楊大俏,王錦旭,李來(lái)好,*,楊賢慶,馬海霞

(1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院南海水產(chǎn)研究所,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部水產(chǎn)品加工重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,廣東省漁業(yè)生態(tài)環(huán)境重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室,廣東廣州 510300;2.上海海洋大學(xué)食品學(xué)院,上海 201306)

牡蠣俗稱蠔或海蠣子,肉質(zhì)鮮美可口而受到人們喜愛(ài),具有很高的藥用價(jià)值[1-2],并且含有豐富的蛋白質(zhì)[2]和碳水化合物,因其鋅含量極高,富含鐵、鈣等元素,素有“海洋牛奶”的稱號(hào)[3]。中國(guó)擁有豐富的海洋資源,2016年中國(guó)牡蠣行業(yè)產(chǎn)量達(dá)到483.5萬(wàn)噸[4],是中國(guó)一種重要經(jīng)濟(jì)貝類,但是,目前中國(guó)對(duì)牡蠣產(chǎn)品除直接食用外,大多通過(guò)簡(jiǎn)單加工直接進(jìn)入食品市場(chǎng),產(chǎn)品附加值不高[5],牡蠣產(chǎn)業(yè)發(fā)展受到制約。研究生物活性物質(zhì)是海洋研究的主導(dǎo)方向[6],相關(guān)研究報(bào)道顯示,牡蠣多糖具有多種藥用功能,對(duì)牡蠣多糖的深入研究有利于制藥、功能食品及膳食補(bǔ)充劑等行業(yè)的發(fā)展[7-8]。天然海洋活性多肽具有較高的穩(wěn)定性[9],但是海洋魚(yú)蝦貝類中的生物活性肽的研究尚處于實(shí)驗(yàn)室階段[7-10]。

目前已有關(guān)于牡蠣多糖或牡蠣多肽[11]的提取工藝研究,多采用堿提取法[12]和蛋白酶水解法[13-14],但該類研究多集中在單獨(dú)提取多糖分子或單獨(dú)提取多肽分子上,關(guān)于牡蠣多糖活性分子和多肽活性分子聯(lián)產(chǎn)工藝并未見(jiàn)報(bào)道。聯(lián)產(chǎn)[15-16]制備技術(shù)是指利用物理或化學(xué)方法同時(shí)提取物料中多種有效成分的高效、潔凈利用的生產(chǎn)技術(shù)。關(guān)于幾種物質(zhì)同時(shí)提取或聯(lián)產(chǎn)制備的研究,國(guó)內(nèi)主要集中于油料作物和中草藥活性成分的提取方面,對(duì)海洋生物資源尤其是關(guān)于高效利用牡蠣的工藝研究還比較少,國(guó)外研究在這一方面幾乎還是盲點(diǎn)。本研究旨在得到同時(shí)提取近江牡蠣(Ostrearivularis)中功能多糖和活性多肽的工藝,實(shí)現(xiàn)近江牡蠣多糖和多肽的聯(lián)產(chǎn)制備,以提高近江牡蠣利用率。

本實(shí)驗(yàn)以近江牡蠣為原料,采用單因素試驗(yàn)研究了酶解時(shí)間、酶配比及料液比對(duì)多糖[17]多肽聯(lián)產(chǎn)的影響,在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步通過(guò)響應(yīng)面法分析了各因素及其交互作用對(duì)多肽含量、酸性糖含量及總糖含量的影響,并最終得到最優(yōu)多糖多肽的聯(lián)產(chǎn)工藝條件,以期為連續(xù)膜分離聯(lián)產(chǎn)制備近江牡蠣多糖及多肽的中試化放大生產(chǎn)提供基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

