闞惠娟 ，薛雪 ，虞健

1.江蘇省蘇州市立醫(yī)院東區(qū)兒科，江蘇蘇州 215001;2.江蘇省蘇州市立醫(yī)院東區(qū)檢驗(yàn)科，江蘇蘇州 215001

Epstein-Barr病毒（EBV）是1964年由 EpsteinBarr等人在一個(gè)非洲患者體內(nèi)發(fā)現(xiàn)的是，屬于γ亞科皰疹病毒[1]。EBV主要經(jīng)過(guò)唾液傳播，感染后可長(zhǎng)期潛伏于體內(nèi)，一旦活化，可導(dǎo)致全身幾乎所有臟器損害。目前臨床上用于EBV的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法主要有病毒培養(yǎng)、免疫學(xué)檢測(cè)、EBV-DNA載量檢測(cè)三大類。虞敏等認(rèn)為EBV-DNA載量檢測(cè)對(duì)小兒EB病毒感染是否處于活動(dòng)期重要意義[2]。該文采用EBV-DNA載量檢測(cè)方法分析2014年11月—2017年5月在蘇州市立醫(yī)院東區(qū)住院患者1306例進(jìn)行臨床分析。報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取在蘇州市立醫(yī)院東區(qū)的1306例住院患者進(jìn)行EBV-DNA檢測(cè)，該研究經(jīng)過(guò)醫(yī)院倫理委員會(huì)討論同意，并經(jīng)患者家屬簽字同意。這些患者臨床表現(xiàn)有：發(fā)熱、扁桃體腫大、淋巴結(jié)腫大、肝脾腫大、肝功能異常及鼻咽部腫瘤、不明原因反復(fù)感染的患者。

1.2 EBV-DNA載量的檢測(cè)方法

采用湖南圣湘生物科技有限公司的EB病毒核酸定量檢測(cè)試劑盒，取外周血樣本，使用同公司的全血基因組提取試劑處理，得到DNA作為待測(cè)樣本，提取血清EBVDNA具體按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行，將待測(cè)樣本嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，檢驗(yàn)結(jié)果的參考區(qū)間見(jiàn)試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.3 統(tǒng)計(jì)方法

統(tǒng)計(jì)方法采用Excel建立數(shù)據(jù)庫(kù)，運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件IBM SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料采用[n（%）]表示，行χ2檢驗(yàn)，各組間率的比較采用行×列字χ2檢驗(yàn)，當(dāng)總樣本量n≥40且所有的單元格的理論頻數(shù) （期望頻數(shù)）T≥5時(shí)，采用 Pearsonχ2檢驗(yàn)，根據(jù) person χ2的結(jié)果，當(dāng)總樣本量n≥40但有1≤T＜5時(shí)，采用連續(xù)性校正χ2檢驗(yàn)，當(dāng)總樣本量n＜40，或最小理論頻數(shù)T＜1，或檢驗(yàn)所得P值接近于檢驗(yàn)水準(zhǔn)α，采用Fisher確切概率法檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同年齡段EBV感染情況

成人與兒童均可感染EBV，在檢測(cè)的1306例住院患者中共檢出407例EBV-DNA陽(yáng)性患者，整體檢出率31.16%（表1）。其中男性和女性EBV感染率陽(yáng)性率分別為32.19%，29.88%（表2），差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。0～＜14歲兒童、14歲以上EBV-DNA陽(yáng)性率分別318例（24.35%）和89例（6.81%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。在14歲以下兒童中，各年齡組：0～1歲、1～3歲、3～6歲，6～14歲，EBV-DNA陽(yáng)性率分別為13.51% ，27.4% ，38.35%和32.87%。其中男性感染陽(yáng)性率分別為17.24%、33.94%、37.33%、33.78%、，女性感染率分別為0.00%、28.49%、39.49%、31.91%（表3），運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件IBM SPSS statistic 19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，不同年齡患者EBV感染率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），不同性別兒童EBV感染率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

表1 2014年11月—2017年5月期間不同年齡段EBV感染的分布情況

表2 2014年11月—2017年5月期間不同性別EBV感染的分布情況

表3 2014年11月—2017年5月期間14歲以下不同年齡段EBV感染的分布情況

不同性別EBV感染陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P=0.4，＞0.05。

2.2 EBV病毒所致疾病臨床表現(xiàn)

1306例住院患兒者中共檢出的407例EBV-DNA陽(yáng)性患者，其中，14歲以上患者89例，14歲以下患者318例，其臨床診斷分布情況見(jiàn)分別見(jiàn)表4、表5

