段 超 賈崢嶸 楊 杰 陳 麗 薛變麗

（1山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所，山西運城044000；2山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院食用菌研究所，山西太原030031）

香菇（Lentinus edodes）是最著名的食用兼藥用真菌之一，也是我國重要的食用菌出口產(chǎn)品，在民間素有“山珍”之稱[1]。菌種生產(chǎn)作為食用菌栽培的首道工序，關(guān)系著食用菌生產(chǎn)的成敗[2]。目前，食用菌菌種生產(chǎn)中常用棉籽殼、木屑、谷粒及木條為原料制作栽培種[3]。谷粒菌種包括小麥菌種、高粱菌種、玉米菌種等。宋瑩等對賓王菇麥粒菌種做了試驗[4]。高粱菌種比傳統(tǒng)的棉籽殼木屑菌種制種工藝簡單、發(fā)菌快，能很大程度縮短香菇菌種生產(chǎn)時間。然而，關(guān)于香菇高粱菌種的研究較少且生產(chǎn)工藝不成熟。為此，筆者采用正交試驗對香菇高粱菌種的生產(chǎn)工藝進行優(yōu)化。

1 材料與方法

1.1 供試香菇菌株

供試菌株為香菇慶科212，由山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所提供。

1.2 培養(yǎng)基制作

選擇新鮮無霉變的高粱種子，根據(jù)配方（高粱88%，麩皮10%，碳酸氫鈣1%，生石灰1%）計算需要用的各原料。將干高粱浸泡到溶有生石灰的自來水中，高粱浸泡1～2 d后將其從水中撈出瀝干，按配方將麩皮、碳酸氫鈣與高粱混合均勻，分裝入17 cm×23 cm袋中，每袋裝料0.45 kg左右。培養(yǎng)料裝袋后快速高壓滅菌2 h，滅菌完、冷卻后在無菌環(huán)境下對其接種。

1.3 試驗設(shè)計

單因素試驗：試驗1設(shè)置3種浸泡時間為24 h，48 h，72 h，浸泡溫度設(shè)置為25℃，浸泡液為3%石灰水溶液。

試驗2 為了避免開水煮高粱不好控制時間，同時為了降低能耗。設(shè)置3種浸泡溫度為15℃，25℃，35℃，45℃，浸泡時間設(shè)置為48 h，浸泡液為3%石灰水溶液。

試驗3 設(shè)置4種浸泡液生石灰濃度為1%，3%，5%，7%，浸泡時間設(shè)置為48 h，浸泡溫度設(shè)置為25℃。

上述三個試驗每個處理制作100袋。

試驗4 正交試驗設(shè)計

在單因素試驗的基礎(chǔ)上，對浸泡時間、浸泡溫度和浸泡液生石灰濃度進行3因素3水平L9（33）正交試驗。每個處理設(shè)置3個重復(fù)，每個重復(fù)制作100袋，試驗因素及水平見表1。

表1 正交試驗設(shè)計

1.4 觀察內(nèi)容及方法

觀察并記錄菌絲長勢、菌絲顏色、滿袋時間、污染袋數(shù)。按以下標(biāo)準(zhǔn)評價菌絲體菌絲長勢：+++，表示菌絲濃密；++，表示菌絲一般；+，表示菌絲稀疏。菌絲顏色分為濃白、白和較白。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同浸泡時間的高粱制作香菇菌種結(jié)果

由表2可知，浸泡時間為48 h的高粱培養(yǎng)基菌絲長勢濃密，滿袋時間最短，但有少量的污染袋。浸泡時間為24 h，滿袋時間較浸泡時間48 h稍長。浸泡時間為72 h，菌絲長勢弱，滿袋時間長，污染袋數(shù)多?？梢娭谱飨愎礁吡痪N，高粱適宜的浸泡時間為24～48 h。

圖1 生長中的香菇高粱菌種

圖2 長滿的香菇高粱菌種

圖3 轉(zhuǎn)接高粱菌種（左）與棉籽殼菌種（右）栽培種長勢比較

表2 不同浸泡時間浸泡高粱制香菇菌種結(jié)果

2.2 不同浸泡溫度浸泡高粱制作香菇菌種結(jié)果

如表3所示，浸泡溫度為15℃和25℃時，高粱菌種菌絲長勢強，濃密，滿袋時間短。浸泡溫度為45℃時，菌絲長勢弱，稀疏，滿袋時間長，污染嚴(yán)重。有此可見，香菇高粱菌種高粱適宜的浸泡溫度為15～25℃。

表3 不同浸泡溫度浸泡高粱制香菇菌種結(jié)果

2.3 不同生石灰濃度浸泡液浸泡高粱制作香菇菌種結(jié)果

添加不同質(zhì)量濃度的生石灰對培養(yǎng)基滅菌前后的pH值均有影響，不同的pH值直接影響菌絲的生長情況[5]。如表4所示，生石灰濃度為1%～3%時，高粱菌種菌絲長勢強，濃密，滿袋時間短，污染袋數(shù)少。生石灰濃度為7%時，菌絲長不滿菌袋，污染嚴(yán)重。有此可見，制作香菇高粱菌種，高粱浸泡液適宜的生石灰濃度為1%～3%。

表4 不同生石灰濃度浸泡液浸泡高粱制香菇菌種的結(jié)果

表5 正交試驗結(jié)果分析

2.4 正交試驗結(jié)果

通過單因素試驗中選出的最佳水平：浸泡時間為 24～48 h，浸泡溫度為 15～25℃，生石灰濃度為1%～3%。在此基礎(chǔ)上，對浸泡時間、浸泡溫度和生石灰濃度進行三因素三水平的正交試驗。每個處理重復(fù)3次。正交試驗結(jié)果見表5。

這三個因素中，生石灰濃度為最主要的影響因素，浸泡時間次之，浸泡溫度為影響最小的因子。

根據(jù)正交試驗所得的香菇高粱菌種生產(chǎn)的最佳條件為A2B3C1。說明在制作香菇高粱菌種時，高粱較為適宜處理方式為：高粱的浸泡時間為36 h，浸泡溫度為25℃，生石灰濃度為1%。浸泡時間過短會導(dǎo)致高粱心泡不透，且造成滅菌的時候滅菌不徹底，接種后香菇菌絲長勢不強，且容易感染雜菌。浸泡溫度在15～25℃差別不大，在實際生產(chǎn)過程中視情況選用室溫即可。浸泡液生石灰濃度過高，會導(dǎo)致高粱堿性太強，抑制香菇菌絲的生長，并導(dǎo)致污染率上升。

3 小結(jié)

香菇菌種一般采用棉籽殼或木屑為主要原料，制作的菌種接種時不易散開，在生產(chǎn)中需要更多的原種。選用高粱制作原種，可以減少每袋接種量，且高粱比小麥、棉籽殼、玉米顆粒小，易散開，萌發(fā)點多，可縮短發(fā)菌時間。

培養(yǎng)料含水量是影響菌絲生長和出菇的重要因素，含水量適宜才能保證菌種質(zhì)量[6]。然而，高粱菌種在制作過程中如果浸泡制不透或過度而破裂，導(dǎo)致培養(yǎng)基含水量不足或過多，含水量不足會導(dǎo)致滅菌不透污染上升，含水量過多導(dǎo)致培養(yǎng)基呈糊狀，影響透氣和菌絲生長[7]。

試驗結(jié)果對于高粱產(chǎn)地利用高粱制作香菇菌種，具有一定的參考作用。