近江牡蠣全臟器(于-20 ℃冷凍保藏備用) 廣東省臺(tái)山市;Alcalase酶(210 AU·mg-1)、胰蛋白酶(≥250 U·mg-1)、中性蛋白酶(≥100 U·mg-1) 廣州齊云生物技術(shù)有限公司;硫酸軟骨素、甘氨酸、氯化鈉、氫氧化鈉、葡萄糖、無(wú)水乙醇、三氯乙酸、苯酚、無(wú)水硫酸銅、甲醛、鹽酸、濃硫酸(均為分析純) 廣州佳研生物科技有限公司;1,9-二甲基亞甲基藍(lán)、Gly-Gly-Tyr-Arg(標(biāo)準(zhǔn)品) 美國(guó)Sigma公司。

JYL-C022E料理機(jī) 九陽(yáng)股份有限公司;T50均質(zhì)機(jī) 德國(guó)IKA;ZDJ-4A雷磁自動(dòng)電位滴定儀 上海儀電科學(xué)儀器股份有限公司;Sunrise-basic Tacan吸光酶標(biāo)儀 瑞士TECAN;三聯(lián)高壓平板膜設(shè)備 廈門(mén)福美科技有限公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 聯(lián)產(chǎn)提取工藝 近江牡蠣全臟器→勻漿→均質(zhì)10 min→熱水浸提→調(diào)pH8.0→酶解→煮沸滅酶→離心→上清液調(diào)pH7.0→0.22 μm濾膜除雜→200 kDa膜分離→收集濾過(guò)液與截留液→濾過(guò)液經(jīng)8 kDa膜分離[18]→收集8 kDa以下濾過(guò)液(粗多肽)、8 kDa以上截留液(粗多糖)→凍干得粗多肽、粗多糖。

1.2.1.1 熱水浸提 將牡蠣勻漿與水混勻后在55 ℃水浴0.5 h。

1.2.1.2 離心 將經(jīng)過(guò)煮沸滅酶后的牡蠣酶解液在9000 r·min-1離心10 min。

1.2.1.3 0.22 μm微濾微濾條件 操作壓力為0.12 MPa,操作溫度為10 ℃。

1.2.1.4 8 kDa膜分離超濾條件 操作壓力為1.05 MPa,操作溫度為10 ℃。

1.2.1.5 200 kDa膜分離超濾條件 操作壓力為0.5 MPa,操作溫度為10 ℃。

1.2.1.6 凍干 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)溫度為55 ℃。

1.2.2 酶種類及添加量的選擇 以近江牡蠣全臟器為原料,勻漿均質(zhì)、熱水浸提后分別按照質(zhì)量分?jǐn)?shù)200、400、600、800、1000 mg·L-1(0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%)的添加量添加Alcalase酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶三種酶,在55 ℃、pH8.0的條件下單酶酶解2.0 h,酶解液在9000 r·min-1離心10 min,調(diào)酶解液上清液pH至中性,測(cè)定水解度、多肽含量、酸性糖含量和總糖含量。以酶解液中多肽含量、酸性糖含量及總糖含量的極大值為指標(biāo),判定最佳酶解條件。

1.2.3 近江牡蠣肉多糖多肽聯(lián)產(chǎn)工藝的單因素實(shí)驗(yàn)

1.2.3.1 酶解時(shí)間對(duì)近江牡蠣肉多糖多肽聯(lián)產(chǎn)工藝影響 取50.0 g近江牡蠣全臟器勻漿均質(zhì)后,加入150 mL去離子水,于55 ℃熱水浸提0.5 h,調(diào)節(jié)pH至8.0,加入配比為3∶1的Alcalase和胰蛋白酶(總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%),在55 ℃下分別酶解0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 h。酶解后煮沸滅酶,離心取適量上清液測(cè)量水解度以及多肽含量,調(diào)節(jié)pH至7.0,加入無(wú)水乙醇至終體積分?jǐn)?shù)為65%,4 ℃醇沉24 h,過(guò)濾取沉淀,丙酮洗滌三次,干燥后配制成溶液檢測(cè)酸性糖含量以及總糖含量。以酶解液中多肽含量、酸性糖含量及總糖含量的極大值為指標(biāo),判定最佳酶解時(shí)間。

1.2.3.2 雙酶配比對(duì)近江牡蠣肉多糖多肽聯(lián)產(chǎn)工藝影響 在酶解時(shí)間為2.0 h,料液比為1∶3的情況下,加入總添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%的Alcalase與胰蛋白酶,配比分別為4∶0、3∶1、2∶2、1∶3、0∶4。以酶解液中多肽含量、酸性糖含量及總糖含量的極大值為指標(biāo),判定最佳雙酶配比。

1.2.3.3 料液比對(duì)近江牡蠣肉多糖多肽聯(lián)產(chǎn)工藝影響 在酶解時(shí)間為2.0 h,配比為3∶1的Alcalase和胰蛋白酶(總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%)情況下,分別按照1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5 (g/mL)的料液比添加去離子水。以酶解液中多肽含量、酸性糖含量及總糖含量的極大值為指標(biāo),判定最佳料液比。

1.2.4 響應(yīng)面法優(yōu)化近江牡蠣肉多糖多肽聯(lián)產(chǎn)工藝 通過(guò)單因素實(shí)驗(yàn)[19-21]確定選取酶解時(shí)間A、雙酶配比B、料液比C作為三因素進(jìn)行編碼[28],以多肽含量、酸性糖含量和總糖含量作為響應(yīng)值,實(shí)驗(yàn)因素和水平設(shè)計(jì)見(jiàn)表1。

表1 響應(yīng)面試驗(yàn)因素及水平表Table 1 Factors and levels table of response surface experiment

1.2.5 指標(biāo)測(cè)定 多肽的含量采用三氯乙酸沉淀法[22];水解度的測(cè)定依照甲醛滴定法[23-24];總糖含量采用苯酚-硫酸法[25];酸性糖含量的測(cè)定采用1,9-二甲基亞甲基藍(lán)法[26-27]。其中多肽、總糖、酸性糖含量以mg·50 g-1計(jì)。

1.3 數(shù)據(jù)分析

以上實(shí)驗(yàn)均經(jīng)過(guò)三次重復(fù)操作,采用IBM SPSS Statistics 20.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,運(yùn)用單因素方差分析(ANOVA)檢測(cè)平均值顯著性,其中*代表差異顯著(p<0.05),**代表差異極顯著(p<0.01)。

2 結(jié)果與分析

2.1 酶種類及添加量的選擇

由圖1可知,隨著3種酶添加量的增加,牡蠣酶解液的水解度升高,且Alcalase水解效果最佳;整體而言,在一定添加量下,Alcalase與胰蛋白酶酶解牡蠣勻漿得到的多肽含量較高;對(duì)于酸性糖等大分子物質(zhì),胰蛋白酶的酶解效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于其它2種酶,中性蛋白酶的酶解效果最差;通過(guò)總糖含量結(jié)果顯示,Alcalase與胰蛋白酶的酶解效果較好。綜上,選擇Alcalase與胰蛋白酶共同酶解牡蠣勻漿,以期同時(shí)得到所需的多糖多肽。

圖1 3種酶不同添加量對(duì)近江牡蠣勻漿水解度(a)、多肽含量(b)、酸性糖含量(c)以及總糖含量(d)的影響Fig.1 The effects of three enzymes on the degree of hydrolysis(a),polypeptide content(b),glycosaminoglycan content(c)and total-sugar content(d) of Ostrea rivularis

2.2 單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.2.1 酶解時(shí)間對(duì)近江牡蠣多糖多肽聯(lián)產(chǎn)的影響 結(jié)果見(jiàn)圖2,隨酶解時(shí)間的延長(zhǎng),水解度逐漸升高,但各數(shù)值間差異不明顯;多肽含量、酸性糖含量以及總糖含量隨酶解時(shí)間延長(zhǎng)均出現(xiàn)先增加后下降的趨勢(shì),并在酶解時(shí)間2.0 h達(dá)到最大值,故最適酶解時(shí)間為2.0 h。

圖2 不同酶解時(shí)間對(duì)近江牡蠣多糖多肽聯(lián)產(chǎn)的影響Fig.2 Effects of different hydrolysis time on co-production of polysaccharides and polypeptides simultaneously from Ostrea rivularis

2.2.2 雙酶配比對(duì)近江牡蠣多糖多肽聯(lián)產(chǎn)的影響 結(jié)果見(jiàn)圖3,水解度隨Alcalase酶含量的升高逐漸升高,各數(shù)值間差異不明顯;多肽含量、酸性糖含量以及總糖含量隨Alcalase與胰蛋白酶比例變化趨勢(shì)一致,并在Alcalase與胰蛋白酶添加比例為3∶1時(shí)達(dá)到最大值,故最適雙酶配比為Alcalase∶胰蛋白酶=3∶1(總添加質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.8%)。

圖3 酶配比對(duì)近江牡蠣多糖多肽聯(lián)產(chǎn)的影響Fig.3 Effects of different proportion of enzymes on co-production of polysaccharides and polypeptides simultaneously from Ostrea rivularis

2.2.3 料液比對(duì)近江牡蠣多糖多肽聯(lián)產(chǎn)的影響 結(jié)果如圖4所示,隨料液比的增大,水解度差異不明顯;多肽含量、酸性糖含量和總糖含量隨料液比的增大呈現(xiàn)出先增加后減小的趨勢(shì),并在料液比1∶3 g/mL時(shí)達(dá)到最大值,故選擇最佳料液比為1∶3 g/mL 。

圖4 料液比對(duì)近江牡蠣多糖多肽聯(lián)產(chǎn)的影響Fig.4 Effects of different solid-liquid ratios on co-production of polysaccharides and polypeptides simultaneously from Ostrea rivularis

2.3 響應(yīng)面試驗(yàn)結(jié)果

由圖2～圖4可知,在不同酶解時(shí)間、雙酶配比、料液比下,近江牡蠣酶解液的水解度變化差異不明顯,故而在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,根據(jù)Box-Benhken的中心組合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)原理,選取酶解時(shí)間A、雙酶配比B、料液比C作為三因素,并以具有顯著性差異的多肽含量Y1、酸性糖含量Y2和總糖含量Y3作為響應(yīng)值,實(shí)驗(yàn)方案及結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 響應(yīng)面試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 Design and results of response surface experiment

運(yùn)用Design Expert 8.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行回歸擬合,得到的回歸方程如下:

為檢驗(yàn)上述方程的有效性,運(yùn)用Design Expert 8.0.6軟件對(duì)上述結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,可信度分析見(jiàn)表3,方差分析結(jié)果見(jiàn)表4。三種響應(yīng)值的可信度分析的模型相關(guān)系數(shù)R2分別為0.9352、0.9615、0.9638,都接近于1,表示模型相關(guān)度很好;變異系數(shù)(C.V.%)分別為8.68、5.39、6.39,說(shuō)明該數(shù)學(xué)模型的置信度較好,該模型可以較好地反應(yīng)試驗(yàn)的真實(shí)值[18]。由表4可知,對(duì)于多肽含量、酸性糖含量和總糖含量三個(gè)響應(yīng)值,該模型的F值分別為11.23、19.45、20.72,p值分別為0.0022、0.0004、0.0003均小于0.05,可以判斷模型是顯著的;同時(shí)三個(gè)響應(yīng)值的模型失擬項(xiàng)p值均大于0.05,說(shuō)明模型失擬項(xiàng)不顯著。綜上所述,該回歸模型對(duì)三個(gè)響應(yīng)值的擬合程度較好,實(shí)驗(yàn)誤差小。

表4 回歸方程的方差分析Table 4 Analysis of variance(ANOVA)of regression equation

表3 模型的可信度分析Table 3 Reliability analysis of model

料液比對(duì)多肽的提取影響極顯著(p<0.01),雙酶配比和料液比對(duì)酸性糖的提取具有極顯著的影響(p<0.01),料液比對(duì)總糖提取的影響顯著(p<0.05),且該實(shí)驗(yàn)中三個(gè)單因素對(duì)近江牡蠣肉多肽含量、酸性糖含量、總糖含量影響的排序分別為料液比>酶解時(shí)間>雙酶配比、雙酶配比>料液比>酶解時(shí)間、料液比>酶配比>酶解時(shí)間。

利用此模型可擬合出三個(gè)響應(yīng)值相應(yīng)的響應(yīng)面分析圖,響應(yīng)面三維圖形是響應(yīng)值對(duì)試驗(yàn)因子(單因素變量)所構(gòu)成的三維空間曲面圖,可以進(jìn)一步研究各個(gè)變量間的交互作用并確定最優(yōu)點(diǎn)[20]。當(dāng)特征值(響應(yīng)值)變化,三維響應(yīng)面分析圖呈現(xiàn)相應(yīng)變化[21]。圖5a表示酶解時(shí)間與酶配比交互作用對(duì)多肽提取的影響,隨著酶解時(shí)間和胰蛋白酶添加比例增加,多肽含量變化不大,呈現(xiàn)輕微增加趨勢(shì),但其交互作用不顯著;圖5b表示酶解時(shí)間和料液比交互作用對(duì)多肽提取的影響,隨著酶解時(shí)間和料液比的增加,多肽含量呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì),而且隨著料液比的增加,多肽含量增加顯著且下降趨勢(shì)不明顯,以此判斷料液比的對(duì)多肽提取的影響顯著高于酶解時(shí)間,但其交互作用不顯著;圖5c表示酶配比和料液比交互作用對(duì)多肽提取的影響,隨著胰蛋白酶添加比例和料液比的增加,多肽含量先增加后降低,并且料液比的對(duì)多肽提取的影響高于酶配比對(duì)多肽提取的影響,但其交互作用不顯著。

圖5 酶解時(shí)間、酶配比和料液比兩兩交互作用對(duì)近江牡蠣多肽提取的影響Fig.5 The effects of hydrolysis time,enzymolysis proportion and liquid-solid ratio on the extraction of polypeptides from Ostrea rivularis注:a:酶解時(shí)間與酶配比的交互作用;b:酶解時(shí)間和料液比的交互作用;c:酶配比和料液比的交互作用。

圖6a為酶解時(shí)間與酶配比的交互作用對(duì)酸性糖提取的影響,隨著酶解時(shí)間和胰蛋白酶添加比例增加,酸性糖含量增加,但是胰蛋白酶添加比例對(duì)酸性糖提取的影響明顯大于酶解時(shí)間對(duì)酸性糖提取的影響,這與單因素實(shí)驗(yàn)得到的結(jié)論一致,但兩者交互作用不顯著;圖6b表示酶解時(shí)間和料液比交互作用對(duì)酸性糖提取的影響,隨著酶解時(shí)間和料液比的增加,酸性糖含量呈現(xiàn)輕微增加趨勢(shì),兩者交互作用不顯著;圖6c表示酶配比和料液比交互作用對(duì)酸性糖提取的影響,隨著胰蛋白酶添加比例和料液比的增加,酸性糖含量同樣先增加后降低,料液比的影響不顯著,兩者交互作用不顯著。綜合圖6可以看出,三種因素對(duì)酸性糖提取影響的交互作用均不顯著。

圖6 酶解時(shí)間、酶配比和料液比兩兩交互作用對(duì)近江牡蠣酸性糖提取的影響Fig.6 The effects of hydrolysis time,enzymolysis proportion and liquid-solid ratio on the extraction of glycosaminoglycan from Ostrea rivularis注:a:酶解時(shí)間與酶配比的交互作用;b:酶解時(shí)間和料液比的交互作用;c:酶配比和料液比的交互作用。

圖7a為酶解時(shí)間與酶配比的交互作用對(duì)總糖提取的影響,隨著酶解時(shí)間和胰蛋白酶添加比例增加,酸性糖含量先增加后減少,兩者交互作用不顯著;圖7b表示酶解時(shí)間和料液比交互作用對(duì)總糖提取的影響,隨著酶解時(shí)間和料液比的增加,總含量呈現(xiàn)先增加后降低的趨勢(shì),但兩者交互作用不顯著;圖7c表示酶配比和料液比交互作用對(duì)總糖提取的影響,隨著胰蛋白酶添加比例和料液比的增加,總糖含量先增加后降低,兩者交互作用不顯著。

