王 迪，王德軍，魏慶雙，王瑞琪，王瑜萌欣

(1．黑龍江中醫(yī)藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學附屬第一醫(yī)院，黑龍江 哈爾濱 150040)

流行病學調查顯示，全世界在已經采取預防措施的前提下每年脊髓損傷的發(fā)病率仍為10.4‰～83‰[1]。在發(fā)達國家，北美的發(fā)病率為20.7‰～83‰，歐洲的發(fā)病率為8‰～130.6‰，而在中國脊髓損傷的發(fā)病率也不容樂觀。加拿大自2000年至2010年治療脊髓損傷的年度成本是26.7億美元，而澳大利亞治療脊髓損傷的年度總成本約為20億澳元[1]。面對如此高的發(fā)病率及高額的醫(yī)療費用，電針療法作為一種安全有效且醫(yī)療費用較低的治療手段已經被廣泛認可和應用，但其作用機理尚未清晰。李曉寧等[2]研究發(fā)現(xiàn)，夾脊電針能夠改善神經細胞凋亡情況，亦有許多研究者在其實驗研究中發(fā)現(xiàn)電針具有抗凋亡的作用。本研究將近幾年電針治療脊髓損傷與抗凋亡機制相關的實驗研究進行歸納整理，旨在明確電針治療脊髓損傷的抗凋亡機制，指出現(xiàn)階段動物實驗的盲點，為日后研究提供新的方向及思路。

1 對含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase)的影響

Caspase家族是引起細胞凋亡的關鍵酶，可分為兩類：一類是凋亡的啟動者，包括Caspase-2、8及9，它們接受到信號后通過自剪接而激活，然后引起系列反應，激活凋亡的執(zhí)行者；另一類即為凋亡的執(zhí)行者，包括 Caspase-3、6和7，最終引起導致凋亡的連鎖反應[3]。

楊揚等[4]應用督脈電針治療SCI結果顯示，電針能夠下調脊髓組織中Caspase-3的表達，且選取脊髓損傷區(qū)域遠近端督脈4個穴位進行電針治療較選取近端督脈2個穴位更能有效地起到抗凋亡的作用；裴俐鋒等[5]研究結果表明在治療1～5周的各個時間點，電針能夠下調Caspase-3的表達，且與SCI組相比具有統(tǒng)計學差異；許明等[6]研究顯示,電針治療能夠提高膀胱容量及順應性，并且使脊髓組織中Caspase-3蛋白的含量下降，提示電針改善膀胱功能障礙的機制可能與Caspase-3蛋白表達下調有關；李曉寧等[7]電針“心俞”“脾俞”治療SCI大鼠，研究結果顯示治療14天后電針組Caspase-9表達量明顯低于模型組，提示電針能夠通過抑制其表達起到減少脊髓損傷的作用。

綜上可知，電針能夠通過調控Caspase起到抗凋亡的作用，促進肢體功能恢復，改善排尿障礙等問題。由于Caspase家族在細胞凋亡的傳導通路中有著舉足輕重的作用，因此后續(xù)大量實驗基于上述研究結果，進一步探究了電針治療脊髓損傷作用機制與傳導通路之間的關系，并證實了電針能夠調控傳導通路達到治療作用。

2 對X連鎖凋亡抑制蛋白(XIAP)的影響

XIAP作為IAP家族中的主要成員，能以BIR結構域的方式與Caspase相結合抑制其活性，切斷連鎖反應抑制細胞凋亡，也被稱之為凋亡抑制因子。宋萌等[8]研究顯示，電針能夠影響XIAPmRNA的表達，使其在脊髓損傷后的含量上調，提示電針可以通過提高XIAP的含量起到抗凋亡的作用。

3 對B細胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)及同源相關蛋白(Bax)的影響

Bcl-2高表達時能夠增強細胞的抗毒素性，抑制因細胞毒素引起的細胞死亡。Bcl-2是多種凋亡信號傳導通路的樞紐，與Bax之間也存在著相互制約的關系。當Bcl-2的含量相對Bax偏高時則可抑制細胞死亡，反之亦然。

衛(wèi)哲等[9]研究顯示夾脊電針能夠促進脊髓損傷小鼠運動功能的恢復，Bax的表達在治療3天至28天時較模型組明顯降低，而7天至28天時Bcl-2表達明顯升高，提示電針能夠促進Bcl-2表達、抑制Bax的表達；劉建敏等[10]實驗研究表明，電針治療使SCI大鼠脊髓組織中Bax的含量顯著降低，而Bcl-2基因與蛋白含量顯著提升，電針組凋亡細胞數(shù)量較模型組明顯減少；李長明等[11]應用電針“秩邊”“水道”治療脊髓損傷大鼠，利用TUNEL法檢測神經細胞的凋亡情況發(fā)現(xiàn)，電針組的凋亡細胞數(shù)量減少，且治療7天后Bax的陽性表達率減低，Bcl-2陽性表達率提升(P<0.01)；鮑秋影等[12]應用電針治療骶髓損傷引起的神經源性膀胱，實驗結果顯示治療7天后，電針組膀胱組織中Bcl-2表達較模型組高，Bax的陽性表達率較模型組低，說明電針可以通過抗凋亡作用對受損的膀胱逼尿肌組織進行保護。