表4 14歲以上EBV-DNA陽(yáng)性者臨床診斷分布

表5 14歲以下EBV-DNA陽(yáng)性者臨床診斷分布

3 討論

EBV，又稱人類皰疹病毒4型，類似于其他皰疹病毒，EBV基因組為雙鏈線性DNA分子，EBV的感染周期包括初始感染和潛伏感染。初始感染階段促進(jìn)了EBV的傳播并引起原發(fā)感染，也對(duì)潛伏感染的建立起到了一定的作用[3]。EBV通過(guò)gp 350/200與B細(xì)胞表面的CR2相結(jié)合而進(jìn)入B細(xì)胞，并誘導(dǎo)其分化為記憶性B細(xì)胞，形成長(zhǎng)期潛伏感染，EB病毒在潛伏感染在B細(xì)胞中，EBV很少發(fā)生復(fù)制，從而逃避了機(jī)體的免疫監(jiān)視，并且還可以誘導(dǎo)B細(xì)胞分化為類淋巴母細(xì)胞系細(xì)胞[4]。

活動(dòng)期的EBV可破壞淋巴細(xì)胞，進(jìn)入血液循環(huán)，絕大多數(shù)的血漿游離DNA片段大小為82～181kb，因此可采用PCR檢測(cè)血漿中游離DNA的含量，通過(guò)定量分析可以準(zhǔn)確測(cè)定出病毒載量，從而反映體內(nèi)EBV復(fù)制情況。由于血漿EBV-DNA僅存在于病毒血癥期，EBV感染2周后開(kāi)始迅速下降，因此早期檢測(cè)血清EBV-DNA可提高EBV現(xiàn)癥感染，并對(duì)EBV感染是否處于活動(dòng)期有重要指導(dǎo)意義[5]。該研究提取外周血全血中EBV-DNA進(jìn)行定量檢測(cè)，共檢出EBV-DNA陽(yáng)性407例，陽(yáng)性率31%，其中男性243例，女性173例，男：女約1.3左右，不同性別EBVDNA陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。

該次研究的1306例患者中，發(fā)現(xiàn)所有年齡段均可感染EB病毒，故而EBV人群中普遍存在，有研究表明90%的健康人可終身攜帶[6]。該次研究中0～14歲兒童占78%，考慮與兒童免疫力低下，從而易感染EBV有關(guān)[7]。其中0～1歲、1～3歲、3～6歲，6～14歲，EBV-DNA 陽(yáng)性率分別為13.51% ，27.4% ，38.35% 和32.87%，1～6歲兒童 EBV-DNA陽(yáng)性率在14歲以下兒童中占大部分，約有68%左右，由此可見(jiàn)，1～6歲兒童對(duì)EBV尤其易感。其原因可能與1～6歲期間，兒童免疫系統(tǒng)逐步發(fā)育，但尚未發(fā)育成熟，其免疫功能容易受到病毒侵襲有關(guān)。該次研究結(jié)果與王春遠(yuǎn)、張勝等的研究相符[8-9]，而朱嬋紅等[10]分析335例外周血EBVDNA檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，0～3歲兒童EBV感染陽(yáng)性率77%，與該研究略有差異，考慮可能與不同區(qū)域、不同人群有關(guān)。

該次研究中共檢出的407例EBV-DNA陽(yáng)性患者，其中14歲以上89例，14歲以下318例，不同年齡段患者感染EBV后的臨床表現(xiàn)各有不同。14歲以下患者感染EBV后臨床表現(xiàn)有：呼吸系統(tǒng)疾病占88%，傳染性單核細(xì)胞增多癥9.7%，其他疾病2.3%，其中合并有支原體感染136例（43%），見(jiàn)表5。呼吸系統(tǒng)疾病包括支氣管肺炎、上呼吸道感染、扁桃體炎、急性支氣管炎，合并有肝功能異常4%，合并有血液系統(tǒng)改變2%。由此可見(jiàn)兒童EBV感染后主要引起呼吸道感染，且容易合并支原體感染。有研究發(fā)現(xiàn)，EBV合并支原體感染可加重肺內(nèi)外損傷，且EBV拷貝數(shù)高低是影響MP混合EBV感染后肺炎肺內(nèi)外損傷程度的重要原因[11]。14歲以上EBV-DNA陽(yáng)性患者臨床表現(xiàn)以腫瘤為主（表4），其中鼻咽癌占79%。EBV是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)能引起腫瘤的疾病毒[12]，目前EBV-DNA已成為鼻咽癌重要腫瘤標(biāo)志物，在鼻咽癌的診斷、分期、治療、預(yù)后中有重要指導(dǎo)意義[13]。由于EBV具有潛伏感染方式，14歲以下兒童期初發(fā)感染患者，在EBV活動(dòng)期后一部分被清除，另有一部分將進(jìn)入潛伏感染狀態(tài)，成長(zhǎng)過(guò)程中，在自身機(jī)體的免疫力低下或者環(huán)境改變等情況下，潛伏感染的EBV會(huì)被大量激活，再次進(jìn)入裂解復(fù)制階段，引起某些疾病，如傳染性單核細(xì)胞增多癥、慢性EBV感染(CAEBV)、嗜血細(xì)胞綜合征（HLH）及腫瘤性疾病。因此兒童期EBV感染需引起重視并加強(qiáng)隨訪。