李 濤，何文軍，李 曼，徐 寧

（廣東省中醫(yī)院，廣州中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)部，廣州 510120）

0 引言

全血細(xì)胞計(jì)數(shù)是臨床檢驗(yàn)科最基本的檢驗(yàn)項(xiàng)目。為滿足門急診患者的就診需求，全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀正向著微量、快速、準(zhǔn)確的方向發(fā)展。邁瑞B(yǎng)C-6000Plus全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀（以下簡(jiǎn)稱“邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀”）于2017年7月上市，可提供靜脈全血、微量全血、預(yù)稀釋全血及體液4種檢測(cè)模式，大大地提高了血細(xì)胞檢測(cè)的效率與質(zhì)量。但該儀器的性能是否能夠滿足臨床檢測(cè)的需求，仍需要進(jìn)一步進(jìn)行合理的驗(yàn)證，方能保證檢測(cè)結(jié)果的穩(wěn)定與可信。本文參照國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（International Council for Standardization in Haematology，ICSH）公布的評(píng)價(jià)方案以及中華人民共和國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)WS/T 406—2012《臨床血液學(xué)檢驗(yàn)常規(guī)項(xiàng)目分析質(zhì)量要求》對(duì)該儀器的精密度、線性范圍、攜帶污染率、可比性等指標(biāo)進(jìn)行評(píng)價(jià)，評(píng)價(jià)項(xiàng)目包括白細(xì)胞計(jì)數(shù)（WBC）、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（RBC）、血紅蛋白濃度（HGB）、紅細(xì)胞比積（HCT）、平均紅細(xì)胞體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）以及血小板計(jì)數(shù)（PLT）。

1 資料與方法

1.1 儀器與試劑

邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀和配套校準(zhǔn)品、質(zhì)控品及試劑，Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀和配套校準(zhǔn)品、質(zhì)控品及試劑，各校準(zhǔn)品、質(zhì)控品及試劑均在有效期內(nèi)。

1.2 方法

1.2.1 儀器校準(zhǔn)

按照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)WS/T 406—2012邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，保證儀器性能能夠達(dá)到廠家聲明要求。

1.2.2 本底計(jì)數(shù)

用稀釋液作為樣本在邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀上連續(xù)檢測(cè)3次，3次檢測(cè)結(jié)果的最大值應(yīng)在儀器標(biāo)準(zhǔn)的允許范圍內(nèi)，詳見表1。

表1 邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀本底計(jì)數(shù)允許范圍

1.2.3 攜帶污染率驗(yàn)證

取高濃度血液樣本，混合均勻后連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為H1、H2、H3；再使用稀釋液作為低值樣本，

按廠家聲明要求，各指標(biāo)攜帶污染率允許范圍均為≤1.00%。

1.2.4 批內(nèi)精密度驗(yàn)證

取當(dāng)日實(shí)驗(yàn)室內(nèi)EDTA-K2抗凝的新鮮全血連續(xù)測(cè)定11次，去掉第1次結(jié)果，計(jì)算累積變異系數(shù)（coefficient of variation，CV）與標(biāo)準(zhǔn)差s。CV應(yīng)滿足表2中儀器標(biāo)準(zhǔn)的要求。連續(xù)測(cè)定3次，測(cè)定值分別為L(zhǎng)1、L2、L3。其中高值樣本要求 WBC＞90×109/L、RBC＞6.2×1012/L、HGB＞220 g/L、PLT＞900×109/L，低值樣本要求 WBC＜3×109/L、RBC＜1.5×1012/L、HGB＜50 g/L、PLT＜30×109/L。按下述公式計(jì)算攜帶污染率[1]：

表2 邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀批內(nèi)精密度CV允許范圍%

1.2.5 批間精密度驗(yàn)證

取3個(gè)水平的質(zhì)控品，每天測(cè)定4次，每次檢測(cè)之間間隔1 h，連續(xù)檢測(cè)5 d，剔除離群點(diǎn)，一共收集20個(gè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)算CV與s。CV應(yīng)滿足WBC≤6.00%、RBC≤2.50%、HGB≤2.00%、HCT≤4.00%、PLT≤8.00%、MCV≤2.50%、MCH≤2.50%、MCHC≤3.00%。

1.2.6 不同吸樣模式間比對(duì)

