徐鶴翔 鄭吉順 解俊俠 李明遠(yuǎn) 章媛媛 梁利民

據(jù)估計(jì)，全球有超過(guò)1.85億人口感染丙型肝炎病毒(HCV)[1]。而我國(guó)HCV感染率約為1%，感染人群約1 400萬(wàn)[2]。丙型肝炎病毒屬黃病毒科肝炎病毒屬，為單股正鏈RNA病毒，基因組全長(zhǎng)9.6 kb。由于HCV基因組具有高度異質(zhì)性，根據(jù)HCV基因組核苷酸序列的差異性，目前將HCV分為7種基因型(1～7)和67種基因亞型[3]。國(guó)內(nèi)HCV的抗病毒治療仍以干擾素聯(lián)合利巴韋林為主，不過(guò)近年來(lái)我國(guó)逐漸批準(zhǔn)多個(gè)直接抗病毒藥物(direct-acting antivirals, DAAs)在臨床使用，研究表明，HCV基因型與干擾素聯(lián)合利巴韋林的方案，以及DAAs的治療應(yīng)答、療程均有相關(guān)性[4,5]。本研究對(duì)合肥地區(qū)HCV感染患者進(jìn)行基因型分布特征的研究，為HCV的科學(xué)化防治提供指導(dǎo)。

資料和方法

一、病例選擇

收集2012年1月至2017年12月合肥市第一人民醫(yī)院、合肥市濱湖醫(yī)院、安徽中醫(yī)藥大學(xué)第一附屬醫(yī)院及安徽中醫(yī)藥大學(xué)第三附屬醫(yī)院門(mén)診及住院HCV患者共251例，診斷均符合我國(guó)《慢性丙型肝炎防治指南》(2015年版)的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并排除合并甲、乙、戊型肝炎病毒感染的患者。

二、HCV基因分型：

采用PCR-sanger測(cè)序法檢測(cè)，HCV基因分型試劑盒購(gòu)自中山達(dá)安基因公司，實(shí)驗(yàn)步驟嚴(yán)格按照操作說(shuō)明進(jìn)行，采用ABI 3100 自動(dòng)測(cè)序儀對(duì)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物直接測(cè)序，與NCBI上參考序列比對(duì)確定HCV基因型。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

結(jié) 果

一、患者一般情況

共納入251例患者，其中男性117例，女性占46.61%，女性134例，占53.39%。中位年齡為52(19～77)歲。其中慢性丙型病毒性肝炎患者183例(72.91%)，68例為丙肝肝硬化患者。

二、HCV基因型及基因亞型總體分布情況

251例患者中，共檢出4種基因型，8種基因亞型?；?型171例，全部為1b型(占68.12%)，基因2型58例(占23.11%)， 2a、2i型分別為32例(12.75%)、26例(10.36%)，基因3型16例(占6.37%)，3a、3b型分別為11例(4.38%)、5例(1.99%)，基因6型6例(占2.40%)，6a、6n、6v型分別為3例(占1.2%)、1例(占0.40%)、2例(占0.80%)。

三、HCV基因型與性別的相關(guān)性

251例患者基因型在性別中的分布，見(jiàn)表1。各亞型在不同性別中的比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=10.848，P=0.145)。

表1 HCV 基因型在不同性別患者中的分布

四、HCV基因型與年齡的相關(guān)性

HCV基因型在不同年齡段分布情況，見(jiàn)表2。各年齡段基因型相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=38.895，P=0.007)。各年齡段基因1b型與其他基因型相比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=18.384，P<0.01)。年齡≤30歲和年齡>60歲患者基因型主要以1b、2a、2i型為主，而31～60年齡段患者可見(jiàn)3a、3b、6a、6n、6v等基因型分布。

五、HCV基因型不同時(shí)間分布：

2012年至2017年的HCV基因型構(gòu)成比見(jiàn)圖1。2014年以前基因型較為單一，主要以1b、2a型為主，2014年以后，1b型逐漸減少，2i、3a、3b型逐漸增多，近年來(lái)6a、6n、6v型也開(kāi)始逐漸出現(xiàn)，總的類(lèi)型逐漸增多。

六、HCV基因型與感染途徑的關(guān)系

不同HCV基因型感染途徑分布情況見(jiàn)表3。經(jīng)輸血、血液透析、母嬰傳播感染基因型分布較單一，主要以基因1b型為主，部分為2a、2i型，其他途徑(拔牙、紋身、紋眉、穿耳、職業(yè)暴露等)傳播以基因1b型為主，2a、2i、3a、3b型均有分布，而靜脈吸毒、性轉(zhuǎn)播基因型分布較為廣泛，1b、2a、2i、3a、3b、6a均有分布。

