張永輝，張萬(wàn)祥，曹 蕾，張 林，曹明崇

（甘肅省草原技術(shù)推廣總站，甘肅 蘭州 730010）

青貯是新鮮飼料保存的最好方法，使動(dòng)物一年四季日糧構(gòu)成均衡，確保動(dòng)物高產(chǎn)，促進(jìn)畜牧業(yè)健康發(fā)展。一般來(lái)說(shuō)，成功調(diào)制青貯飼料的關(guān)鍵在于是否促進(jìn)乳酸菌的大量繁殖，通常情況下，原料表面上附著的乳酸菌遠(yuǎn)少于好氧性微生物，只依靠原料上附著的乳酸菌進(jìn)行乳酸發(fā)酵來(lái)獲得優(yōu)質(zhì)青貯飼料較為困難[1]。微生物添加劑是一種額外提供給乳酸菌以保證快速而良好青貯發(fā)酵的添加劑，它們以可溶性碳水化物為發(fā)酵底物，增加乳酸含量，快速降低青貯飼料的pH值[2]。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)添加乳酸菌對(duì)玉米青貯品質(zhì)的研究很多，甘肅地區(qū)微生物添加劑種類繁多，發(fā)酵效果有效和無(wú)效兼而有之，缺乏添加劑種類對(duì)比試驗(yàn)。本試驗(yàn)以生物添加劑M和生物添加劑L作為添加劑，研究對(duì)玉米青貯發(fā)酵品質(zhì)及微生物數(shù)量的影響，以尋求理想的生物添加劑，為調(diào)制優(yōu)質(zhì)玉米青貯提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

以定西市安定區(qū)的玉米秸稈為試驗(yàn)材料，供試玉米秸稈化學(xué)成分及微生物數(shù)量見(jiàn)表1，生物添加劑M，購(gòu)置于某公司，主要成分為植物乳桿菌、兼型腸球菌；生物添加劑L，來(lái)源于某高校，主要成分為植物乳桿菌、腸膜狀明串珠葡聚糖亞種和兼性腸球菌。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

添加劑的添加量按新鮮原料重計(jì)。試驗(yàn)設(shè)計(jì)如表2所示，對(duì)玉米秸稈（室溫下自然風(fēng)干24 h）進(jìn)行如下處理：根據(jù)所添加生物添加劑不同分為2個(gè)處理組：1組、2組；對(duì)照組，噴灑等量的滅菌水。每個(gè)處理3個(gè)平行。將供試玉米秸稈切短至20～30 mm后，混勻，經(jīng)不同處理后裝于塑料瓶中，每瓶600 g，60 d后開封。

表1 供試玉米化學(xué)成分及微生物數(shù)量

表2 青貯試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 感官鑒定 青貯60 d后采樣，從顏色、氣味、質(zhì)地、水分、霉變等方面進(jìn)行感官評(píng)定。

1.3.2 青貯料的pH值測(cè)定 稱取100 g青貯飼料，放入三角瓶中，加滅菌水至500 ml，置于4℃冰箱內(nèi)浸取12 h，用PhS-3D酸度計(jì)測(cè)定。

1.3.3 青貯料的化學(xué)成分及微生物數(shù)量的測(cè)定粗蛋白(CP)含量采用微板光譜儀(美國(guó)Molecular Devices)、改良型Bradford法測(cè)定[3-4](上海生工生物工程公司)；采用范氏法測(cè)定中性洗滌纖維(NDF)、酸性洗滌纖維(ADF)和酸性洗滌木質(zhì)素(ADL)[5]；有機(jī)酸采用高效液相色譜法測(cè)定[6-8]；乳酸菌、酵母菌和霉菌數(shù)量分別采用MRS(deMan—Rogosa—Sharpe)瓊脂培養(yǎng)基、營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基(nutrient agar)、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(potato dextrose agar)計(jì)數(shù)。

1.4 數(shù)據(jù)分析

用SPSS19.0軟件進(jìn)行單因素方差分析和多重比較[9]。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同處理對(duì)玉米秸稈青貯感官品質(zhì)的影響

各組青貯料在色澤、氣味、結(jié)構(gòu)等指標(biāo)上均無(wú)顯著差異，對(duì)照組顏色略淺，氣味淡于各試驗(yàn)組；各組青貯料的結(jié)構(gòu)都保存完整，未見(jiàn)發(fā)霉現(xiàn)象。由于感官評(píng)定只能通過(guò)色、香、味、形等表觀特征進(jìn)行評(píng)價(jià)，故僅作參考（表3）。

表3 不同添加劑玉米青貯飼料的感官評(píng)定

2.2 不同處理對(duì)玉米青貯微生物的影響

由表4可知，各處理組乳酸菌數(shù)量高于未青貯前，酵母菌、霉菌數(shù)量低于青貯前，生物添加劑2組乳酸菌數(shù)量最高，達(dá)到4.27×106cfu/g，說(shuō)明生物添加劑2組中的乳酸菌在青貯發(fā)酵過(guò)程活性要高于生物添加劑1組。1組和2組酵母菌和霉菌的數(shù)量低于對(duì)照組。在本試驗(yàn)中，生物添加劑1組和2組均能增加青貯飼料中乳酸菌數(shù)量，降低酵母菌和霉菌的數(shù)量。

表4 不同添加劑對(duì)玉米青貯微生物數(shù)量的影響

2.3 不同處理對(duì)玉米青貯pH的影響

pH值是反映常規(guī)青貯飼料品質(zhì)惡劣的重要指標(biāo)，由圖1可知，生物添加劑1組和2組pH值明顯低于對(duì)照組，分別為3.75和3.66，但1組和2組pH值差異不顯著，說(shuō)明兩種生物添加劑均能使青貯飼料的pH值快速降低至4.0以下，一般pH值越低，青貯飼料品質(zhì)越好。

