凍狀。有的病例無水腫變化,但內(nèi)臟、腸道出血。為確定病原,對病死仔豬做病原的分離鑒定和藥敏試驗。
1.1 細菌的分離培養(yǎng)、純培養(yǎng)及鑒定 (1)無菌取病死的腦、肝臟、脾等組織分別接種于普通瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱培養(yǎng)基,將接種物分別在有氧和無氧條件下培養(yǎng),經(jīng)37℃、培養(yǎng)、24h后取出可發(fā)現(xiàn),分離菌無論在有氧和無氧條件下均可以生長,說明此菌為兼性厭氧菌,在普通培養(yǎng)基上生長出隆起、圓形、、濕潤、邊緣整齊的灰色、半透明的菌落,而在麥康凱培養(yǎng)基上,均長出單一的紅色菌落。(2)將純培養(yǎng)物涂片鏡檢,可見革蘭氏陰性、兩端鈍圓的小桿菌,單個或成雙存在,運動力檢查陽性。(3)三糖鐵試驗,三糖鐵試驗結(jié)果:斜面培養(yǎng)基變黃,底層變黃,產(chǎn)酸產(chǎn)氣。初步鑒定為大腸桿菌。(4)取純培養(yǎng)物涂片鏡檢做生化試驗,結(jié)果能發(fā)酵葡萄糖、乳糖、甘露醇、麥芽糖、阿拉伯糖;不發(fā)酵蔗糖、肌醇;不產(chǎn)生硫化氫,不分解尿素。
1.2 細菌的敏感藥物試驗 (1)以消毒后的直徑3mm的金屬打孔器在接種好的瓊脂平板上打孔,加藥于孔內(nèi)(粉劑需加滿孔)并在瓊脂培養(yǎng)皿背面標(biāo)記出青霉素、鏈霉素、新霉素、慶大霉素、氧氟沙星、氟苯尼考、頭孢氨芐、利福平、呋喃妥因、磺胺嘧啶等各種試驗藥物名稱。(2)置37℃生化培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h后取出,觀察記錄并分析結(jié)果,根據(jù)各孔周圍有無抑菌環(huán)及其抑菌環(huán)直徑大小,判定病原菌對各種試驗藥物的敏感度。抑菌環(huán)直徑大于15mm為高度敏感,10-15mm中度敏感,小于10mm為低度敏感。(3)根據(jù)以上標(biāo)準(zhǔn)篩選出分離菌對新霉素、氧氟沙星、氟苯尼考、頭孢氨芐幾種藥物為高度敏感。
(1)根據(jù)發(fā)病情況、臨床癥狀、剖檢變化,結(jié)合細菌的分離鑒定,確診本病為由大腸桿菌引起的仔豬水腫病。(2)仔豬水腫病主要發(fā)生于斷奶1~2周的仔豬,并且病豬絕大多數(shù)是生長快且肥壯的仔豬,其發(fā)病率雖低,病死率可達90%以上。其發(fā)病機理較為復(fù)雜,目前公認的是:病原性大腸桿菌進入腸道,耐過宿主抗菌作用,附著于腸粘膜上定殖,利用腸道內(nèi)的適宜條件大量繁殖,產(chǎn)生水腫病毒素,當(dāng)豬體經(jīng)腸道吸收毒素進入血液,即引起腸毒血癥,導(dǎo)致水腫病發(fā)生。豬水腫病的發(fā)生往往與某些應(yīng)激因素有關(guān)。缺乏運動、受寒、斷乳前后飼料變更突然、飼料單純或吃了過量高蛋白飼料導(dǎo)致消化不良和胃腸機能紊亂等,都是誘發(fā)仔豬水腫病的重要因素。本病例的發(fā)病誘因有三方面:一是仔豬斷乳分欄,突然改變生活環(huán)境;二是斷乳期間突然變更飼料;三是自配飼料中蛋白質(zhì)含量過高。(3)中草藥具有抗病保健、中和毒素、提高機體免疫力、調(diào)整胃腸機能、無毒無殘留等特點用。中草藥治療水腫病有很好療效。微生態(tài)制劑就是很好的例證。微生態(tài)制劑具有維持微生態(tài)平衡、生物奪氧、生物拮抗、增強機體免疫力、合成各種酶和營養(yǎng)物質(zhì)的獨特作用,因而在水腫病的治療中被廣泛應(yīng)用。作者正是采用中西結(jié)合的綜合防治方法,以抗菌消炎、保肝解毒、利尿消腫為治療原則,對發(fā)病豬群首先進行敏感藥物注射治療同時,使用氯化鈣、葡萄糖、甘露醇、維生素等保肝解毒、利尿消腫進行輔助治療,并在飼料中添加中藥和微生態(tài)制劑,增強治療效果,對未發(fā)病豬群在使用敏感藥物進行預(yù)防治療的同時,也在飼料中添加中藥和微生態(tài)制劑。采取上述措施后,預(yù)防性治療的70頭仔豬,無一發(fā)病,治療病豬18頭,除1頭重癥病豬死亡外,其余病豬一周后精神、食欲逐步恢復(fù)正常。半月后回訪,仔豬群再未發(fā)病,生長發(fā)育良好。(4)藥敏試驗可以看出,該菌對許多藥物有耐藥性,這是畜主用藥效果不明顯的主要原因。因此,在治療細菌病時,用藥前最好先做藥敏試驗來指導(dǎo)用藥。只有使用有效藥物進行治療,結(jié)合對癥治療和嚴格的綜合衛(wèi)生防疫措施,才能迅速控制疫情,減少經(jīng)濟損失。
(1)該豬場引起仔豬水腫病的病原是大腸桿菌。(2)引起仔豬水腫病的誘因有三方面:一是仔豬斷乳分欄,突然改變生活環(huán)境;二是斷乳期間突然變更飼料;三是自配飼料中蛋白質(zhì)含量過高。(3)該豬場的大腸桿菌對許多藥物有耐藥性,但對頭孢氨芐、氟苯尼考、新霉素和氧氟沙星敏感。(4)用中草藥治療仔豬水腫病有很好的療效。
(2018–07–18)
S858.28
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1007-1733(2019)01-0039-01