FoxM1靶向調(diào)控bcl-2促進(jìn)急性髓系白血病發(fā)生

陳謹(jǐn)，王曉明，周敏然，等

摘要：目的：探討叉頭框蛋白M1（forkhead box M1，F(xiàn)oxM1）及其調(diào)控的原癌基因 B細(xì)胞白血病/淋巴瘤-2（B-cell leukemia/lymphoma-2，bcl-2）在急性髓系白血?。╝cute myeloid leukemia，AML）發(fā)生中的作用。方法：隨機(jī)采集17例AML初診患者、17例AML治療后達(dá)完全緩解（complete remission，CR）患者、17例AML難治復(fù)發(fā)（refractoriness and relapse，RR）患者和15例正常人的骨髓標(biāo)本，分離出其中的單個(gè)核細(xì)胞，采用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，RT-qPCR）和細(xì)胞免疫熒光染色方法檢測(cè)這些細(xì)胞中FoxM1的mRNA和蛋白表達(dá)；轉(zhuǎn)染FoxM1小干擾RNA（small interfering RNA，siRNA）和對(duì)照siRNA至白血病 HL60細(xì)胞和K562細(xì)胞，采用細(xì)胞計(jì)數(shù)法觀察FoxM1對(duì)白血病細(xì)胞生長(zhǎng)的影響，采用軟瓊脂克隆形成實(shí)驗(yàn)測(cè)定FoxM1對(duì)白血病細(xì)胞克隆形成能力的影響，采用流式細(xì)胞術(shù)（Annexin V-PE和7-氨基放線菌素D雙染）檢測(cè)FoxM1對(duì)白血病細(xì)胞凋亡的影響，分別采用RT-qPCR和Western blot法檢測(cè)FoxM1對(duì)HL60細(xì)胞和K562細(xì)胞中Bcl-2 mRNA和蛋白表達(dá)的影響。通過(guò)雙螢光素酶活性實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FoxM1在HL60細(xì)胞和K562細(xì)胞中是否可以靶向作用于bcl-2啟動(dòng)子區(qū)域進(jìn)而影響bcl-2的表達(dá)。結(jié)果：AML初診患者骨髓標(biāo)本中 FoxM1的mRNA和蛋白表達(dá)較正常對(duì)照顯著升高，CR患者的FoxM1表達(dá)較初診組降低，RR患者的FoxM1表達(dá)較初診組進(jìn)一步升高。轉(zhuǎn)染FoxM1siRNA沉默HL60細(xì)胞和K562細(xì)胞的FoxM1表達(dá)后，細(xì)胞生長(zhǎng)速率顯著下降，細(xì)胞克隆形成能力顯著降低，細(xì)胞凋亡率顯著升高，Bcl-2的mRNA和蛋白表達(dá)降低，雙螢光素酶活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明FoxM1可靶向調(diào)控bcl-2。此外，在AML初診患者骨髓標(biāo)本中，Bcl-2的mRNA和蛋白表達(dá)亦較正常對(duì)照顯著升高，且與FoxM1的表達(dá)呈正相關(guān)。結(jié)論：本研究初步證實(shí)FoxM1可通過(guò)靶向調(diào)控bcl-2促進(jìn) AML的發(fā)生、發(fā)展；干擾FoxM1表達(dá)可抑制白血病細(xì)胞的增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡，提示FoxM1是治療AML的潛在靶標(biāo)。

來(lái)源出版物：中國(guó)病理生理雜志, 2016, 32(8): 1383-1388

入選年份：2016