圖7 酶解時(shí)間、酶配比和料液比兩兩交互作用對(duì)近江牡蠣總糖提取的影響Fig.7 The effects of hydrolysis time,enzymolysis proportion and liquid-solid ratio on the extraction of total-sugar from Ostrea rivularis注:a:酶解時(shí)間與酶配比的交互作用;b:酶解時(shí)間和料液比的交互作用;c:酶配比和料液比的交互作用。

以多肽含量、酸性糖含量以及總糖含量為響應(yīng)值,經(jīng)Design Expert 8.0.6軟件分析可得最佳工藝條件為酶解2.05 h,添加配比為2.9∶1.1的Alcalase和胰蛋白酶(總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%),料液比1∶3.65 g/mL,相應(yīng)的響應(yīng)面二次模型預(yù)測(cè)多肽含量最大值為251.10 mg·50 g-1,酸性糖含量最大值為8.57 mg·50 g-1,總糖含量最大值為388.00 mg·50 g-1,三種響應(yīng)值均為該最佳工藝條件下的最大值。為了驗(yàn)證該實(shí)驗(yàn)響應(yīng)面法的可行性,考慮到實(shí)際操作問(wèn)題,選取最佳提取工藝為酶解2.0 h,添加配比為3∶1的Alcalase和胰蛋白酶(總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%),料液比1∶3.6 g·mL-1,重復(fù)三次實(shí)驗(yàn)得到近江牡蠣酶解液中多肽含量(251.70±5.73) mg·50 g-1,酸性糖含量(8.17±0.29) mg·50 g-1,總糖含量(380.66±15.14) mg·50 g-1,與回歸方程預(yù)測(cè)值相近,說(shuō)明近江牡蠣多糖多肽聯(lián)產(chǎn)工藝是可行的,并在此條件開(kāi)展以下實(shí)驗(yàn)。

取500.00 g近江牡蠣勻漿,按照所得最佳工藝酶解近江牡蠣,經(jīng)過(guò)超濾膜分離酶解上清液,得粗多糖制品和粗多肽制品,重復(fù)3次試驗(yàn)得,粗多糖凍干品(21.25±0.60) g,得率為21.29%±0.77%,含85.18%±1.00%總糖,20.02%±0.38%酸性糖以及10.84%±0.12%多肽;粗多肽凍干品(31.88±0.71) g,得率為31.41%±0.47%,含84.03%±0.85%多肽,0.11%±0.01%酸性糖以及5.68%±0.15%總糖。

另外,經(jīng)過(guò)8 kDa超濾膜超濾分離后,使用三氯乙酸沉淀法、苯酚-硫酸法、1,9-二甲基亞甲基藍(lán)法測(cè)定各濃縮凍干粉,其顏色反應(yīng)證實(shí)8 kDa超濾膜分離效果良好,可用于近江牡蠣多糖多肽聯(lián)產(chǎn)工藝。

3 結(jié)論

近江牡蠣多糖多肽聯(lián)產(chǎn)的最優(yōu)酶解工藝為料液比1∶3.6 g·mL-1,添加配比為3∶1的Alcalase和胰蛋白酶(總質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%),酶解2.0 h。此條件下近江牡蠣酶解液中多肽含量(251.70±5.73) mg·50 g-1,酸性糖含量(8.17±0.29) mg·50 g-1,總糖含量(380.66±15.14) mg·50 g-1。并按此工藝酶解近江牡蠣全臟器勻漿,得粗多糖21.29%±0.77%,含85.18%±1.00%總糖,20.02%±0.38%酸性糖以及10.84%±0.12%多肽;粗多肽得率為31.41±0.47%,含84.03%±0.85%多肽,0.11%±0.01%酸性糖以及5.68%±0.15%總糖。與回歸方程預(yù)測(cè)值相近,說(shuō)明近江牡蠣多糖多肽聯(lián)產(chǎn)工藝是可行的,能夠同時(shí)且最大化地得到近江牡蠣多糖與多肽。