陳慧婷 ，徐翠 ，黎家祥 ，左明開(kāi) ，陳良榮 ，黃冬艷 ，花象柏

（1.南昌珠安生物技術(shù)有限公司，江西 南昌 330013；2.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院）

免疫是各類型豬場(chǎng)防控豬病的主要手段。對(duì)免疫豬群進(jìn)行血清抗體監(jiān)測(cè)可了解免疫的效果，為調(diào)整與完善免疫程序提供依據(jù)[1]?，F(xiàn)將兩個(gè)非自然年度檢測(cè)結(jié)果報(bào)告如下，供業(yè)界參考。

1 血樣來(lái)源和檢測(cè)方法

1.1 血樣來(lái)源

本報(bào)告檢測(cè)時(shí)間持續(xù)兩年，結(jié)果按兩個(gè)非自然年度整理。以2016年7月至2017年6月作為第一年度，2017年7月至2018年6月作為第二個(gè)年度。全部血樣均來(lái)自江西省各類型豬場(chǎng)，一個(gè)豬場(chǎng)送一次血樣來(lái)檢測(cè)稱為一個(gè)場(chǎng)次。兩個(gè)年度共收到177場(chǎng)次6 890份血樣。每個(gè)年度，豬藍(lán)耳病毒（PRRSV）、豬瘟病毒（CSFV）、豬偽狂犬病毒（PRV）保護(hù)（gB）與野毒（gE）、豬 O型口蹄疫病毒（FMDVO）、豬圓環(huán)病毒2型（PCV-2）、豬日本乙型腦炎病毒（JEV）和豬細(xì)小病毒病病毒（PPV）等6種豬病病原抗體檢測(cè)血樣的場(chǎng)次數(shù)和血樣份數(shù)見(jiàn)表1。

1.2 主要儀器和試劑盒

表1 每個(gè)年度各種豬病檢測(cè)的場(chǎng)次數(shù)和血樣份數(shù)

酶標(biāo)儀：Thermo MK3型酶標(biāo)儀，培養(yǎng)箱：Blue part LRH-150型生化培養(yǎng)箱。豬瘟、豬藍(lán)耳病、豬偽狂犬病gB和gE等抗體檢測(cè)ELISA試劑盒（北京愛(ài)德士元亨生物科技有限公司）；豬O型口蹄疫、豬日本乙型腦炎及豬細(xì)小病毒病等抗體檢測(cè)ELISA試劑盒（武漢科前生物技術(shù)有限公司提供）；豬圓環(huán)病毒2型抗體檢測(cè)ELISA試劑盒，第一年度采用北京世紀(jì)元亨公司提供的，第二年度采用武漢科前提供的。

1.3 檢測(cè)方法和判斷標(biāo)準(zhǔn)

所有抗體檢測(cè)方法均按相應(yīng)試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作，各種抗體檢測(cè)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)如表2。

2 結(jié)果與分析

由表3可知豬藍(lán)耳病陽(yáng)性場(chǎng)第一年度與第二年度的抗體陽(yáng)性率分別為84.70%和84.29%，均已達(dá)到國(guó)家要求的抗體陽(yáng)性合格率大于70%的免疫水平。表明各類型豬場(chǎng)豬藍(lán)耳病免疫水平較好，對(duì)藍(lán)耳病的防控意識(shí)較強(qiáng)。藍(lán)耳病陰性場(chǎng)第一年度與第二年度的抗體陽(yáng)性率分別為0.33%和1.17%，這是一個(gè)陰性場(chǎng)在2017年3～10月發(fā)生轉(zhuǎn)陽(yáng)造成的。最后該場(chǎng)不得不應(yīng)用疫苗免疫以控制疫情，從而轉(zhuǎn)為陽(yáng)性場(chǎng)。豬瘟抗體第一年度與第二年度的陽(yáng)性率分別為66.94%和82.49%，第二個(gè)年度抗體陽(yáng)性率較第一個(gè)年度上升15.55%，有明顯提高。豬偽狂犬病gB抗體第一年度與第二年度的陽(yáng)性率分別為94.39%和93.33%，兩個(gè)年度的陽(yáng)性率均處于較高水平。豬偽狂犬病gE抗體第一年度與第二年度的陽(yáng)性率分別為9.27%和16.67%，第二年度的陽(yáng)性率比第一年度明顯上升，存在野毒不穩(wěn)定的情況。豬O型口蹄疫抗體第一年度與第二年度的陽(yáng)性率分別為63.22%和81.43%，免疫水平提高明顯。豬圓環(huán)病毒2型抗體第一年度與第二年度的陽(yáng)性率分別為96.98%和80.36%。豬乙型腦炎抗體和豬細(xì)小病毒病抗體第一年度的陽(yáng)性率分別為96.04%和63.35%，第二年度均未收到檢測(cè)樣品。

