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        黑腹狼蛛人工繁育技術(shù)初步研究

        2019-02-07 05:33:28楊澤寧祖國(guó)浩陳招榮羅新星曹鑫盛路斌
        天津農(nóng)業(yè)科學(xué) 2019年12期
        關(guān)鍵詞:生物防治

        楊澤寧 祖國(guó)浩 陳招榮 羅新星 曹鑫盛 路斌

        摘? ? 要:黑腹狼蛛是我國(guó)農(nóng)田害蟲(chóng)的優(yōu)勢(shì)天敵,在生物防治中有著巨大的潛力,但其人工繁育研究尚未見(jiàn)報(bào)道。本研究通過(guò)對(duì)黑腹狼蛛的交配、產(chǎn)卵、若蛛飼養(yǎng)等系列關(guān)鍵時(shí)期的人工繁育技術(shù)進(jìn)行探究,擬提出一套低成本、高效率、簡(jiǎn)單可行的黑腹狼蛛人工繁育技術(shù)。結(jié)果表明,黑腹狼蛛雌雄親本成功交配所用時(shí)間的長(zhǎng)短與產(chǎn)卵數(shù)量顯著正相關(guān)(r=0.945,P<0.05),而與雌、雄體長(zhǎng)無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.05)。自然孵化溫度(27±1)℃、濕度80%條件下,人工孵化溫度(30±1)℃、濕度75%條件下,黑腹狼蛛孵化率最高,可達(dá)80%以上;黑腹狼蛛的若蛛于3~6齡階段,齡期增長(zhǎng)對(duì)其同類(lèi)相食率有極顯著影響(P<0.01),5齡進(jìn)行單蛛飼養(yǎng)能有效增加若蛛存活率;以上條件均滿足的情況下,飼養(yǎng)溫、濕度分別為(26±1)℃和(80±5)%,若蛛存活率高達(dá)90%以上。

        關(guān)鍵詞:黑腹狼蛛;生物防治;人工飼養(yǎng);寵物昆蟲(chóng);人工飼料

        中圖分類(lèi)號(hào): S852.74+7? ? ? ? ?文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼: A? ? ? ? ?DOI 編碼:10.3969/j.issn.1006-6500.2019.12.018

        Abstract: Lycosa coelestis is the dominant natural enemy of agricultural pests in China and has great potential in biological control, but its artificial breeding has not been reported. This experiment focused on the research of the breeding methods of mating, spawning and spider feeding in L. coelestis, to summarize a set of simple and feasible seeding methods with low cost, high productivity in the production practice. The results showed that the length of successful mating time had a significant positive correlation with the number of eggs (r=0.945, P<0.05), but no significant correlation with the length of male and female (P>0.05); under the conditions of natural incubation temperature of (27±1) ℃ and humidity of 80%, and artificial incubation temperature of (30±1) ℃ and humidity of 75%, the incubation rate of L. coelestis could over 80%; the increase of spider instar from 3 to 6 had a significant effect on the cannibalism rate(P<0.01), and single spider breeding? of arachnids from 5 instar could effectively increase the survival rate; when all of the above conditions were met, the survival rate could over 90%? under the feeding temperature of (26±1) ℃ and humidity of (80±5)%.

        Key words: Lycosa coelestis; biological control; artificial feeding; insect pets; artificial diet

        蜘蛛作為重要的天敵生物可應(yīng)用于農(nóng)林害蟲(chóng)的生物防治,是一類(lèi)重要的潛在生防資源,且其副產(chǎn)品蜘蛛毒液可用于藥品的研發(fā),蜘蛛絲可為軍事、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域提供新材料[1]。黑腹狼蛛(Lycosa coelestis L.)隸屬于蛛形綱狼蛛科狼蛛屬,是我國(guó)農(nóng)田害蟲(chóng)的優(yōu)勢(shì)天敵[2],在生物防治中有著巨大的潛力,有研究表明其毒液中含有抗菌肽,能夠抑制腫瘤細(xì)胞的活性[3]。因此,對(duì)黑腹狼蛛飼養(yǎng)方法的探究在生物防治及其毒液的藥理分析中有著重要的意義。

        人工飼養(yǎng)繁殖黑腹狼蛛可以快速、穩(wěn)定地獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)種源。繁育作為其養(yǎng)殖過(guò)程中最重要的環(huán)節(jié)備受學(xué)者們的關(guān)注,而黑腹狼蛛的人工養(yǎng)殖及繁育研究尚處于空白階段,目前僅有各齡期形態(tài)特征記錄的報(bào)道[4],以及生境片段化對(duì)其遺傳多樣性的影響研究[5]。

