費(fèi)保祥 沈 艷

（1.全椒縣動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，安徽全椒 239500；2.安徽省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，安徽合肥 230091）

口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病、豬圓環(huán)病毒等生豬重大動(dòng)物疫病危害極大，其中免疫效果直接關(guān)系到養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。為科學(xué)評(píng)價(jià)免疫效果，準(zhǔn)確掌握全椒縣疫情情況，及時(shí)消除生豬疫情隱患，2018年我們?cè)谌h選擇4個(gè)豬場作為生豬重大疫病的定點(diǎn)監(jiān)測點(diǎn)，采集樣品進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測?，F(xiàn)將檢測情況報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 監(jiān)測點(diǎn)選擇

根據(jù)全椒縣情選擇4個(gè)有代表性生豬養(yǎng)殖場，2個(gè)大型養(yǎng)殖場（存欄量大于1000頭）、2個(gè)中型養(yǎng)殖場（存欄量大于100頭而小于或等于1000頭），我縣生豬存欄大于50頭而小于100頭的小型豬場沒有，所以沒有小型豬場作為定點(diǎn)監(jiān)測點(diǎn)。

1.2 樣品種類及數(shù)量

大型豬場采集30份全血及對(duì)應(yīng)扁桃體，中型豬場采集10份全血及對(duì)應(yīng)扁桃體。共采集樣品160份，其中血清80份，扁桃體80份。

1.3 樣品制備

血清準(zhǔn)備：豬血3000r/min，離心10 min，取上清液，即得血清；扁桃體剪碎按1：5加PBS，勻槳機(jī)勻槳后反復(fù)凍溶3次，13000 r/min，離心5 min，取上清液備用。

1.4 檢測試劑

口蹄疫液相阻斷ELISA試劑盒、口蹄疫病毒3ABC非結(jié)構(gòu)蛋白ELISA試劑盒購自蘭州獸醫(yī)研究所，豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬圓環(huán)2型、豬偽狂犬病毒抗體ELISA試劑盒購自美國IDEXX公司，口蹄疫、豬瘟、高致病性藍(lán)耳病、豬圓環(huán)病毒2型和豬圓環(huán)病毒3型熒光定量RT—PCR試劑盒購自北京世紀(jì)元亨動(dòng)物防疫技術(shù)有限公司。

1.5 實(shí)驗(yàn)方法和判斷標(biāo)準(zhǔn)

嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行操作和判斷。陽性場是指該場至少檢出1份陽性樣品或非結(jié)構(gòu)蛋白陽性樣品，免疫合格場是指根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部規(guī)定，該場免疫血清抗體合格率大于等于70%。

2 結(jié)果與分析

2.1 血清學(xué)結(jié)果及分析

共檢測4個(gè)場80份血清樣，結(jié)果及分析如下：

（1）O型口蹄疫抗體70份合格，10份不合格，個(gè)體免疫合格率87.5%；3個(gè)場免疫合格，群體免疫合格率75%。達(dá)到國家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)，免疫效果尚可。

（2）A型口蹄疫抗體59份合格，21份不合格，個(gè)體免疫合格率73.75%；3個(gè)場免疫合格，群體免疫合格率75%。達(dá)國家標(biāo)準(zhǔn)，免疫效果尚可。

（3）口蹄疫非結(jié)構(gòu)蛋白（3ABC）抗體有3個(gè)場7份血清呈陽性，個(gè)體陽性率1.275%，群體陽性率75%。這一方面可能與豬場隱形感染有關(guān)，另一方面可能與疫苗生產(chǎn)過程中純化技術(shù)不能全部去除非結(jié)構(gòu)蛋白，多次免疫有可能出現(xiàn)3ABC陽性。

（4）豬瘟抗體74份合格，6份不合格，個(gè)體免疫合格率92.5%；3個(gè)場免疫合格，群體免疫合格率75%。達(dá)國家標(biāo)準(zhǔn)，免疫效果尚可。