圖1 HCV基因型不同時(shí)間分布比例

討 論

HCV基因型有明顯的地域差別，不同國(guó)家和地區(qū)HCV基因型分布明顯差異，其中基因1a型多分布于歐洲和美國(guó)，基因1b型呈全球分布，是目前主要流行的基因型，在歐美及我國(guó)的比例達(dá)50%～70%[3,6]。基因2型主要分布北美洲、歐洲、日本及中國(guó)等，占HCV基因型的10%～30%?；?型主要分布于印度半島、東南亞?；?型在北非及中東地區(qū)常見(jiàn)，基因5型多分布于南非，基因6型主要分布于泰國(guó)、老撾等東南亞國(guó)家，而基因7型分部于少數(shù)中非移民[6]。我國(guó)HCV基因型主要為1b型，其次為2a型，由于國(guó)內(nèi)外交流增多及人口流動(dòng)，我國(guó)HCV基因型分布情況呈現(xiàn)逐漸變化的趨勢(shì)[7]。2017年Chen等[8]對(duì)中國(guó)大陸29個(gè)省及直轄市的流行病學(xué)調(diào)查研究顯示基因1型是我國(guó)丙肝最主要的基因型，在江蘇、安徽、陜西、江西、湖北和天津的比例分別達(dá)87.91%、77.7%、71.76%、72.88%、71.08%和70.27%?；?型主要流行于我國(guó)北方，其分布由北向南逐漸減少?；?型在我國(guó)西南地區(qū)的比例達(dá)38.7%，南方地區(qū)為13.69%，西北地區(qū)為11.11%，而北方地區(qū)僅為2.9%，呈現(xiàn)由西南地區(qū)到東北地區(qū)逐漸減少的趨勢(shì)。基因6型在我國(guó)北方地區(qū)的分布不足1%，而在南方地區(qū)的分布高達(dá)28.0%，其分布由南向北逐漸減少。

表2 HCV基因型在不同年齡段分布情況[例(%)]

表3 HCV基因型與感染途徑的關(guān)系[例(%)]

本研究發(fā)現(xiàn)，合肥地區(qū)的HCV基因型仍主要以1b型為主，其次為2a、2i型，同時(shí)存在3a、3b、6a、6n、6v基因型。本研究的結(jié)果與以往的研究略有不同[9]。1b型感染者比例降低，且基因型分布呈現(xiàn)多樣化趨勢(shì)。在性別分布上差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但在年齡分布上，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，不同年齡段均以1b型為主，其中31～60年齡段患者HCV基因型分布最為廣泛，可能與該群體人員人口流行大有關(guān)。在時(shí)間分布上，隨著時(shí)間的推移，基因1b型逐漸減少，2i、3a、3b型逐漸增多，近年來(lái)6a、6n、6v型也開(kāi)始逐漸出現(xiàn)，總的類(lèi)型逐漸增多，這與蘇迎盈等[10]研究結(jié)果一致。經(jīng)輸血、血液透析、母嬰傳播感染基因型分布較單一，主要以基因1b型為主，部分為2a、2i型，其他途徑(拔牙、紋身、紋眉、穿耳、職業(yè)暴露等)傳播以基因1b型為主，2a、2i、3a、3b型均有分布，而靜脈吸毒、性轉(zhuǎn)播基因型分布較為廣泛，1b、2a、2i、3a、3b、6a均有分布。

合肥地區(qū)HCV基因型分布呈現(xiàn)多樣化的特征，其原因可能為：1.合肥地區(qū)位于我國(guó)華東地區(qū)，交通便捷，人口流動(dòng)大；2.HCV基因型檢測(cè)方法和手段的廣泛使用；3.輸血、獻(xiàn)血、透析的嚴(yán)格篩查管理，輸血相關(guān)傳播途徑逐漸減少；4.靜脈注射毒品、性傳播、拔牙、紋身、紋眉、穿耳等其他途徑傳播逐漸增多。近年來(lái)我國(guó)靜脈吸毒人員已成為HCV感染的重要的傳播途徑，且基因型分布最為廣泛。

總之，本項(xiàng)研究通過(guò)對(duì)合肥地區(qū)的HCV基因型分布特征進(jìn)行初步分析，說(shuō)明本地區(qū)HCV基因型復(fù)雜多樣，為本地區(qū)HCV診療與防控策略提供相關(guān)的依據(jù)，同時(shí)由于我們的研究對(duì)象主要來(lái)源于醫(yī)院病例，而慢性丙型肝炎存在長(zhǎng)期的無(wú)癥狀期，可能存在病例選擇偏倚，并不能完全真實(shí)的反應(yīng)本地區(qū)的HCV基因型分布狀況，因此有必要在今后的研究工作中設(shè)計(jì)更嚴(yán)謹(jǐn)?shù)牧餍行圆W(xué)調(diào)查方法，掌握重點(diǎn)人群、普通人群的HCV感染特點(diǎn)，為本地區(qū)HCV的防治提供科學(xué)化的指導(dǎo)。