4 對信號傳導通路的影響

4.1 細胞凋亡信號傳導通路

細胞凋亡信號傳導通路主要包括內源性及外源性兩種凋亡途徑。前者激活后可釋放大量促死亡因子，如Cytc、凋亡誘導因子、促死亡蛋白等；后者則可通過產生死亡受體促使細胞死亡，其中最為典型的死亡受體是Fas和TNFRs[13]。這兩種途徑最后都會通過啟動Caspase連鎖反應導致細胞凋亡。

許明等[14]研究發(fā)現(xiàn),電針能使神經源性膀胱大鼠脊髓組織中Cytc的含量下降，與模型組相比，電針組大鼠脊髓組織中凋亡蛋白酶活化因子-1及Caspase-9蛋白表達量均下調，電針組大鼠的膀胱壓力、容量及順應性都有改變。上述結果提示,電針能夠通過抑制內源性凋亡通路，使脊髓損傷引起的細胞凋亡數(shù)量減少，從而減輕神經細胞損害，提高膀胱容量、順應性，減少壓力，促進膀胱功能恢復，改善排尿功能障礙；王雙等[15]通過抑制TNFR/RIPK信號通路，觀察大鼠急性脊髓損傷后的病理變化及BBB行為學評分，結果發(fā)現(xiàn)該通路被抑制后能夠減輕脊髓損傷，改善行為學評分，有助于神經功能的恢復；楊波等[16]實驗結果顯示,電針組與模型組相比較，F(xiàn)as、TNFR-1表達水平均下降，具有統(tǒng)計學差異；時素華等[17]研究發(fā)現(xiàn)在損傷早期6 h至1天，F(xiàn)as表達較高，持續(xù)7天后表達逐漸減少，TNFR-1則在損傷早期6 h開始表達，7天時呈表達高峰。通過檢測脊髓組織中上述兩者的mRNA表達發(fā)現(xiàn)，電針組與模型組比較，mRNA的含量下調。

4.2 MAPK信號通路

MAPK信號傳導的主要特點是由細胞質逐級磷酸化后進入細胞核。在MAPK的亞家族中，p38MAPK、JNK及ERK信號通路起主導作用[18]。有研究表明，Raf/Ras/ERK信號通路能夠與細胞凋亡相關[19]；p38MAPK信號通路能介導凋亡等應激反應[19]；JNK信號通路具有促凋亡的作用[13]。

時素華等[20]探究督脈電針治療脊髓損傷作用機制時發(fā)現(xiàn)，電針治療7天后，電針組MEK2、p-ERK1的含量高于模型組，提示電針通過誘導MEK2、p-ERK1的高表達促進運動功能恢復；宋良玉[21]在探究不同電針對脊髓損傷修復的影響時亦發(fā)現(xiàn)，脈沖電針及音樂電針均能通過對Raf/Ras/ERK信號通路的調控，促使MEK2、p-ERK1的高表達；研究表明[19]，電針能夠下調p38MAPK的磷酸化水平，并且有效地抑制神經元的凋亡；呂威等[22]應用“大椎”“命門”治療SCI，研究結果顯示與正常組織比較，受損脊髓中p-c-Jun蛋白表達顯著升高，而電針組在術后3天、7天脊髓組織中p-c-Jun蛋白表達較模型組下調，且細胞凋亡數(shù)較其顯著減少，提示電針的抗凋亡作用可能與p-c-Jun蛋白表達下調相關。

由此可見，電針可以通過調控信號通路，影響通路上相關因子及蛋白的表達，起到抗細胞凋亡的作用，有助于損傷脊髓的功能恢復。

5 討論

通過對近幾年電針治療脊髓損傷與抗凋亡機制相關的實驗研究進行歸納整理發(fā)現(xiàn)，細胞凋亡的機制看似獨立存在，其實彼此之間存在樞紐，能夠相互制約影響。在死亡受體通路中，當前半胱氨酸天冬酶8被激活后，可將胞漿中的Bid切割，再次作用于線粒體上，引起內源性凋亡。另外，在神經營養(yǎng)因子傳導信號通路中，MEK1/2磷酸化后可形成p90RSK，它能夠促進Bcl-2的生成。由此可推斷，電針治療脊髓損傷的抗凋亡機制同樣也是相互滲透、相互關聯(lián)的。

目前，電針治療脊髓損傷的抗凋亡機制只停留在單一物質或者單一信號傳導通路上，但是電針治療SCI應該是一種網絡調控的過程，不同通路之間也都存在著交叉的位置，電針治療SCI應該是多靶點、多途徑、多層次的。雖然電針可以在多條通路上起到抗凋亡作用，但其在每條通路上發(fā)揮抗凋亡作用的程度應該是有差別的，因此今后可以在選取相同治療方案的前提下，嘗試切斷不同的與細胞凋亡相關的通路，觀察電針治療脊髓損傷的相關指標，明確在電針抗凋亡作用中起主導作用的信號轉導通路。

此外，大多數(shù)實驗研究所選取的腧穴都大相徑庭，不同的腧穴都有其獨特的主治作用，而不同的穴位配伍又會產生不一樣的疊加效應，不恰當?shù)难ㄎ慌湮榭赡軙嗷ヒ种茖е轮委熜Ч档?，而良好的配伍可以達到事半功倍的治療效果。因此，今后可以在規(guī)范化且治療方案統(tǒng)一的前提下探究電針抗凋亡機制的異同，或者在選取同一信號通路的前提下探究不同配伍對電針抗凋亡機制的影響。