3 小結(jié)與討論

表2 7種豬病抗體檢測(cè)結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)

表3 每個(gè)年度各種豬病抗體檢測(cè)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

3.1 本報(bào)告在藍(lán)耳病疫苗免疫場(chǎng)檢測(cè)藍(lán)耳病抗體，用的是IDEXX試劑盒。該試劑盒以核衣殼蛋白（N蛋白）為主要包被抗原，檢測(cè)血清中針對(duì)N蛋白的抗體[2]。用藍(lán)耳病弱毒疫苗接種豬體后，8～14d即可產(chǎn)生這種抗體，并持續(xù)2個(gè)月。其陽(yáng)性率的高低顯示疫苗接種是否成功。本報(bào)告檢測(cè)的藍(lán)耳病抗體陽(yáng)性率第一年度為84.70%（1168/1379），第二個(gè)年度為84.29%（1191/1413），兩者均超過(guò)國(guó)家曾經(jīng)對(duì)高致病性藍(lán)耳病強(qiáng)制免疫所要求的免疫合格率全年應(yīng)在70%以上的要求[3]。因此，這些豬場(chǎng)在抵御高致病性藍(lán)耳病的發(fā)生與流行是有足夠保護(hù)力的。但是，這些場(chǎng)仍不能放松生物安全措施要求，特別是引種，如果引進(jìn)了其他類型的藍(lán)耳病，還是有可能發(fā)生不同程度藍(lán)耳病流行的。

由藍(lán)耳病陰性場(chǎng)送檢的血樣，第一年度為1818份，檢出6頭陽(yáng)性；第二年度為682份，檢出8頭陽(yáng)性。這些檢出的14頭藍(lán)耳病血清抗體轉(zhuǎn)陽(yáng)豬出現(xiàn)在2017年3～10月，是一個(gè)藍(lán)耳病陰性場(chǎng)藍(lán)耳病抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性的過(guò)程中出現(xiàn)的。該場(chǎng)藍(lán)耳病抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性的過(guò)程歷時(shí)8個(gè)月，前7個(gè)月發(fā)展很慢，僅個(gè)別出現(xiàn)，最后1個(gè)月迅速發(fā)展，全群轉(zhuǎn)陽(yáng)，只好采取接種藍(lán)耳病疫苗的措施，從而由藍(lán)耳病陰性場(chǎng)轉(zhuǎn)為藍(lán)耳病免疫場(chǎng)，表明藍(lán)耳病陰性場(chǎng)維持的不易。

3.2 本報(bào)告豬瘟抗體陽(yáng)性率第一年度為66.94%(913/1364)，第二年度為 82.49%（1164/1411），后者超過(guò)了國(guó)家曾經(jīng)對(duì)該病強(qiáng)制免疫所要求的免疫合格率全年應(yīng)在70%以上的要求[3]。目前，豬瘟免疫各類型的豬場(chǎng)都非常重視，但疫苗的選擇和免疫程序的安排對(duì)豬瘟抗體陽(yáng)性率的影響仍很重要[4]。第一個(gè)年度在本公司檢測(cè)豬瘟抗體陽(yáng)性率較低的豬場(chǎng)，在采用本公司推薦的豬瘟免疫程序后，其陽(yáng)性率均有所提高，這是第二個(gè)年度豬瘟抗體陽(yáng)性率較第一個(gè)年度的數(shù)據(jù)高出15.55%的原因之一。