圖1 不同添加劑玉米青貯飼料的pH值

2.4 不同處理對(duì)玉米青貯有機(jī)酸的影響

不同添加劑對(duì)玉米青貯有機(jī)酸含量的影響（表5），1組和2組乳酸含量顯著高于對(duì)照組，且二者之間差異顯著，2組乳酸含量最高，與對(duì)照組相比提高了40%，說(shuō)明生物添加劑2組更能促進(jìn)乳酸發(fā)酵，增加青貯中乳酸的含量。不同處理組乙酸含量不同，各處理組差異顯著，生物添加劑1組乙酸含量最高，為2.30%，這說(shuō)明1組生物添加劑中異性發(fā)酵乳酸菌數(shù)量多，在發(fā)酵過(guò)程中，生成了大量乙酸。各處理組丙酸含量無(wú)顯著差異。

表5 不同添加劑對(duì)玉米青貯有機(jī)酸含量的影響

2.5 不同添加劑對(duì)玉米青貯化學(xué)成分的影響

玉米青貯營(yíng)養(yǎng)成分含量（表6）。青貯處理的干物質(zhì)含量均低于原料中干物質(zhì)含量，且差異顯著，生物添加劑1組和2組干物質(zhì)含量顯著低與對(duì)照組。粗蛋白含量方面，不同生物添加劑處理玉米青貯同未青貯相比粗蛋白含量均升高。處理1組和2組粗蛋白含量均顯著高于對(duì)照組，但二者之間粗蛋白含量無(wú)顯著性差異，處理2組的粗蛋白含量最高，為7.54%，說(shuō)明2組生物添加劑更能適應(yīng)青貯發(fā)酵過(guò)程，在青貯發(fā)酵過(guò)程中有益微生物大量繁殖，菌體蛋白含量增加，使玉米青貯粗蛋白含量增高。生物添加劑2組中性洗滌纖維含量最高，為58.29%，并且與對(duì)照組差異顯著。生物添加劑1組酸性洗滌纖維含量最高，為35.33%，并且各組差異顯著。本試驗(yàn)中，中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的含量均高于青貯前，這可能由于在青貯發(fā)酵過(guò)程中，細(xì)胞自身呼吸導(dǎo)致碳水化合物分解，從而使不可消化組分的含量相對(duì)增加，本試驗(yàn)所用的2種生物添加劑均不能降低中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維的含量。

表6 玉米青貯化學(xué)成分的影響

3 討論

青貯發(fā)酵受青貯原料本身附著的乳酸菌種類和數(shù)量的影響，然而光靠材料上附著的乳酸菌進(jìn)行乳酸發(fā)酵來(lái)獲得優(yōu)質(zhì)青貯飼料較為困難，為了使乳酸菌在青貯早期發(fā)酵過(guò)程中占主導(dǎo)地位，乳酸菌數(shù)目應(yīng)該大于105cfu/g[10]。國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)添加乳酸菌對(duì)玉米青貯品質(zhì)的研究很多，甘肅地區(qū)微生物添加劑種類繁多，發(fā)酵效果有效和無(wú)效兼而有之，缺乏添加劑種類對(duì)比試驗(yàn)。本試驗(yàn)以生物添加劑M和生物添加劑L作為添加劑，研究對(duì)玉米青貯發(fā)酵品質(zhì)及微生物數(shù)量的影響，研究表明：生物添加劑M和生物添加劑L均能增加青貯后玉米秸稈表面乳酸菌數(shù)量，減少酵母菌和霉菌的數(shù)量。生物添加劑L更能適應(yīng)青貯發(fā)酵過(guò)程，產(chǎn)生大量乳酸，快速降低玉米青貯pH值，達(dá)到3.66，pH值越低，提高了青貯飼料的發(fā)酵品質(zhì)。生物添加劑M乙酸含量顯著高于對(duì)照組和生物添加劑L組，乙酸含量的增加有利于提高飼料有氧穩(wěn)定性[11]。生物添加劑M和生物添加劑L均能增加玉米青貯粗蛋白含量，這與席興軍(2003)報(bào)道的添加乳酸菌對(duì)玉米秸稈青貯飼料中粗蛋白的含量無(wú)明顯影響[12]不一致，這可能是由于添加劑中乳酸菌種類不同所造成的，蛋白含量的增加提高了玉米青貯飼料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。生物添加劑M和生物添加劑L均能降低青貯后干物質(zhì)含量，但使NDF、ADF含量增加，這是由于乳酸菌的加入使青貯過(guò)程細(xì)胞壁物質(zhì)的降解增加，剩下了難以降解的組分，所以NDF等不可消化組分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)有所增加[13]。本試驗(yàn)研究?jī)煞N微生物添加劑對(duì)玉米青貯發(fā)酵品質(zhì)及微生物數(shù)量的影響，表明微生物添加劑L更能適應(yīng)本地區(qū)青貯發(fā)酵過(guò)程。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)研究得出，生物添加劑M和生物添加劑L均能增加青貯玉米秸稈表面的乳酸菌數(shù)量，減少酵母菌和霉菌的數(shù)量；生物添加劑L更能適應(yīng)青貯發(fā)酵過(guò)程，產(chǎn)生大量乳酸，快速降低玉米青貯pH值，達(dá)到3.66，pH值越低，青貯飼料品質(zhì)越好；生物添加劑M和生物添加劑L均能增加玉米青貯粗蛋白含量，但不能降低中性洗滌纖維和酸性洗滌纖維含量。