        本研究總結(jié)出了一套飼養(yǎng)簡(jiǎn)單、成本低、若蛛存活率高、可投入實(shí)際生產(chǎn)的黑腹狼蛛人工繁育方法,為黑腹狼蛛在生物防治上的應(yīng)用提供了理論依據(jù)。

        1 材料和方法

        1.1 試驗(yàn)材料

        試驗(yàn)選擇12只成體黑腹狼蛛(雌蛛、雄蛛各6只),均采自天津市西青郊野公園,采集時(shí)間為2017年3月13—15日。將采集到的黑腹狼蛛置于飼養(yǎng)盒中單蛛飼養(yǎng),飼養(yǎng)盒內(nèi)鋪設(shè)椰糠、水盤(pán)和飼料盤(pán),置入人工氣候培養(yǎng)箱,溫度設(shè)置為(26±1) ℃,相對(duì)濕度設(shè)為(80±5)%[6-7]。

        1.2 試驗(yàn)方法

        黑腹狼蛛個(gè)體孵化后記為1齡,每次蛻皮則加1齡,未性成熟蜘蛛統(tǒng)稱為若蛛,以此反映各階段研究對(duì)象的生長(zhǎng)狀況和生長(zhǎng)成熟度。

        1.2.1 交配試驗(yàn)? ? 將采集的黑腹狼蛛置于人工氣候培養(yǎng)箱[溫度(26±1) ℃、濕度(80±5)%]中飼養(yǎng),待蜘蛛成體(經(jīng)9次蛻皮)后,將雄成蛛放入裝有雌成蛛的飼養(yǎng)盒中,進(jìn)行交配。交配試驗(yàn)中需避免雌蛛的成熟日齡過(guò)長(zhǎng),同時(shí)避免配對(duì)個(gè)體體型差距過(guò)大[8],交配前將雌成蛛喂至腹部圓潤(rùn)不再進(jìn)食,交配結(jié)束及時(shí)將雌、雄蛛分離。

        本試驗(yàn)中將雌蛛和雄蛛隨機(jī)分配為6組,詳細(xì)記錄雌、雄蛛的體長(zhǎng)及交配時(shí)間。在此期間,試驗(yàn)選擇蝗蟲(chóng)、蠶蛹、蟋蟀配合投喂,以保證黑腹狼蛛能攝取較全面的營(yíng)養(yǎng)[9]。

        1.2.2 孵化方法? ? 蛛卵自然孵化期間將溫度設(shè)為(27±1) ℃,相對(duì)濕度設(shè)為80%,經(jīng)8~20 d即可孵化。若發(fā)現(xiàn)抱蛋雌蛛食欲不振且過(guò)于消瘦,為避免雌蛛取食卵袋或死亡,可提前將卵袋與雌性分離,進(jìn)行人工孵化。人工孵化與自然孵化溫濕度稍有不同,進(jìn)行人工孵化時(shí)將卵袋懸置于飼養(yǎng)盒中,盒內(nèi)保持孵化溫度為(30±1) ℃。由于人工孵化無(wú)法模擬雌蛛曬卵通風(fēng)行為,將孵化相對(duì)濕度適當(dāng)降低可避免蛛卵感染病菌的風(fēng)險(xiǎn),但濕度過(guò)低也容易導(dǎo)致部分蛛卵脫水,降低孵化率,因此本試驗(yàn)將人工孵化相對(duì)濕度設(shè)為75%。

        1.2.3 低齡若蛛飼養(yǎng)試驗(yàn)? ? 若蛛3齡前靠卵黃提供營(yíng)養(yǎng),無(wú)需取食[10],若蛛3齡后與雌蛛分開(kāi)飼養(yǎng),飼養(yǎng)密度為每10只若蛛1盒群養(yǎng),按時(shí)投喂,經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后進(jìn)行單蛛飼養(yǎng),飼養(yǎng)條件與1.1部分所述一致。

        為得出若蛛單獨(dú)飼養(yǎng)最佳時(shí)期,挑選出大小相近的黑腹狼蛛3齡若蛛60只,共設(shè)置6個(gè)試驗(yàn)組,其中對(duì)照組中10只若蛛從3齡開(kāi)始,進(jìn)行單蛛飼養(yǎng);5個(gè)測(cè)試組每組10只若蛛群養(yǎng),6組均處于相同飼養(yǎng)環(huán)境下。統(tǒng)計(jì)若蛛隨齡期增長(zhǎng)同一飼養(yǎng)盒內(nèi)所剩若蛛數(shù)量,分析若蛛同類(lèi)相食行為與齡期的關(guān)系。