3.3 豬偽狂犬病的免疫也是各類型豬場(chǎng)非常重視的一種免疫。送檢的血樣有的只要求檢測(cè)gE（野毒）抗體，有的則要求gE和gB（保護(hù)）抗體同時(shí)檢測(cè)。在gE抗體方面，本報(bào)告第一年度的陽(yáng)性率為9.27%（246/2654），第二年度的為 16.67%（234/1404）；就單個(gè)豬場(chǎng)而言，有的gE抗體陽(yáng)性率高達(dá)100%，有的為零。我們發(fā)現(xiàn)gE抗體陽(yáng)性率較高的豬場(chǎng)，只要gB抗體也較高，都不出現(xiàn)豬偽狂犬病的臨床問(wèn)題。有報(bào)告認(rèn)為，應(yīng)用過(guò)豬偽狂犬病滅活疫苗的豬場(chǎng)，可檢測(cè)到gE抗體，但這種gE抗體，不代表是活的野毒的gE抗體[5]。江西省曾一度使用的HB-98株偽狂犬病疫苗，缺失TK和gG基因[6]，即不缺失gE基因。也就是說(shuō)該疫苗中的gE基因并不具有野毒gE的毒力，因此由其誘導(dǎo)產(chǎn)生的gE抗體并不代表是真正的野毒抗體。這是否是我們所檢測(cè)的gE抗體陽(yáng)性率高達(dá)40%以上都不存在豬偽狂犬病臨床問(wèn)題的原因，有待進(jìn)一步討論。

本報(bào)告所檢測(cè)的gB抗體，第一個(gè)年度的陽(yáng)性率為94.39%（1413/1497），第二年度的陽(yáng)性率為93.33%（756/810）。在這些豬場(chǎng)均看不到由偽狂犬病病毒經(jīng)典毒株或變異毒株所引起的臨床豬偽狂犬病，表明豬場(chǎng)用疫苗免疫預(yù)防豬偽狂犬病是成功的。

3.4 豬O型口蹄疫抗體的檢測(cè)第一個(gè)年度的陽(yáng)性率為 63.22%（349/552），低于何振華（2017）報(bào)道的該指標(biāo)的數(shù)據(jù)[7]；第二個(gè)年度的陽(yáng)性率為81.43%（228/280）。按國(guó)家對(duì)該病強(qiáng)制免疫所要求的免疫合格率全年應(yīng)為70%以上的要求[3]，第一個(gè)年度送檢的豬場(chǎng)大多數(shù)不合格。通過(guò)本公司技術(shù)服務(wù)人員幫他們調(diào)整免疫程序，使送檢的大多數(shù)豬場(chǎng)O型口蹄疫抗體的陽(yáng)性率都達(dá)到和超過(guò)了國(guó)家規(guī)定的水平，從而導(dǎo)致第二個(gè)年度的抗體陽(yáng)性率比第一年度的增加了18.21%。

3.5 豬圓環(huán)病毒病是一個(gè)主要危害商品豬生產(chǎn)的重要豬病，但由于圓環(huán)病毒疫苗的普遍使用，使本病在各類型豬場(chǎng)都得到了較好的控制，故送血樣要求作該項(xiàng)檢測(cè)的豬場(chǎng)較少。第一個(gè)年度圓環(huán)病毒抗體檢測(cè)的陽(yáng)性率為96.98%（193/199），第二個(gè)年度該指標(biāo)的陽(yáng)性率為80.36%（135/168），這與郭紫?。?018）報(bào)告的該指標(biāo)的結(jié)果相近[8]。豬日本乙型腦炎和豬細(xì)小病毒病等兩種豬病的抗體檢測(cè)都是在母豬出現(xiàn)繁殖障礙的豬場(chǎng)送母豬血樣來(lái)檢測(cè)的。第一年度豬乙型腦炎抗體檢測(cè)的陽(yáng)性率為96.04%（97/101），表明該病的預(yù)防到位，病原檢測(cè)也證實(shí)了母豬的繁殖障礙不是乙腦引起。第一個(gè)年度檢測(cè)豬細(xì)小病毒病抗體陽(yáng)性率為63.35%（121/191），其陽(yáng)性率較低很可能是豬場(chǎng)對(duì)本病的免疫多數(shù)只對(duì)后備母豬進(jìn)行1～2次，經(jīng)產(chǎn)母豬則不免疫了而造成的。病原檢測(cè)也未證明母豬的繁殖障礙是由細(xì)小病毒引起，故豬場(chǎng)是否要加強(qiáng)豬細(xì)小病毒疫苗免疫，有待積累更多的檢測(cè)數(shù)據(jù)而定。