選取5個(gè)新鮮樣本，濃度覆蓋生物參考區(qū)間，在手動(dòng)和自動(dòng)模式各檢測(cè)2次，計(jì)算自動(dòng)模式和手動(dòng)模式之間檢測(cè)均值的偏差百分比。偏差應(yīng)滿足WBC≤5.00%、RBC≤2.00%、HGB≤2.00%、HCT≤3.00%、PLT≤7.00%、MCV≤3.00%、MCH≤3.00%、MCHC≤3.00%。

1.2.7 正確度驗(yàn)證

使用10份正常范圍新鮮血標(biāo)本，每份樣本檢測(cè)2次，計(jì)算20次檢測(cè)結(jié)果的均值，以實(shí)驗(yàn)室內(nèi)正常運(yùn)行且參加室間質(zhì)評(píng)成績(jī)優(yōu)秀的Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀測(cè)定的均值為標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算偏差。偏差應(yīng)滿足WBC≤5.00%、RBC≤2.00%、HGB≤2.50%、HCT≤2.50%、PLT≤6.00%、MCV≤3.00%、MCH≤3.00%、MCHC≤3.00%。

1.2.8 線性范圍驗(yàn)證

選取1份接近預(yù)期上限的高值全血樣本（H），分別按 100%、80%、60%、40%、20%、10%的比例進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度重復(fù)測(cè)定3次，計(jì)算均值，作散點(diǎn)圖，按CLSI EP06-A的方法[2]求得各參數(shù)不同稀釋度測(cè)定值與期望值之間的相關(guān)系數(shù)（r≥0.975或r2≥0.95）、斜率a（1±0.05）和截距b。

1.2.9 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果可比性驗(yàn)證

準(zhǔn)備20份新鮮血樣本，濃度覆蓋生物參考區(qū)間，整個(gè)實(shí)驗(yàn)在4 h內(nèi)完成。以Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀為基準(zhǔn)，分別在Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀和邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀上檢測(cè)這20份樣本，其中邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀重復(fù)檢測(cè)2次，計(jì)算與基準(zhǔn)儀器之間的結(jié)果偏差百分比。16份以上（超過(guò)80%）樣本的偏差應(yīng)滿足WBC≤7.50%、RBC≤3.00%、HGB≤3.50%、HCT≤3.50%、PLT≤12.50%、MCV≤3.50%、MCH≤3.50%、MCHC≤7.50%。

1.3 統(tǒng)計(jì)分析

所有數(shù)據(jù)錄入Excel軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 儀器校準(zhǔn)

按照WS/T 406—2012對(duì)邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀進(jìn)行校準(zhǔn)，結(jié)果顯示各項(xiàng)性能滿足儀器宣稱要求，可以正常使用。

2.2 本底計(jì)數(shù)

邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀本底計(jì)數(shù)結(jié)果均為0，滿足廠家聲明要求。

2.3 攜帶污染率

根據(jù)計(jì)算公式計(jì)算攜帶污染率，將結(jié)果與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行比較，結(jié)果見表3。邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀攜帶污染率均小于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求范圍，能夠滿足臨床日常檢測(cè)工作的要求。

表3 邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀攜帶污染率結(jié)果

2.4 批內(nèi)精密度

將10次連續(xù)檢測(cè)結(jié)果的CV值與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行對(duì)比，具體結(jié)果見表4。邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀的批內(nèi)精密度能夠滿足行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求，同時(shí)也能夠完全滿足生產(chǎn)廠家聲明的比行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)更為嚴(yán)格的儀器標(biāo)準(zhǔn)。

表4 邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀批內(nèi)精密度結(jié)果

2.5 批間精密度

將高、中、低值質(zhì)控品連續(xù)檢測(cè)20次所累積的CV值與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果見表5，顯示邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀的批間精密度能夠滿足行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)所規(guī)定的要求。

表5 邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀批間精密度結(jié)果

2.6 不同吸樣模式間比對(duì)

將5個(gè)樣本在自動(dòng)與手動(dòng)2種模式間檢測(cè)的平均偏差與行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果見表6，顯示邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀自動(dòng)進(jìn)樣與手動(dòng)進(jìn)樣2種模式間的偏差均能滿足行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求。

2.7 正確度

采用與現(xiàn)有儀器比較偏差的方式進(jìn)行正確度驗(yàn)證，結(jié)果見表7，顯示邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀的正確度偏差在行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的可接受范圍內(nèi)。