        除繁殖期外的黑腹狼蛛養(yǎng)殖過(guò)程中均投喂固體人工飼料,其配方為柞蠶蛹(49%)、雞蛋清(35%)、雞蛋全液(15%)和復(fù)合維生素(1%),各成分按比例用榨汁機(jī)混合攪拌均勻待凝固使用。人工飼料投喂需遵循定時(shí)、定質(zhì)、定量、定點(diǎn)原則[11],每周投喂2~3次,投喂時(shí)間設(shè)置在17:00—18:00時(shí)符合此種狼蛛生活習(xí)性,固定投喂地點(diǎn)在離蜘蛛休息地點(diǎn)7 cm以內(nèi)[12],投喂量根據(jù)若蛛的大小進(jìn)行調(diào)整,避免投喂過(guò)多造成浪費(fèi)及污染,在蜘蛛取食完成后及時(shí)清理食物殘?jiān)乐共≡⑸镒躺M(jìn)而侵染研究對(duì)象。飲水供給材料為泥炭蘚(Sphagnum sp.),泥炭蘚能儲(chǔ)水且不易霉變,可有效避免蜘蛛溺亡。

        1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

        本試驗(yàn)采用SPSS 17.0及Microsoft Excel 2010對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 交配行為

        成熟的雄蛛在交配時(shí)觸肢上的生殖球充血膨大,生殖球上儲(chǔ)存精液[13]。交配前雄蛛會(huì)在地面紡出一層絲網(wǎng),隨后將精液排至絲網(wǎng)上用觸肢蘸取,待交配時(shí)從正面緩慢靠近雌蛛,做出求偶行為(如敲擊雌性洞口的絲網(wǎng)),后用步足輕探雌蛛,若雌蛛對(duì)求偶行為做出回應(yīng)(雌蛛展示攻擊姿態(tài),雄蛛便會(huì)逃跑),雄蛛便會(huì)爬到雌蛛背上,采用頭腹相對(duì)的姿勢(shì)進(jìn)行交配,并用步足抱住雌蛛腹部,將觸肢器探入位于雌蛛腹部的外雌器內(nèi),待完成交配后,雄蛛會(huì)主動(dòng)迅速逃逸,以防被雌蛛捕食[14]。

        2.1.1 交配時(shí)間及成功率? ? 正常完成交配行為,即視為成功交配,本試驗(yàn)6組中1、2、3和5組成功交配,交配成功率為66.67%,而1、4和6組中的雄蛛被雌蛛捕食,其中1組雄蛛交配成功后被捕食,而4和6組雄蛛在交配過(guò)程中被捕食導(dǎo)致交配行為中斷。依據(jù)試驗(yàn)所設(shè)6組雌、雄體長(zhǎng)及交配時(shí)長(zhǎng)(表1)數(shù)據(jù),黑腹狼蛛雌、雄體長(zhǎng)與交配時(shí)長(zhǎng)的相關(guān)系數(shù)分別為0.213(P>0.05)和0.139(P>0.05),說(shuō)明黑腹狼蛛雌、雄體長(zhǎng)與交配時(shí)長(zhǎng)無(wú)明顯的相關(guān)性。

        2.1.2 生殖能力? ? 對(duì)成功交配的組分別進(jìn)行飼養(yǎng)觀察(表1),黑腹狼蛛的產(chǎn)卵總數(shù)隨著交配時(shí)間的延長(zhǎng)而增加,各組別以組1交配時(shí)間(10.5 min)最長(zhǎng),產(chǎn)卵數(shù)最多,共206枚;對(duì)成功交配組別的產(chǎn)卵總數(shù)和交配時(shí)間進(jìn)行相關(guān)分析,其相關(guān)系數(shù)為0.945(P<0.05),說(shuō)明雌雄親本成功交配所用時(shí)間的長(zhǎng)短與產(chǎn)卵數(shù)量呈顯著正相關(guān)。

        2.2 孵化方法

        2.2.1 產(chǎn)卵抱蛋行為? ? 雌蛛用蛛絲包裹受精卵制成卵袋,并用蛛絲將卵袋固定于腹部隨身攜帶。在產(chǎn)卵前,雌蛛食量會(huì)大增,在其抱蛋期間偶爾會(huì)出現(xiàn)雌蛛將卵袋吃掉的行為,為避免雌蛛誤食卵袋,應(yīng)定期投喂并清理飼養(yǎng)環(huán)境,投喂過(guò)程盡可能避免驚動(dòng)抱蛋雌蛛。抱蛋雌蛛有曬卵行為,此行為可加速卵的孵化及防止病菌滋生。雌蛛交配后需經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后才將受精卵產(chǎn)出,經(jīng)試驗(yàn)統(tǒng)計(jì)黑腹狼蛛自交配日起至產(chǎn)卵日止,歷時(shí)18~92 d(數(shù)據(jù)未在表格中體現(xiàn)),與許樹(shù)成等[15]研究結(jié)果相符。雌蛛與若蛛共同生活至若蛛3齡,若蛛便離開(kāi)雌蛛獨(dú)自覓食,雌蛛食量增加,補(bǔ)足養(yǎng)分后即可進(jìn)行下一次產(chǎn)卵。

        2.2.2 孵化率? 在試驗(yàn)孵化條件[人工孵化溫、濕度分別設(shè)為(30±1) ℃、75%]下,黑腹狼蛛的孵化率均可達(dá)80%以上(表2)。

        2.3 若蛛飼養(yǎng)

        2.3.1 哺幼行為? ? 對(duì)孵化的若蛛(3~5齡)與雌蛛共同飼養(yǎng),發(fā)現(xiàn)雌蛛在攝食時(shí)會(huì)將食物與若蛛分食導(dǎo)致其食量會(huì)有所下降。

        2.3.2 單蛛飼養(yǎng)最佳時(shí)間? ? 試驗(yàn)的對(duì)照組存活率100%,不在表中列出。

        由表3可知,將黑腹狼蛛若蛛進(jìn)行群養(yǎng)時(shí),5齡及6齡若蛛的同類(lèi)相食率高于4齡。經(jīng)方差分析(表4),結(jié)果表明黑腹狼蛛齡期對(duì)其同類(lèi)相食率有極顯著影響(P<0.01),處于3~6齡階段的若蛛同類(lèi)相食率會(huì)隨著齡期增大而上升。若在3齡直接進(jìn)行單蛛飼養(yǎng),操作難度較大,人工成本較高,而5齡后繼續(xù)群居飼養(yǎng),會(huì)造成若蛛數(shù)量的大量損失,故選擇在進(jìn)入5齡時(shí)進(jìn)行單蛛飼養(yǎng)。應(yīng)當(dāng)注意的是,當(dāng)在群養(yǎng)的若蛛中發(fā)現(xiàn)個(gè)別若蛛體型明顯大于其它若蛛時(shí),應(yīng)及時(shí)將其與蛛群分離,進(jìn)行單蛛飼養(yǎng),避免同類(lèi)相食現(xiàn)象。

        3 結(jié)論與討論

        3.1 討 論

        3.1.1 交配與產(chǎn)卵的關(guān)系? ? 吳俊等[16]研究表明,蜘蛛交配持續(xù)時(shí)長(zhǎng)及有效交配時(shí)長(zhǎng)與觸肢器插入次數(shù)都存在極顯著的正相關(guān)。本研究中,產(chǎn)卵總數(shù)和交配時(shí)間顯著正相關(guān)(P<0.05),推斷觸肢器插入次數(shù)與產(chǎn)卵量可能具有一定的相關(guān)性,相關(guān)試驗(yàn)有待于進(jìn)一步開(kāi)展。

        3.1.2 孵化溫度? ? 大多數(shù)變溫動(dòng)物的捕食、繁殖等行為都會(huì)受到其生活環(huán)境中溫度的影響[17],因?yàn)榄h(huán)境溫度會(huì)影響蜘蛛體內(nèi)酶的活性,酶的活性較高時(shí),蜘蛛的消化代謝能力隨之增強(qiáng),能夠刺激蜘蛛捕食[18]。譚昭君等[19]試驗(yàn)結(jié)果也明確指出,在光照強(qiáng)度和光照顏色一定時(shí),環(huán)境溫度為26 ℃時(shí)捕食率最高。因此,本試驗(yàn)中人工培養(yǎng)箱所設(shè)置溫度為(26±1) ℃,試驗(yàn)期間發(fā)現(xiàn)黑腹狼蛛產(chǎn)卵前食量明顯增大,通過(guò)增大取食量能更好地給受精卵供應(yīng)充足的營(yíng)養(yǎng),而捕食和取食會(huì)受到溫度影響,故推測(cè)溫度會(huì)對(duì)產(chǎn)卵數(shù)存在一定影響。關(guān)于孵化溫度,王娟等[20]研究表明30 ℃更有利于蜘蛛胚胎發(fā)育,但是繁殖期不同階段溫度是否影響產(chǎn)卵量,以及孵化過(guò)程中溫度與孵化時(shí)間、孵化率的關(guān)系尚待進(jìn)一步的研究。

        3.1.3 孵化濕度? ? 彭宇等[21]在研究環(huán)境因子對(duì)真水狼蛛胚胎發(fā)育的影響中發(fā)現(xiàn),相對(duì)濕度主要影響胚胎成形率和卵的孵化率,當(dāng)相對(duì)濕度低于一定值(不同種類(lèi)的蜘蛛卵對(duì)孵化的相對(duì)濕度要求不同)時(shí),卵不能孵化。本試驗(yàn)中,在進(jìn)行孵化試驗(yàn)時(shí),曾發(fā)生蛛卵感染霉菌或干癟導(dǎo)致孵化率降低的現(xiàn)象,此現(xiàn)象與環(huán)境濕度密切相關(guān);未成功孵化的蛛卵可能與自然孵化過(guò)程中卵囊受溫的均勻程度、空氣的供給、卵囊內(nèi)相對(duì)濕度的變化及卵的受精率有一定的關(guān)聯(lián)[22-23];人工孵化濕度75%時(shí)孵化率較高,這與潘紅平等[11]的研究中所設(shè)蛛卵孵化濕度(70%)相比高5%,應(yīng)該是與蜘蛛品種和地域不同有關(guān)。

        3.2 結(jié) 論

        本試驗(yàn)在黑腹狼蛛的交配、產(chǎn)卵、若蛛飼養(yǎng)等養(yǎng)殖方法上進(jìn)行了初步探究,黑腹狼蛛若蛛飼養(yǎng)溫、濕度分別設(shè)為(26±1) ℃和(80±5)%可有效提高存活率,在繁殖期增加活餌能彌補(bǔ)人工餌料營(yíng)養(yǎng)不足,自然孵化溫度(27±1) ℃、濕度80%,人工孵化溫度(30±1) ℃、濕度75%,若蛛進(jìn)行單蛛飼養(yǎng)的最佳齡期為5齡,在這些條件均滿足的情況下,若蛛成活率可達(dá)90%(未在數(shù)據(jù)中體現(xiàn))。

        3.3 建 議

        在飼養(yǎng)黑腹狼蛛時(shí)可能感染的常見(jiàn)病原性疾病有黑腐病、霉斑病。變質(zhì)的食物極易引發(fā)黑腐病,黑腐病的癥狀為腹部發(fā)黑、身體腐敗,患病后可在投喂的飼料中拌入土霉素和四環(huán)素等進(jìn)行治療[15]。霉斑病有傳染性,由高溫高濕引起真菌寄生,癥狀為蜘蛛體表出現(xiàn)褐色點(diǎn)狀霉斑,若蛛因體型小較難發(fā)現(xiàn),若觀察到蜘蛛呆滯且不取食時(shí)應(yīng)及時(shí)隔離觀察,一旦發(fā)病無(wú)法治療,故可提前喂食土霉素、酵母片來(lái)提高蜘蛛抵抗力。

        此外,黑腹狼蛛還可能出現(xiàn)非侵襲性疾病如軟腳病、便秘、蛻皮障礙等。軟腳病在捕鳥(niǎo)蛛上的研究較多,Mn與Ca含量不足[24]、相對(duì)濕度過(guò)大、溫度過(guò)高、維生素不足等均易導(dǎo)致捕鳥(niǎo)蛛軟腳病發(fā)生;蜘蛛便秘通常由缺水和取食高脂肪食物引起,發(fā)病時(shí)常常食欲不振,可以通過(guò)補(bǔ)充足夠的水分、停止投喂1~2 d進(jìn)行治療,同時(shí)減少投喂高脂肪的食物,或可在食物內(nèi)添加膽堿類(lèi)物質(zhì)促進(jìn)脂肪代謝,以避免此疾病的發(fā)生;蜘蛛蛻皮障礙可能由于周?chē)h(huán)境過(guò)于干燥、食物單一以及蛻皮相關(guān)激素的紊亂[25-27]引發(fā),通過(guò)在人工飼料中添加充足的維生素、保持足夠的濕度可在一定程度上防止蛻皮失敗。

        致謝:在此特別感謝祝云斌、強(qiáng)晟在采集黑腹狼蛛時(shí)的幫助,以及羅升略對(duì)論文寫(xiě)作上的指導(dǎo)。

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