（5）藍(lán)耳病抗體70份合格，10份不合格，個(gè)體免疫合格率87.5.5%；4個(gè)場全部免疫合格，群體合格率100%。表明豬場豬藍(lán)耳病免疫效果良好。

（6）豬偽狂犬病gE抗體有3個(gè)場30份呈陽性，個(gè)體陽性率37.5%，群體陽性率75%。這可能與疫苗廠家在生產(chǎn)疫苗時(shí)滅活處理不徹底有關(guān)，也有可能豬存在隱形感染有關(guān)；豬偽狂犬病gB抗體有78份合格，個(gè)體合格率97.5%，4個(gè)場全部免疫合格，群體合格率100%。表明豬場豬偽狂犬病免疫效果良好。

2.2 病原學(xué)監(jiān)測結(jié)果及分析

共檢測4個(gè)場80份病原樣，結(jié)果及分析如下：

（1）口蹄疫在4個(gè)場都沒有檢出陽性。說明口蹄疫感染風(fēng)險(xiǎn)極低，豬場在豬口蹄疫方面很干凈。

（2）豬瘟在4個(gè)場都沒有檢出陽性。說明豬瘟感染風(fēng)險(xiǎn)極低，豬場在豬瘟方面很干凈。

（3）高致病性藍(lán)耳病有1個(gè)場10份樣品檢測出陽性，個(gè)體陽性率12.5%，群體陽性率25%，表明豬場存在高致病性藍(lán)耳病感染風(fēng)險(xiǎn)。

（4）豬圓環(huán)病毒2型3個(gè)場檢測出32份陽性樣品，個(gè)體陽性率40%。群體陽性率75%，說明豬場豬圓環(huán)病毒2型廣范存在，發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)很高。

（5）豬圓環(huán)病毒3型4個(gè)場檢測出29份陽性樣品，個(gè)體陽性率36.25%。群體陽性率100%，說明豬場豬圓環(huán)病毒3型廣范存在，發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)很高。

（6）混合感染情況1個(gè)豬場有高致病性藍(lán)耳病與豬圓環(huán)病毒2型、豬圓環(huán)病毒3型混合感染，占25%；2個(gè)豬場有豬偽狂犬病與豬圓環(huán)病毒2型、豬圓環(huán)病毒3型混合感染，占50%；1個(gè)2個(gè)豬場有豬偽狂犬病與豬圓環(huán)病毒3型混合感染，占25%。

3 討論

豬場病原隱形感染率高，混合感染重。檢測結(jié)果表明在4豬場中，有25%場檢出高致病性藍(lán)耳病，75%場檢出豬圓環(huán)病毒2型，全部檢出豬圓環(huán)病毒3型，說明高致病性藍(lán)耳病和豬圓環(huán)病毒病混合感染嚴(yán)重，對(duì)養(yǎng)豬業(yè)影響極大。目前，在生豬養(yǎng)殖環(huán)節(jié)，豬病混合感染嚴(yán)重，當(dāng)一個(gè)豬場多種病原混合感染發(fā)生時(shí)，致死率就會(huì)大大提高，且各病原之間相互干擾又影響疫苗和用藥效果。有研究表明豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）、豬圓環(huán)病毒3型（PCV3）、豬偽狂犬病毒（PRV）、高致病性藍(lán)耳病病毒（PRRSV）單獨(dú)或混合感染會(huì)影響豬瘟疫苗免疫效果，造成豬瘟野毒在豬體內(nèi)滯留，引起持續(xù)感染，易引發(fā)豬瘟發(fā)生。有資料表明現(xiàn)在很多豬場發(fā)病始于病毒病，死于細(xì)菌病，豬場應(yīng)采取有效措施減少帶毒率，減少混合感染，制訂適合本場免疫程序，科學(xué)免疫，提高生物安全措施，適時(shí)開展豬偽狂犬病、藍(lán)耳病、豬瘟等疫病凈化工作。