2.8 線性范圍

經(jīng)計(jì)算a值均在1±0.05 以內(nèi)，r2均＞0.95，線性范圍驗(yàn)證符合性能要求，詳見表8。

2.9 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果可比性

采用20份臨床樣本同時(shí)在邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀與Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀上進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果見表9，顯示邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀與Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀檢測(cè)結(jié)果間具有良好的可比性。

3 討論

邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀是邁瑞集團(tuán)最新研發(fā)上市的一款功能全面的全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀，相較于同品牌的其他儀器具有鮮明的特點(diǎn)[3-6]：可提供血液檢測(cè)參數(shù)37項(xiàng)、體液檢測(cè)參數(shù)7項(xiàng)、血液研究參數(shù)29項(xiàng)、體液研究參數(shù)11項(xiàng)；使用微量全血模式，僅需30 μl樣本即可獲得全血細(xì)胞計(jì)數(shù)、白細(xì)胞分類、有核細(xì)胞計(jì)數(shù)、網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)等多項(xiàng)結(jié)果；檢測(cè)速度可達(dá)到110次測(cè)試/h，廠家聲明的儀器各項(xiàng)性能優(yōu)于既往已見性能報(bào)道的同類儀器[7]，為門診檢驗(yàn)的血細(xì)胞分析提供了良好的支持。

表6 邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀不同吸樣模式間比對(duì)結(jié)果（以手動(dòng)模式為靶值）

表7 邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀正確度結(jié)果

表8 邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀線性范圍驗(yàn)證結(jié)果

表9 邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀實(shí)驗(yàn)室內(nèi)結(jié)果可比性驗(yàn)證結(jié)果（以Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀為基準(zhǔn)）%

本文按照ISO15189實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可的需求，參照ICSH公布的評(píng)價(jià)方案以及WS/T 406—2012對(duì)邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀進(jìn)行了全面的性能評(píng)價(jià)[8]。評(píng)價(jià)結(jié)果顯示，該儀器本底計(jì)數(shù)低、攜帶污染率小、批內(nèi)及批間精密度良好，尤其是本底計(jì)數(shù)與批內(nèi)精密度，均遠(yuǎn)小于行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的要求。線性驗(yàn)證時(shí)采用邁瑞公司提供的濃縮細(xì)胞線性物，故驗(yàn)證的線性范圍較寬，基本達(dá)到儀器聲明的檢測(cè)范圍。筆者同時(shí)采用高值臨床樣本的方式驗(yàn)證儀器的線性，同樣驗(yàn)證了儀器能夠滿足日常使用所需的線性范圍。邁瑞B(yǎng)C-6000Plus血細(xì)胞分析儀雖然可以使用手動(dòng)進(jìn)樣與自動(dòng)進(jìn)樣2種模式，但是本質(zhì)上2種模式使用的是同一根吸樣針及分配通道，故不同吸樣模式間的比對(duì)其實(shí)僅能體現(xiàn)操作者混勻手法的差異。另外值得注意的是，邁瑞B(yǎng)C-6000plus血細(xì)胞分析儀與本實(shí)驗(yàn)室正常使用的Sysmex XE-5000血細(xì)胞分析儀的比對(duì)中出現(xiàn)了部分項(xiàng)目比對(duì)偏差較大的情況，尤其是WBC與PLT中的低值樣本部分較易出現(xiàn)這種情況。HGB與MCV出現(xiàn)了幾乎全部偏于一側(cè)的情況，需要在日常工作中繼續(xù)注意。雖然該儀器能夠檢測(cè)體液樣本，但本實(shí)驗(yàn)中未能對(duì)這一部分進(jìn)行完善的性能評(píng)價(jià)，日常工作中如需采用該模式檢測(cè)樣本可以參考馬科等[9]對(duì)血細(xì)胞分析儀進(jìn)行體液檢測(cè)模式性能評(píng)價(jià)的經(jīng)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證。

綜上所述，邁瑞B(yǎng)C-6000 Plus血細(xì)胞分析儀具有精密度高、攜帶污染率低、檢測(cè)范圍寬、正確度好、吸樣量少等特點(diǎn)，同時(shí)該儀器還可涵蓋靜脈全血檢測(cè)與手指末梢血檢測(cè)，兼具手動(dòng)進(jìn)樣模式與自動(dòng)進(jìn)樣模式，是一款性能良好，尤其適用于門急診檢驗(yàn)的新一代全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀。